ЛАБОРАТОРИЯ КЛЕТОЧНОЙ КОСМЕТИКИ

English (United Kingdom)
estra-X

СПИСОК ПАТЕНТОВ С УПОМИНАНИЕМ ГИАЛУРОНОВОЙ КИСЛОТЫ

  • 95114061 Способ получения гиалурона
  • 2017751 Способ получения гиалурона
  • 2192150 БАД для профилактики йодной недостаточности
  • 2112542 Препарат для лечения патологий соединительных тканей
  • 2225206 Препарат для лечения рака молочной железы
  • 2299733 Лечение опорно-двигательного аппарата
  • 2299732 Способ лечения глаукомы
  • 2299726 Противоинфекционная губная помада
  • 2299725 Косметическое средство для ухода за кожей
  • 2198878 Ароматическое соединение
  • 2198702 Способ подготовки трофических язв к аутодермапластике
  • 2198653 Вагинальные суппозитории
  • 2197946 Композиция для ухода за волосами
  • 2197923 Фармацевтическая композиция для лечения отеков роговицы
  • 2298410 Биотрансплантант и способ лечения ревматических и аутоиммунных заболеваний
  • 2197501 Фотоотверженный гель на основе сшитой гиалуроновой кислоты
  • 2197228 Твердые лекарственные формы
  • 2197222 Водная компазиция для ухода за волосами, лица и тела
  • 2297425 Полипептиды
  • 2297240 Композиция с гиалуроновой кислотой
  • 2297230 Фармацевтическая компазиция с ксантоновой смолой
  • 2196588 Глазные капли
  • 2195955 Применение биологически активных веществ
  • 2195926 Дерматологические композиции
  • 2295954 Микрочастицы для доставки нуклеиновых кислот
  • 2295951 Косметика для ухода за кожей лица и век
  • 2195262 Фармакологическое средство на основе гиалуроновой кислоты
  • 2194512 Способ профилактики и коррекции процесса старения кожи
  • 2194478 Лечение экземы
  • 2294716 Расширяемый стент
  • 2194055 Сшитые сополимеры
  • 2099350 Ассоциаты депротонированной гиалуроновой кислоты
  • 2293557 Средство для лечения кожи и слизистых
  • 2292878 Приготовление микроцастиц, содержащих метопропол
  • 2292746 БАД
  • 2192256 Защита кишечника
  • 2191782 Получение модифицированной гиалуроновой кислоты
  • 2292219 Паратиреоидный гормон человека
  • 2291686 Микроцастицы
  • 2191000 Косметическая маска
  • 2290921 Фармацевтические и косметические средства против старения кожи
  • 2290900 Модифицированный биоматериал для использования в офтальмологии
  • 2290899 Получение биоматерьяла
  • 2290397 Новые инданилиденовые соединения
  • 2290186 Лечение сирингомиелии
  • 2288702 Иррингационный раствор для офтальмологии
  • 2288699 Гель для лечения стоматологических заболеваний
  • 2188011 Активирующая остеогенез фармацевтическая композиция
  • 2187327 Средство с антисептиком
  • 2187325 Средство с радиопротекторным действием
  • 2287330 Композиции миноксидила
  • 2186786 Способ получения гиалуроновой кислоты
  • 2186593 Лечение раненого процесса кожи
  • 2286801 Очищение воды
  • 2286781 Лечение ожогов пищевода у детей
  • 2286764 Средство лечения воспалений полости рта
  • 2185840 Лечение инфекционных заболеваний
  • 2286151 Альфа-2-Дельта-Лиганда
  • 2185149 Ранозаживляющий гель
  • 2285527 Лечение ИЛ-6 заболеваний
  • 2184448 Раствор хранения роговицы, включающий гиалуроновую кислоту
  • 2090179 Крем для кожи
  • 2183961 Способ лечения кожи
  • 2284331 Соли алифотических аминов
  • 2284187 Производные амида
  • 2089191 Снизить внутрение давление
  • 2283320 Получение гликозаминогликанов
  • 2283129 Лечение опухолей
  • 2283098 Косметические средства с Q
  • 2182574 Ароматические соединения
  • 2088257 Средство с гипохолестеролемическим действием
  • 2088218 Состав для гигиенических салфеток
  • 2088206 Способ получения препарата, создающего исскуственный загар
  • 2282462 Противомикробные средства
  • 2182008 Интровагинальная компазиция
  • 2181999 Препарат с отсроченным высвобождением
  • 2181998 Новые композиции липидов
  • 2181995 Лечение болевого синдрома
  • 2181295 Вирионная вакцина
  • 2087144 Витамин Е
  • 2379336 Способ стирки
  • 2379052 Вакцинация
  • 2180855Композиция в виде ионного комплекса
  • 2379025 Противоинфекционный гель
  • 2180825 Лечение травм роговицы
  • 2281082 Способ коррекции эстетических и возрастных проблем кожи
  • 2180576 Биоактивная добавка для косметических средств
  • 2280459 Средство для изменения скорости роста или репродукции клеток
  • 2179981 Соли переходного металла
  • 2378010 Жидкие вакцины
  • 2378008 Комбинированные вакцины
  • 2378007 Анаболическое средство
  • 2377973 Растительные экстракты
  • 2280041 Способ получения водорастворимых комплексов гиалурил
  • 2280038 Биополимеры
  • 2323733 Йодный обмен
  • 2377260 Гель
  • 2178693 Противовирусное средство на основе гиалуроновой кислоты
  • 2178692 Облегчающие зуд косметическое средство
  • 2377022 Гемостатические спреи
  • 2376982 Увлажняющая сыворотка для лица
  • 2376974 Трансдермальный гель для лица
  • 2362784 Гипо-и гиперацетилированные менингокковые капсульные сахариды
  • 2177789 Устройство для доставки лекарства к шейке матки
  • 2277954 Крем для лица омолаживающий
  • 2376378 Способ получения метионина
  • 2177332 Биоматериал для предотвращения послеоперационных спаек, с производной гиалуроновой кислотой
  • 2177310 Способ получения таблеток
  • 2376011 Средство для позвоночника
  • 2277410 Косметическое средство
  • 2323748 Медицинская повязка
  • 2276998 Гидрогелевые композиции
  • 2082416 Способ получения препарата с коллагенном из животного сырья
  • 2375081 Адсорбирующее изделие
  • 2375049 Охлаждающий пластырь
  • 2346049 Способ получения гиалурона
  • 2275913 Фармацевтические средства
  • 2174985 Полисахарид с антиоксидантом
  • 2373957 Носитель для лекарственных средств и биологически активных веществ
  • 2373941 Способ коррекции возрастных и патологических изменений кожных покров
  • 2174845 Композиции и способы доставки генетического материала
  • 2174830 Средство для укрепления волос
  • 2373769 Синбиотическая композиция
  • 2274472 Лечение апорно-двигательного аппарата и болевых синдромов
  • 2372929 Профилактическая композиция на основе веществ фенольной природы в липосомной форме
  • 2173563 Способ нанесения на поверхность предметов покрытия на основе гиалуроновой кислоты, её производных и полусинтетических полимеров
