СПИСОК ПАТЕНТОВ С УПОМИНАНИЕМ ГИАЛУРОНОВОЙ КИСЛОТЫ
-
- 2017751 Способ получения гиалурона
- 2192150 БАД для профилактики йодной недостаточности
- 2112542 Препарат для лечения патологий соединительных тканей
- 2225206 Препарат для лечения рака молочной железы
- 2299733 Лечение опорно-двигательного аппарата
- 2299732 Способ лечения глаукомы
- 2299726 Противоинфекционная губная помада
- 2299725 Косметическое средство для ухода за кожей
- 2198878 Ароматическое соединение
- 2198702 Способ подготовки трофических язв к аутодермапластике
- 2198653 Вагинальные суппозитории
- 2197946 Композиция для ухода за волосами
- 2197923 Фармацевтическая композиция для лечения отеков роговицы
- 2298410 Биотрансплантант и способ лечения ревматических и аутоиммунных заболеваний
- 2197501 Фотоотверженный гель на основе сшитой гиалуроновой кислоты
- 2197228 Твердые лекарственные формы
- 2197222 Водная компазиция для ухода за волосами, лица и тела
- 2297425 Полипептиды
- 2297240 Композиция с гиалуроновой кислотой
- 2297230 Фармацевтическая компазиция с ксантоновой смолой
- 2196588 Глазные капли
- 2195955 Применение биологически активных веществ
- 2195926 Дерматологические композиции
- 2295954 Микрочастицы для доставки нуклеиновых кислот
- 2295951 Косметика для ухода за кожей лица и век
- 2195262 Фармакологическое средство на основе гиалуроновой кислоты
- 2194512 Способ профилактики и коррекции процесса старения кожи
- 2194478 Лечение экземы
- 2294716 Расширяемый стент
- 2194055 Сшитые сополимеры
- 2099350 Ассоциаты депротонированной гиалуроновой кислоты
- 2293557 Средство для лечения кожи и слизистых
- 2292878 Приготовление микроцастиц, содержащих метопропол
- 2292746 БАД
- 2192256 Защита кишечника
- 2191782 Получение модифицированной гиалуроновой кислоты
- 2292219 Паратиреоидный гормон человека
- 2291686 Микроцастицы
- 2191000 Косметическая маска
- 2290921 Фармацевтические и косметические средства против старения кожи
- 2290900 Модифицированный биоматериал для использования в офтальмологии
- 2290899 Получение биоматерьяла
- 2290397 Новые инданилиденовые соединения
- 2290186 Лечение сирингомиелии
- 2288702 Иррингационный раствор для офтальмологии
- 2288699 Гель для лечения стоматологических заболеваний
- 2188011 Активирующая остеогенез фармацевтическая композиция
- 2187327 Средство с антисептиком
- 2187325 Средство с радиопротекторным действием
- 2287330 Композиции миноксидила
- 2186786 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2186593 Лечение раненого процесса кожи
- 2286801 Очищение воды
- 2286781 Лечение ожогов пищевода у детей
- 2286764 Средство лечения воспалений полости рта
- 2185840 Лечение инфекционных заболеваний
- 2286151 Альфа-2-Дельта-Лиганда
- 2185149 Ранозаживляющий гель
- 2285527 Лечение ИЛ-6 заболеваний
- 2184448 Раствор хранения роговицы, включающий гиалуроновую кислоту
- 2090179 Крем для кожи
- 2183961 Способ лечения кожи
- 2284331 Соли алифотических аминов
- 2284187 Производные амида
- 2089191 Снизить внутрение давление
- 2283320 Получение гликозаминогликанов
- 2283129 Лечение опухолей
- 2283098 Косметические средства с Q
- 2182574 Ароматические соединения
- 2088257 Средство с гипохолестеролемическим действием
- 2088218 Состав для гигиенических салфеток
- 2088206 Способ получения препарата, создающего исскуственный загар
- 2282462 Противомикробные средства
- 2182008 Интровагинальная компазиция
- 2181999 Препарат с отсроченным высвобождением
- 2181998 Новые композиции липидов
- 2181995 Лечение болевого синдрома
- 2181295 Вирионная вакцина
- 2087144 Витамин Е
- 2379336 Способ стирки
- 2379052 Вакцинация
- 2180855Композиция в виде ионного комплекса
- 2379025 Противоинфекционный гель
- 2180825 Лечение травм роговицы
- 2281082 Способ коррекции эстетических и возрастных проблем кожи
- 2180576 Биоактивная добавка для косметических средств
- 2280459 Средство для изменения скорости роста или репродукции клеток
- 2179981 Соли переходного металла
- 2378010 Жидкие вакцины
- 2378008 Комбинированные вакцины
- 2378007 Анаболическое средство
- 2377973 Растительные экстракты
- 2280041 Способ получения водорастворимых комплексов гиалурил
- 2280038 Биополимеры
- 2323733 Йодный обмен
- 2377260 Гель
- 2178693 Противовирусное средство на основе гиалуроновой кислоты
- 2178692 Облегчающие зуд косметическое средство
- 2377022 Гемостатические спреи
- 2376982 Увлажняющая сыворотка для лица
- 2376974 Трансдермальный гель для лица
- 2362784 Гипо-и гиперацетилированные менингокковые капсульные сахариды
- 2177789 Устройство для доставки лекарства к шейке матки
- 2277954 Крем для лица омолаживающий
- 2376378 Способ получения метионина
- 2177332 Биоматериал для предотвращения послеоперационных спаек, с производной гиалуроновой кислотой
- 2177310 Способ получения таблеток
- 2376011 Средство для позвоночника
- 2277410 Косметическое средство
- 2323748 Медицинская повязка
- 2276998 Гидрогелевые композиции
- 2082416 Способ получения препарата с коллагенном из животного сырья
- 2375081 Адсорбирующее изделие
- 2375049 Охлаждающий пластырь
- 2346049 Способ получения гиалурона
- 2275913 Фармацевтические средства
- 2174985 Полисахарид с антиоксидантом
- 2373957 Носитель для лекарственных средств и биологически активных веществ
- 2373941 Способ коррекции возрастных и патологических изменений кожных покров
- 2174845 Композиции и способы доставки генетического материала
- 2174830 Средство для укрепления волос
- 2373769 Синбиотическая композиция
- 2274472 Лечение апорно-двигательного аппарата и болевых синдромов
- 2372929 Профилактическая композиция на основе веществ фенольной природы в липосомной форме
- 2173563 Способ нанесения на поверхность предметов покрытия на основе гиалуроновой кислоты, её производных и полусинтетических полимеров
- 2079304 фармацевтическая композиция, обладающая иммуносупрессорной и антимикробной активностью
- 2273645 Полипептид ожирения
- 2173154 Фракция кератансульфатолигосахаридов и содержащий ее фармацевтический препарат
- 2173136 Грязная мазь
- 2173128 Способ хирургического лечения центральных разрывов сечатки
- 2078561 Косметическое средство предотвращающее старение кожи
- 2172490 Способ прогнозирования воспалительных заболеваний молочной железы при эндопластике
- 2272645 Способ лечения ЦМВ-Инфекции у детей раннего возроста
- 2272636 Фармацевтическая композиция для местного лечения воспаления
- 2272635 Фармацевтически активная