  • 2079304 фармацевтическая композиция, обладающая иммуносупрессорной и антимикробной активностью
  • 2273645 Полипептид ожирения
  • 2173154 Фракция кератансульфатолигосахаридов и содержащий ее фармацевтический препарат
  • 2173136 Грязная мазь
  • 2173128 Способ хирургического лечения центральных разрывов сечатки
  • 2078561 Косметическое средство предотвращающее старение кожи
  • 2172490 Способ прогнозирования воспалительных заболеваний молочной железы при эндопластике
  • 2272645 Способ лечения ЦМВ-Инфекции у детей раннего возроста
  • 2272636 Фармацевтическая композиция для местного лечения воспаления
  • 2272635 Фармацевтически активная субстанция для офтальмологии
  • 2272599 Биоматерьял для стабилизации прогрессирующей миопии "Коллаплант"
  • 2172168 Средство для заживления ран на основе гиалуроновой кислоты
  • 2371172 Фармацевтическая композиция для лечения нервной системы на основе стефаглабрина
  • 2171470 Способ прогнозирования послеоперационной трансформации доброкачественных опухолей нервной системы
  • 2077317 Состав для ванн
  • 2271213 Комбинированные композиции, содержащие экстракты из растений и морских животных
  • 2076872 Способ получения окрашенной гиалуроновой кислоты
  • 2076671 Раствор для защиты роговицы
  • 2370281 Конъюгаты гидроксиалкилкрахмал
  • 2370275 Способ лечения (коррекции) косметических и возрастных дефектов кожи
  • 2370258 Фармацевтическая композиция для парентальной доставки в форме лиофилизата
  • 2270023 Способ экстракции и очистки протеогликана хрящего типа (варианты)
  • 2369408 Гемостатическая композиция, включающая гиалуроновую кислоту
  • 2369387 Фармацевтическая композиция для лечения нервной системы
  • 2369379 Нетаблитированные жевательные формы для индивидуального введения
  • 2169136 Производное коричной кислоты
  • 70792 Медицинский аппликатор
  • 20741717 Способ стабилизации аскорбиновой кислоты
  • 2074712 Способ получения препарата, препятствующего преждевременной эякуляции
  • 2367954 Способ прогнозирования развития кожной патологии у женщин с синдромом склерополикистозных яичников (СПКЯ)
  • 2268075 Устройство для электрокинетической доставки
  • 2268052 Средство для лечения воспалительных и дегенеративных заболеваний суставов
  • 2167649 Способ получения твердой дисперсии умеренного водорастворимого лекарственного вещества
  • 2167647 Гель для бритья
  • 2073520 Лечение урологических инфекций
  • 2367476 Биопластический материал
  • 2367475 Мембрана для использования при направленной регенерации тканей
  • 2367469 Фармацевтическая композиция на основе лизоамидазы
  • 2367456 Фармацевтическая композиция обладающая антибактериальным и некролитическим действием
  • 2367455 Фармацевтическая композиция обладающая некролитическим и антибактериальным действием
  • 2267324 Применение антиадгезивных углеводов, препарат для уменьшения и /или блокирования адгезии патогенных веществ
  • 2166934 Композиции включающие биологический агент
  • 2166510 Псевдодипептиды
  • 2366460 Композиции, имеющие высокую противовирусную и антибактериальную активность
  • 2360901 Производные феноксиуксусной кислоты
  • 2165749 Способ восстановления эндотелия роговицы
  • 2265441 Способ укрепления склеры
  • 2365382 Композиции и способы для регуляции развития сосудов
  • 2070879 Соли гликозаминогликанов
  • 2164914 Циклические и гетероциклические N - замещенные - иминогидроксамовые карбоновые кислоты
  • 2264627 Хламидийный конъюктивит
  • 2364399 Фармацевтический препарат на основе стефаглабрина
  • 2264230 Препарат с замедленным высвобождением активного вещества
  • 2363497 Фармацевтические композиции
  • 2363496 Способ увеличения объема мягких тканей
  • 2363473 Способ антифлогистической активации в эксперементе
  • 2363461 Фармацевтический препарат на основе сигетина
  • 2363459 Средства для введения в роговицу глаз для предотвращения офтальмологических нарушений
  • 2363448 Фармацевтические композиции
  • 2163123 Глазные капли
  • 2162687 Усовершенствованнная лекарственная форма индуктора интерферана
  • 2162343 Биосовместимый полимерный материал и способ его получения
  • 2162327 Лечение рака
  • 2067841 Способ получения ароматизатора
  • 2161478 Способ консервированого лечения гонартроза
  • 2361617 Вольфрамовые частицы в качестве рентгеноконтрастных веществ
  • 2361552 Способы и устройства для дренирования жидкостей и понижения внутриглазного давления
  • 2066996 Способ изготовления пленочного материала для офтальмохирургии
  • 2361417 Корм с глюкозамином и экстрактом ивы для профилактики артроза у животных
  • 2161002 Пищевой общеукрепляющий лечебно-профилактический продукт из хрящевой ткани акул
  • 2360928 Комплексная матрица для медико-биологического применения
  • 2160574 Способ лечения глаукомы
  • 2360688 Способ лечения повреждений переферических нервов
  • 2360670 Фармацевтическая композиция при климактерических расстройствах
  • 2360646 Эндолюминальный протез
  • 2260445 Способ усовершенствования транспортировки через легко прспосабливаемый полупроницаемый барьер
  • 2260007 Производные амида
  • 2359975 Способ получения модифицированных арабиногалактанов
  • 2359974 Антигенные Пептиды
  • 2159775 Псевдопептидный продукт
  • 2259833 Фармацевтическая композиция для лечения роговицы глаза
  • 2259816 Ранозаживляющее средство
  • 2259815 Способ коррекции возрастных изменений, связанных с процессами старения кожи
  • 2359706 Способ сохранения офтальмологических растворов
  • 2359704 Антисептическое средство
  • 2359662 Микрокапсулы
  • 2159253 Катионные полимеры
  • 2159111 Средство для ухода за кожей лица
  • 2159105 Композиция для защиты кожи от опасных химических веществ Получение
  • 2158593 Биосовместимый водный раствор
  • 2358728 Способ лечения и предупреждения потери костной ткани
  • 2258517 Способ хирургического лечения травмотических повреждений селезенки пленкой на основе гиалуроновой кислоты
  • 2357968 Кристалические формы производной имидазола
  • 2357957 Ингибиторы P38 и их применение
  • 2157647 Пищевая добавка и ее получение
  • 2357758 Препараты для чрескожной и чересслизистой добавки
  • 2063244 Способ стабилизации растворов
  • 2063140 Способ получения препарата для консервирования мяса
  • 2157381 Способ получения гиалуроновой кислоты
  • 2257198 Композиции микроцастиц
  • 2356909 Белковый комплекс
  • 2356570 Косметическая композиция
  • 2256434 Способ закрытия перфорации барабанной перепонки
  • 2356520 Способ лечения постконтузионного повреждения сечатки глаза
  • 2156133 Гель
  • 2255945 Полимерная композиция
  • 2355761 Средства повторной дифференцировки
  • 2061043 Способ повышения устойчивости урокиназы к нагреванию
  • 2061005 Способ получения красителей для гистологических исследований
  • 2355420 Зубная паста
  • 2355385 Композиции пролонгированного действия с контролируемым высвобождением
  • 2355240 Способ получения пищевого препарата хондропротекторного действия
  • 2155057 Пихтово репейный бальзам
  • 2354409 Способ производства высвобождающих лекарственные средчтва медицинских устройств
  • 2254145 Раневое покрытие на основе коллаген-хитозанового комплекса
  • 2254133 Лечение и профилактика ВИЧ-инфекции у человека
  • 2253439 Фармацевтическая композиция для защиты и улучшения оптических свойств роговици при проведении эндовитреальных вмешательств
  • 2253437 Способ омоложения кожи
  • 2153352 Фармацевтическая композиция обладающая ранозаживляющим и противовоспалительным действием
  • 2353354 Фармацевтический препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
  • 2252787 Способ получения искусственной матрицы кожи
  • 2252767 Способ нормализации иммунобиохимического гомеостаза коров в предродовом и послеродовом периодах
  • 2352583 Фармацевтическая композиция содержащая Fc-область иммуноглобулина в качестве носителя
  • 2152403 Модифицированные полисахариды
  • 2352356 Иммуногенная композиция
  • 2352342 Исскусственный физиологический солевый раствор Способ его получения
  • 2352330 Фармацевтический препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
  • 2352323 Фармацевтический препарат с модифицированным высвобождением
  • 2152027 Способ подготовки ткани мозга для определения гликозаминогликанов
  • 2251842 Интектицидный состав для борьбы с личинками оводов
  • 2151580 Способ активации пролиферации эндотелия роговицы
  • 2351648 Дифференцировка стромальных клеток, полученных из жировой ткани, в эндокринные клетки поджелудочной железы и их использование
  • 2351595 N - гидроксиформамидные соединения в качестве ингибиторов металлопротеина
  • 2251411 Косметическое средство в лиофилизированной фармацевтической форме
  • 2251405 Косметика...ее композиции для косметических препаратов
  • 2251367 Средство со сшитой гиалуроновой кислотой для наращивания тканей
  • 2351359 Косметика для профилактики и лечения избыточной массы тела
  • 2351322 Препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
  • 2351153 Диета при остеортрите собак
  • 2350958 Способ определения групповой принадлежности синовальной жидкости
  • 2350625 Производные гиалуроновой кислоты с пониженной биодеградируемостью
  • 2150266 Крем после бритья
  • 2350354 Фармацевтическое средство содержащие антагонист и фактор некроза
  • 2350340 Способ коррекции процессов регенерации
  • 2350309 Способ лечения избыточной массы тела с помощью рефлексотерапии
  • 2250047 Профилактический продукт из хрящевой ткани гидробионтов
  • 2249467 Медицинский матерьял и изделия на его основе
  • 2055079 Способ получения препарата гиалуроновой кислоты
  • 2349599 Биоадгезив мидии
  • 2054903 Способ лечения коллагеноза у бычков на откорме
  • 2249210 Способ прогнозирования предрасположенности к развитию и тяжести течения деформирующего остеоартроза коленного сустава у взрослых
  • 2349339 Средство для соединительной ткани
  • 2148988 Человеческий интерферона
  • 2148399 Лечение атеросклероза
  • 2148396 Способ определения активного вещества в дифильных мазевых основах
  • 2148375 Способ диагностики близорукости
  • 2348415 Способ противоспаечной терапии после хирургического вмешательства
  • 2348400 Препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
  • 2348386 Способ непроникающего хирургического лечения первичной открытоугольной глаукомы
  • 2248213 Лечение Галактозидальной А недостаточности
  • 2347586 Микрофлюидизированные эмульсии типа "масло в воде" и вакцинные средства
  • 2147243 Контрастное средство
  • 2146526 Лечебный препарат дисбактериоза и урогенитальных инфекций
  • 2146148 Терапевтическое применение фактора роста кератиноцитов (ФРК)
  • 2146139 Способ повышения активности макрофагов и комбинации для его осуществления
  • 2346277 Способ диагностики специфического синовита
  • 2345793 Ультразвуковые контрастные вещества и их получение
  • 2345782 Терапевтические комбинации на основе PORIFERA для лечения и предотвращения кожных заболеваний
  • 2245131 Способ коррекции косметических недостатков кожи
  • 2245130 Способ активации восстановительных процессов в коже
  • 2144833 Хондроитиназа
  • 2344809 Получение твердых дозированных форм с использованием сшитого нетермопластичного носителя
  • 2244540 Косметический гель для ухода за кожей лица
  • 2244536 Способ лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний тазобедренного сустава
  • 2344167 Хмелевый экстракт
  • 2143884 Агент регулирования дифференциации клеток кожи, культурная среда для клеток или тканей и способ регулирования дифференциации клеток кожи
  • 2343932 Способ получения обладающих пониженной растворимостью в воде пленночных материалов
  • 2343903 Устройство доставки лекарств для контролируемого введения препаратов
  • 2048817 Способ получения материала для лечения ожогов и гнойно - некронических ран
  • 2048803 Гидратантный крем
  • 2242974 Средства и способы лечения воспалительных заболнваний
  • 2142816 Способ получения антигерпетической вакцины
  • 2342923 Средство для обработки рук с увлажняющим эффектом
  • 2142781 Косметика для макияжа ресниц и бровей и агент ингирирующий рост микроорганизмов в косметических средствах
  • 2242251 Трансплантируемые стенты с биоактивными покрытиями
  • 2142257 Способ обработки глазных имплантантов и контакных линз
  • 2342389 Мононатриевая соль
  • 2342107 Способ устранения западения верхнего века при анофтальме
  • 2141828 Средство, пролонгирующее эффективность чесночного порошка
  • 2241489 Косметическое средство матриксных протеинов для залечивания ран
  • 2241443 Средство для лечения герпеса
  • 2241414 Способ получения протезов кровеносных сосудов
  • 2341539 Гидрогель
  • 2141324 Регулятор скорости воздействия препарата для инъекций
  • 2141312 Косметическое средство для ухода за кожей лица
  • 2341296 Средства и способы покрытия медицинских имплантантов
  • 2341272 Средство для неспецифической иммунотерапии
  • 2341266 Стенты с нанесенным покрытием содержащим N - (5-(4-(4-
  • 2341257 Иммуномодулирующее средство
  • 2341255 Средство для лечения климактерических расстройств
  • 2240821 Способ лечения урологических инфекций
  • 2140786 Способ лечения лишая
  • 2140243 Способ хирургического лечения диабетической ретинопатии и отслоек сечатной оболочки
  • 2240140 Медицинская многослойная повязка и изделия на ее основе
  • 2240135 Культура клеток, содержащая клетки - предшественники остеонегеза, имплантант на ее основе и его использование для восстановления целостности кости
  • 2240123 Экзогенные биологически активные коньюгирующие вещества
  • 2139886 Фотоотвержаемое производное гликозаминогликата, сшитое производное гликозаминогликата и способы их получения, способ предотвращения клеточной и тканевой адгезии
  • 2139729 Вакцина. Способ стимулирования иммунной системы
  • 2339386 Средство обладающее радио - и химиозащитным действием
  • 2339369 Лечение офтальмологических нарушений с использованием мочевины и ее производных
  • 2139041 Гидратантный регенерирующий крем и способ его получения
  • 2139039 Косметический суперкрем для ухода за кожей
  • 2139017 Способ получения боисовместимого материала
  • 2138503 Производные камптотецина, способы их получения, уникальное средство
  • 2338556 Средство содержащие антагонист Р2Х - рецептора и нестероидное противоспалительное лекарственное средство
  • 2338514 Косметическое средство для профилактики старения кожи
  • 2138297 Медицинские устройства, подверженные вызываемому разложению
  • 2138295 Покрытие для ран
  • 2337906 Ингибиторы цитозольной фосфолипазы А2 Применение физиологически допустимого корпускулярного ферримагнитного или ферромагнитного материала. Способ формирования магнитометрического изображения
  • 2137501 Устройство формирования изображения
  • 2137477 Способ лечения заболеваний характеризующихся аутоиммунной агрессией
  • 2137467 Крем для кожи лица и тела
  • 2137449 Способ коррекции дефектов преломления в глазу млекопитающего
  • 2137402 Пищевая Добавка БАД
  • 2336899 Способ стимуляции миелопоэза
  • 2336862 Способ получения раствора для лечения роговицы
  • 2336830 Способ восстановления костных структур челюсти
  • 2136696 Новый полипептид и средство против ВИЧ - Инфекции
  • 2336092 Биоадгезивное средство, по существу свободное от воды
  • 2336089 Средство и способ лечения заболеваний периодонтальных и пульпы
  • 2336074 Средства и способы лечения заднего сегмента глаза
  • 2235548 Ранозаживляющее средство
  • 2135186 Способ лечения рефлекторных синдромов при остеохондрозе
  • 2234945 Стабилизатор водного раствора и водосодержащего сырья
  • 2334762 Растворимая ассоциативная карбоксиметилцеллюлоза
  • 2234514 Макропористые хитозановые гранулы и способ их получения. Способ культивирования клеток
  • 2133615 Средство для лечения неврологических заболеваний
  • 2233164 Способ профилактики развития послеоперационных спаек брюшной полости
  • 2133127 Неткатный материал, способ его получения и способ лечения
  • 2333223 Альдегидные производные сиаловой кислоты и средства на их основе
  • 2333007 Полипептидные вакцины для широкой защиты против рядов поколений менингококов с повышенной вирулентностью
  • 2332985 Дозированные формы анестезирующих средств с длительным высвобождением для обезболивания
  • 2132677 Косметическая маска
  • 38603 Пленочный аппликатор
  • 2232594 Средство содержащие ингибирующие остеокластогенез фактор и полисахарид
  • 2332238 Средство для прокладок, раневых повязок и других изделий, контактирующих с кожей
  • 2331668 Стромальные клетки, получение из жировой ткани, для заживления дефектов роговицы и внутриглазных дефектов и их использование
  • 2331438 Альфа - 2 - Дельта Лигант для лечения симптомов нижних мочевыводящих путей
  • 2331411Электропряденые аморфные фармоцевтические средства
  • 2331367 Способ профилактики образования спаек и их рецидива
  • 2130767 Масло в воде для получения косметических и дерматологических средств, способ косметической обработки
  • 2230752 Поперечносшитые гиалуроновые кислоты и их применение в медицине
  • 2230558 Способ восстановления и сохранения здоровья скмьи
  • 2230550 Средства длительного высвобождения, способ их получения и применения
  • 2230458 Поддержания здоровья суставов
  • 2330290 Способ определения состояния метаболических процессов в ткани суставного хряща
  • 2230073 Способ поперечного сшивания карбоксилированных полисахаридов
  • 2329059 Способ лечения полипозного риносинусита
  • 2329037 Комбинированная терапия для лечения иммуновоспалительных заболеваний
  • 2128666 Гиалуроновая кислота и ее соли, способ очистки гиалуроновой кислоты, способ получения гиалуроновой кислоты. Фармацевтический препарат с гиалуроновой кислотой и средства с гиалуроновой кислотой используемые в офтальмологии
  • 2328740 Способ экспресс - оценки действия зубных паст
  • 2128502 Косметический гель
  • 2328272 Суппозитории индуктора интерферона
  • 2328268 Косметика содержащая амфолитный сополимер
  • 2128057 Композиционная мембрана, способ ее получения и способ направленной регенерации тканей с ее применением
  • 2128055 Средство замедленного освобождения и способ его получения
  • 2128049 Свечи
  • 2227743 Полипептидные варианты с повышенной гепаринсвязывающей способностью
  • 2326893 Ковалентное и нековалентное сшивание гидрофильных полимеров
  • 2326697 Новый перевязочный материал для быстрого заживления раневой поверхности кожи
  • 2126264 Фармацевтическое средство с гиалуроновой кислотой
  • 2326137 Способ получения содержащих альгинат пористых формованных изделий
  • 2325902 Способ выделения гликозаминогликанов из минерализованной соединительной ткани
  • 2225195 Репелленты против насекомых
  • 2325193 Сосудистый стент
  • 2325184 Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий
  • 2325153 Многокомпонентная фармацевтическая дозированная форма
  • 2325152 Удерживаемая в желудке система регулируемой доставки лекарственного средства
  • 2029955 Способ предоперационного определения помутнения задней капсулы хрусталика при экстракции катаракты
  • 2324688 Производные бисбензизоселеназолонила с противоопухолевым, противовоспалительным и антитромбоническим действием
  • 2323017 Устройство и способ контролируемый доставки активных веществ в кожу
  • 2323011 Содержащий Коллаген I и Коллаген II способный к рассасыванию внеклеточный матрикс, предназначенный для реконструирования хряща
  • 2322955 Способ изготовления имплантанта для пластики дефектов хрящевой ткани
  • 2322454 Антитело против CCR5
  • 2322263 Система продолжительного высвобождения растворимого лекарственного средства
  • 2221561 Витамин Е и его сложные эфиры
  • 2321634 Гены участвующие в метаболизме углерода и продуцировании энергии
  • 2321597 Биоматерьял, способ его приготовления и его применение, медицинское средство, имплантант и вкладыш
  • 2121340 Средство для похудения
  • 2220737 Средство для улучшения состояния опорно-двигательного аппарата
  • 2220729 Гель используемый в стоматологии
  • 2320720 Способ культивирования фибропластов для заместительной терапии
  • 2320378 Накожный аппликатор
  • 2320369 Средства, содержащие Альфа - 2 - Дельта Лиганды и ингибиторы обратного захвата серотонина/норадреналина
  • 2320362 Местные фармацевтические средства, содержащие проантоцианидины, для лечения дерматитов
  • 2320322 Биоадгезивная доставка лекарств
  • 2320318 Чувствительное к температуре изменяющие состояние средство гидрогеля
  • 2025120 Способ получения препарата, содержащего Фактор /G-CSF/, стимулирующий рост колоний гранулоцитов
  • 2319490 Средство для введения железа при лечении синдрома беспокойных ног
  • 25995 Содержащее адгезив приспособление для фиксации зубных протезов в полости рта
  • 2218907 Средство для ухода за кожей лица и веками
  • 2318830 Способ получения модифицированного дерматансульфата
  • 2118153 Косметика - туш для ресниц
  • 2217441 Способ получения полимера
  • 2317296 Изетионатная соль селективного ингибитора CDK4
  • 2217171 Мембрана для использования при направленной регенерации тканей
  • 2317095 Экстракты ECHINACEA ANGUSTIFOLIA
  • 2216332 Препарат для лечения астроза
  • 2216314 Крем - маска для обезвоженной кожи
  • 2316333 Средство оздоровительно-восстановительных косметических панто-магниевых ванн
  • 2021304 Способ получения биологически активного средства
  • 2115662 Способ получения гиалуроновой кислоты
  • 2315627 Впрыскиваемые имплантанты на керамической основе для заполнения морщин, кожных впадин, шрамов
  • 2315623 Средство получаемое путем лиофилизации препарата
  • 2114862 Способ получения гиалуроновой кислоты
  • 2314791 Лечебно-Косметическое средство
  • 2314791 Косметический крем-бальзам для ухода за кожей лица и шеи
  • 2214600 Способ оценки эффективности лечения неврологических проявлений
  • 2114602 Способ косметической обработки
  • 2114587 Раствор для защиты роговицы
  • 2214283 Имплантант для подкожного или внутрикожного введения
  • 2313370 Медицинские протезы, имеющие улучшенную биологическую совместимость
  • 2313356 Препарат для лечения демодекоза
  • 2313338 Средство на основе этиллинолеата и триэтилцитрата для лечения себореи и угрей
  • 2313328 Косметика содержащая тонкодисперный и пористый порошок
  • 2212880 Способ получения препарата содержащего антибиотик, с замедленным высвобождением активного вещества
  • 2312640 Способ лечения Блефароконьюнктивальной формы синдрома сухого глаза
  • 2017751 Способ получения гиалуроновой кислоты
  • 2312145 Гены CORYNEBACTERIUM GLUTAMICUM, кодирующие белки, участвующие в синтезе мембран и мембранном транспорте
  • 2311458 Белки вызывающие измененную иммуногенную реакцию. Способ их получения и использования
  • 2311183 Улучшенное разделение с использованием гталуроновой кислоты
  • 2311177 Ингибиторы интегрина для лечения заболевания глаз
  • 2300069 Косметическая маска
  • 2211024 Уход за сухой кожей
  • 2310440 Раствор для защиты роговицы от повреждений
  • 2309684 Лечение межфалангового остеоатроза узелковой формы
  • 2309406 Способ мониторинга фиброза печени у больных хроническим гепатитом с (ХГС)
  • 2209088 Опосредованная рецепторами доставка генов с использованием векторов на основе бактериофагов
  • 2308967 Уменьшение объема ткани
  • 2308962 Средство для опорно-дигательного аппарата
  • 2308957 Способ получения препарата для мезотерапии
  • 2308954 Средство для лечения ран, содержащее плазму или сыворотку крови
  • 2308951 Комплексный способ профилактики вагинальных дисбактериозов
  • 2308937 Косметическая биологически активная добавка и косметический литофитокомплекс на ее основе
  • 2208638 ДНК (варианты), способ получения белка
  • 2207885 Способ подачи небольшого объема лечебного раствора к целевому месту
  • 2207858 Лишенные побочных эффектов производные простагландинов для лечения глаукомы
  • 2207845 Твердая лекарственная форма пролонгированного действия
  • 2207844 Препарат для местного неинвазивного применения
  • 2207841 Средства с антиферментативным действием
  • 2306335 Стволовые клетки и решетки полученные из жировой ткани
  • 2306140 Новые рецепторы для Helicobacter pylori и их применение
  • 2205612 Способ эндотелизации IN VITRO протезов кровеносных сосудов
  • 2105540 Депигментирующее средство
  • 2304960 Косметическое средство для кожи
  • 2304616 Гены участвующие в гомеостазе и адаптации
  • 2204550Способ получения длинноцепочечной N-Ацилированной кислотой Аминокислот
  • 2204415 Способ получения изображения
  • 2204394 Средство для лечения грибковых инфекций, желудочных язв
  • 2204366 Способ хирургического лечения глаукомы
  • 2104034 Вагинальное увлажняющие средство, способ его получения
  • 2303991 Биологически активная добавка
  • 2303990 БАД
  • 2303973 Адсорбирующее изделие
  • 2203676 Средство обладающее иммунокорригирующим действием
  • 2203672 Способ предупреждения беременности
  • 2303635 Гены кодирующие белки резистентности и толерантности к стрессам
  • 2303529 Способ фиксации альгинатного геля на твердой фазе, способ получения клеточного чипа на его основе
  • 2203078 Способ лечения гнойных ран
  • 2302412 Гидразоно-малонитрилы
  • 2102400 Способ получения гиалуроновой кислоты
  • 2202356 Способ стимуляции репаративных процессов длительно незаживающих ран и трофических язв
  • 2202336 Средство для ухода за кожей
  • 2302231 Глазные капли
  • 2102082 Способ магнитометрического исследования тела человека или животного
  • 2301814 Полиакриламидный гидрогель
  • 2201765 Гибридные матричные имплантанты и эксплантанты
  • 2301677 Биотрансплантант для лечения дегенеративных и трвматических заболеваний хрящевой ткани и способ его получения
  • 2301676 Способ лечения ревматизма
  • 2301674 Способ лечения больных с переломами нижней челюсти
  • 2301661 Средство с регулируемым освобождением и способ его получения
  • 2005488 Средство для лечения болезней соединительной ткани
  • 2200001 Крем для кожи

 

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
Патент №2152027

(54) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ТКАНИ МОЗГА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ

(57) Реферат:

Способ может быть использован в медицине, а именно в морфологии для гистохимических исследований гликозаминогликанов тканей. С помощью денситометра проводят дифференцировку гликозаминогликанов по классам, с предварительным окрашиванием гистологических срезов стандартной толщины альциановым синим при рН от 1,0 до 4,0 с добавлением в качестве электролитов растворов NaCl с концентрацией 0,9% и MgCl2 с молярностью от 0,1 до 1,0 с ферментативным контролем и метилированием. Способ позволяет выявить и дифференцировать гликозаминогликаны по классам в тканях, определить их процентное содержание и соотношение между собой, выявить особенности локализации разных классов гликозаминогликанов в ткани мозга, что позволяет упростить существующие методы, снизить себестоимость и повысить эффективность результатов. Изобретение относится к медицине, а именно к морфологии и может быть использовано для гистохимических исследований гликозаминогликанов (ГАГ) тканей. В настоящее время для выявления ГАГ в тканях используют биохимические, гистохимические и электронно-гистохимические методы. Биохимические методы очень трудоемкие, сложные и дорогие, хотя и позволяют получить качественные и количественные результаты и выделить ГАГ в "чистом" виде, но не позволяют проследить взаимосвязь ГАГ с клеточными структурами и другими неклеточными компонентами (Слуцкий Л. И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани. Л. : Медицина, 1969. - 376 с.). Известные гистохимические методы (Луппа Х. Основы гистохимии. М.: Мир, 1980, с. 136-137.) определения ГАГ в тканях позволяют выявить их все, т.е. суммарно, но не позволяют разделить на классы и определить процентное соотношение разных классов ГАГ (гиалуроновая кислота, хондроитин, хондроитин-4-сульфат, хондроитин-6-сульфат, дерматан-сульфат, гепарин, гепаран-сульфат, кератан-сульфат) в ткани. Электронно-гистохимические методы (Гайер И. Электронная гистохимия. М. : Мир, 1974, с. 52-71) исследования ГАГ очень сложные, трудоемкие и дорогие, хотя они и позволяют не только выявить ГАГ, но изучить их расположение в цитоплазме клеток и межклеточном матриксе. Этот метод не позволяют дифференцировать ГАГ по классам. Актуальной задачей исследователей остается разработка простого и широкодоступного способа подготовки тканей для выявления ГАГ, дифференцировки по классам, определения их процентного содержания, соотношения между собой и особенности локализации в межклеточном веществе тканей. Прототипом изобретения является способ выявления ГАГ при окрашивании тканей альциановым синим (Луппа Х. Основы гистохимии. М.: Мир, 1980, с. 135-138. ). Этот способ позволяет определить присутствие сульфатированных и несульфатированных ГАГ в тканях, для этого используют 1%-ный раствор альцианового синего при pH 1,0 и pH 2,5. Однако применение этого способа не позволяет отдифференцировать ГАГ по классам, отсутствует возможность получения процентного содержания ГАГ в тканях, не позволяет получить процентное соотношение разных классов ГАГ в тканях между собой и проследить особенности локализации разных классов ГАГ в ткани. Целью изобретения является выявление и дифференцировка ГАГ по классам в тканях, определения их процентного содержания и соотношения между собой, выявления особенностей локализации разных классов ГАГ в ткани мозга, что позволяет упростить существующие методы, снизить себестоимость и повысить эффективность результатов. Данная цель достигается способом подготовки тканей для определения ГАГ на денситометре путем окрашивания их, отличающийся тем, что стандартные гистологические срезы помещают на 30 минут в 0,35%-ный раствор альцианового синего с pH от 1,0 до 4,0 (с добавлением 0,9% NaCl в качестве электролита) и MgCl2 с молярностью от 0,1 до 1,0 с ферментативным контролем и метилированием. Способ подготовки ткани мозга для определения ГАГ и дифференцировки их по классам (гиалуроновая кислота, хондроитин, хондроитин-4-сульфат, хондроитин-6-сульфат, дерматан-сульфат, гепарин, гепаран-сульфат, кератан-сульфат) осуществляется следующим образом. Ткань мозга забирается через 15-20 минут после смерти и помещается в замораживающий криостат, на котором получают стандартные срезы (в большом количестве), толщиной 10 мкм и переносят их на предметные стекла. Затем 1-ю серию срезов окрашивают в 0,35%-ном растворе альцианового синего при pH 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5 и 4,0 (pH растворов до требуемых доводилась HCl, концентрация которых составляла - от 3,65% до 0,91% HCl) в течение 30 минут (все растворы красителя содержат также 0,9% NaCl в качестве электролита) при температуре 18-23oC. После этого 2-ю серию срезов помещают в 0,35%-ный раствор альцианового синего при pH от 1,0 до 4,0, но с добавлением MgCl2, имеющим молярности от 0,1 до 1,0 MgCl2 (0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 и 1,0 MgCl2 в каждом растворе с разными pH) на 30 минут при температуре 18-23oC. Затем 3-я серия срезов обрабатывается тестикулярной гиалуронидазой (другую часть срезов - обрабатывают бактериальной гиалуронидазой). Срезы обрабатываются в растворе, состоящем из 0,6 мг/мл тестикулярной гиалуронидазы в 0,1 н. фосфатном буфере (pH 6,0), в течение 4-6 часов при температуре 37oC. (Ферменты разводят на физиологическом растворе. Для этого в 100 мл дистилированной воды растворяют 0,85 г хлористого натрия, а затем добавляют 30 мл ферментного препарата с учетом того, что для гиалуронидазы оптимальная концентрация NaCl лежит между 0,07 - 0,17 М). Далее 4-я часть срезов инкубируется в течение 6 - 15 часов при температуре 37oC, в растворе, содержащим 15 ед. бактериальной гиалуронидазы в 1 мл 0,3%-ного раствора хлористого натрия. Затем эти срезы окрашивают в течение 1,5 часа в 0,35%-ном растворе альцианового синего при pH от 1,0 до 4,0 с MgCl2 (во всех красителях), имеющим молярности - 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 и 1,0 MgCl2 при температуре 18-23oC (В этих сериях - срезы ткани мозга окрашиваются при разных pH и молярностях MgCl2 - см. указанные выше). Пятая часть срезов мозга переносится в метиловый спирт для метилирования (Луппа Х. , 1980, с. 185-187.). Срезы мозга помещают на 4 часа при 60oC в метиловый спирт, содержащий 0,1 г-экв соляной кислоты (1 мл соляной кислоты с уд. весом 1,19 в 99 мл метанола). Затем срезы переносят в 70%-ный этанол на 10-20 минут при температуре 18-23oC, после чего помещают в воду на 1-5 минут при той же температуре. Затем срезы окрашивают в 0,35%-ном растворе альцианового синего при pH от 1,0 до 4,0 с MgCl2 (во всех красителях), имеющим молярности - 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 и 1,0 (В этой серии - срезы ткани мозга также окрашиваются при разных pH и молярностях MgCl2 - см. указанные выше). Шестая часть срезов мозга обрабатывается пепсином и трипсином для удаления белков. Инкубацию гистологических срезов мозга осуществляют в 0,5%-ном растворе пепсина в 0,1 н. HCl (раствор имеет pH 1,2) в течение 5-30 минут при температуре 37oC. Другую серию срезов помещают в 0,3%-ный раствор трипсина в воде при pH 8,0 в течение 1-23 часов при температуре 37oC. Затем все гистологические срезы промывают водой в течение 5-30 минут при температуре 18-23oC, после этого их окрашивают в течение 30 минут в 0,35%-ном растворе альцианового синего при разных его pH и разных молярностях MgCl2 (см. выше). В седьмой серии - срезы мозга инкубировали с пепсином и трипсином (см. выше), промывали водой, потом обрабатывали тестикулярной гиалуронидазой (см. выше) и окрашивали в течение 1 часа в 0,35%-ном растворе альцианового синего при разных pH и разных молярностях MgCl2 (см. выше). Все окрашенные срезы мозга промывают в воде - 5 минут, обезвоживают по стандартной методике в ряду спиртов возрастающей концентрации, помещают в ксилол и заливают в бальзам. Затем проводят денситометрические исследования всех окрашенных срезов, которые анализируются на анализаторе фореграмм - АФ-1. Анализ осуществляется следующим образом. Серия резов размещается по одной линии на сканирующем столике между лучом проходящего света и анализатора. На экране монитора результат сканирования гистологических срезов мозга представлен графически с указанием процентного содержания и соотношения исследуемого вещества. Пример. Ткань мозга забирается через 15 минут после смерти и помещается в криостат, на котором получают стандартные срезы (в большом количестве), толщиной 10 мкм и переносят их на предметные стекла. Затем срезы окрашивают в 0,35%-ном растворе альцианового синего при pH 1,0 (концентрация раствора HCl - 3,65%) в течение 30 минут (раствор красителя содержат также 0,9% NaCl в качестве электролита) при температуре 18oC. После этого другая часть срезов помещается в 0,35%-ный раствор альцианового синего при pH 1,0, но с добавлением MgCl2, имеющим молярность - 0,1 М MgCl2 на 30 минут при температуре 18oC. Затем часть срезов обрабатывается тестикулярной гиалуронидазой (другую часть срезов - обрабатывают бактериальной гиалуронидазой). Срезы обрабатываются в растворе, состоящем из 0,6 мг/мл тестикулярной гиалуронидазы в 0,1 н. фосфатном буфере (pH 6,0), в течение 4 часов при температуре 37oC. (Ферменты разводят на физиологическом растворе. Для этого в 100 мл дистиллированной воды растворяют 0,85 г хлористого натрия, а затем добавляют 30 мл ферментного препарата). Другая часть срезов инкубируется в течение 6 часов при температуре 37oC, в растворе, содержащем 15 ед. бактериальной гиалуронидазы в 1 мл 0,3%-ного раствора хлористого натрия. Затем срезы окрашивают в течение 1,5 часа в 0,35%-ном растворе альцианового синего при pH 1,0 с 0,1 М MgCl2 при температуре 18oC. Другая часть срезов мозга переносится в метиловый спирт для метилирования. Срезы мозга помещают на 4 часа при 60oC в метиловый спирт, содержащий 0,1 г-экв соляной кислоты (1 мл соляной кислоты с уд. весом 1,19 в 99 мл метанола). Затем срезы переносят в 70%-ный этанол на 20 минут при температуре 18oC, после чего помещают в воду на 5 минут при той же температуре. Затем срезы окрашивают в 0,35%-ном растворе альцианового синего при pH 1,0 с 0,1 М MgCl2. Следующая часть срезов мозга обрабатывается пепсином и трипсином для удаления белков. Инкубацию гистологических срезов мозга осуществляют в 0,5%-ном растворе пепсина в 0,1 н. HCl (раствор имеет pH 1,2) в течение 30 минут при температуре 37oC. Другую серию срезов помещают в 0,3%-ный раствор трипсина в воде при pH 8,0 на 1 час при температуре 37oC. Затем все гистологические срезы промывают водой в течение 30 минут при температуре 18oC, после этого их окрашивают в течение 30 минут в 0,35%-ном растворе альцианового синего при pH 1,0 с 0,1 М MgCl2. В следующей серии - срезы мозга инкубировали с пепсином и трипсином (см. выше), промывали водой, потом обрабатывали тестикулярной гиалуронидазой (см. выше) и окрашивали в течение 1 часа в 0,35%-ном растворе альцианового синего при pH 1,0 с 0,1 М MgCl2. Все окрашенные срезы мозга промывают в воде - 5 минут, обезвоживают по стандартной методике в ряду спиртов возрастающей концентрации, помещают в ксилол и заливают в бальзам. Затем проводят денситометрические исследования всех окрашенных срезов, которые анализируются на анализаторе фореграмм - АФ-1. Первоначально проводят дифференцировку сульфатированных и не сульфатированных ГАГ, при этом выявляют интенсивное голубое окрашивание межклеточного матрикса при pH 1,0 - 4,0, которое исчезает при pH 2,5 - 4,0 - после обработки бактериальной и тестикулярной гиалуронидазой. Таким образом, можно предположить наличие в ткани гиалуроновой кислоты, хондроитин-4-сульфата и хондроитин-6-сульфата. При pH 1,0 наблюдается умеренное окрашивание в голубой цвет межклеточного матрикса. После обработки трипсином интенсивность окраски увеличивается, что свидетельствует о возможном присутствии сульфатированных ГАГ (гепаран-сульфат, гепарин, кератан-сульфат). Затем проводят дифференцировку ГАГ между гиалуроновой кислотой и хондроитин-сульфатами. Срезы перед окрашиванием обрабатываются метанолом, связывающим сульфатные группы. Было показано, что основное вещество содержит ГК, т. к. оно окрашивается в голубой цвет после обработки метанолом. В волокнистых структурах голубое окрашивание исчезало, что позволяет отметить в них содержание хондроитин-сульфатов. Далее проводят дифференцировку сульфатированных ГАГ. Голубое окрашивание волокнистых структур обнаруживается только после предварительной обработки препаратов трипсином при окраске их альциановым синим при 0,2 М и 0,4 М раствора MgCl2 и постепенно нарастает в 0,8 М и 1,0 М растворе MgCl2. На срезах межклеточное вещество ткани мозга при pH 0,2 М MgCl2 слабо окрашивалось альциановым синим в голубой цвет по сравнению с 1,0 М MgCl2. После этого осуществляется дифференцировка сульфатированных ГАГ в ткани мозга, для чего препараты сначала обрабатываются пепсином, а затем тестикулярной гиалуронидазой, и окрашиваются альциановым синим. Голубое окрашивание в межклеточных структурах позволяет сделать вывод о присутствии в них сульфатированных ГАГ, устойчивых к действию гиалуронидазы. На экране денситометра наблюдается кривая с указанием процентного содержания исследуемого вещества - гиалуроновая кислота - 48,5%, хондроитин-4-сульфат - 17,7%, хондроитин-6-сульфат - 13,5%, гепарин и гепаран-сульфат - 20,3%. Полученные данные были подтверждены биохимическими и электрофоретическими исследованиями. Альциановый синий 8 GS (8 GX) образует с полианионами сильноокрашенные нерастворимые в воде пигменты. Специфичность окрашивания альциановым синим можно контролировать. При этом играют роль три следующих фактора: условия окрашивания, предварительная химическая и ферментативная обработка. Так, при длительном окрашивании (4-12 часов) выявляются почти все компоненты ткани, тогда как при менее длительном (около 30 минут) удается более или менее специфично выявить ГАГ эпителиального и соединительно-тканного происхождения. Различия между сульфатированными и несульфатированными ГАГ наиболее надежно устанавливаются при определенных значениях pH раствора красителя и при добавлении электролитов. Использование раствора красителя с pH 1,0 позволяет выявить лишь кислые ГАГ с сульфатными и сульфоновыми группами, тогда как при pH 2,0 и более выявляются главным образом протеогликаны, содержащие группы уроновой кислоты. Протеогликаны, содержащие сульфатированные и карбоксильные группы, связывают альциановый синий при более низких концентрациях электролитов (концентрация MgCl2 ниже 0,3 М), тогда как при концентрациях MgCl2 0,8 М и выше окрашиваются исключительно протеогликаны, содержащие SO4-группы. И наконец, в присутствии электролитов (HCl, NaCl, KCl) окрашивание альциановым синим усиливается. Влияние электролитов на связывание альцианового синего свидетельствует в пользу ведущей роли электростатических сил при связывании альцианового синего с субстратом. При метилировании срезов ткани в течение 6 часов полностью снимается ее базофилия. Базофилия цитоплазмы, обусловленная COOH-группами и РНК, снимается через 30 минут, а базофилия, обусловленная присутствием сульфатированных ГАГ - через 4 часа. Окрашивание, присутствующее в контрольных срезах и отсутствующее в срезах, обработанных гиалуронидазой, свидетельствует о наличии гиалуроновой кислоты и хондроитинсульфатов. Часто применяют два вида гиалуронидазы: тестикулярную и бактериальную. Бактериальная действует на гиалуроновую кислоту, тестикулярная обладает более широким спектром действия и расщепляет хондроитин-4,6-сульфаты (на дерматансульфаты, кератансульфаты и гепарин ни одна гиалуронидаза не действует). При длительном воздействии (24-48 часов) тестикулярная гиалуронидаза может вызывать также гидролиз муко- и гликопротеидов. Переваривание гиалуронидазой может усиливать или вызывать предварительное окисление некоторых структур уксусной кислотой. Добавление NaCl усиливает активность фермента. Предлагаемый способ подготовки ткани мозга для определения гликозаминогликанов не требует дорогого оборудования и реактивов, обладает по сравнению с прототипом следующими преимуществами: позволяет подготовить ткани таким образом, что по изменению ее окрашивания в межклеточном пространстве можно определить разные классы ГАГ и выявить их локализацию, определить их процентное содержание и соотношение разных классов ГАГ между собой.


Формула изобретения

Способ подготовки ткани мозга для определения гликозаминогликанов, путем окрашивания тканей альциановым синим, отличающийся тем, что стандартные гистологические срезы помещают на 30 мин в 0,35% раствор альцианового синего с pH от 1,0 до 4,0 затем добавляют в качестве электролитов растворы 0,9% NaCl и 0,1 - 1,0 M MgCl2, проводят ферментативный контроль, метилирование и денситометрический анализ.

 
Copyright© 2006-2010 Cell Cosmetics Laboratories Ltd. Все материалы оригинальные. Перепечатка возможна со ссылкой на http://www.placenta-lab.ru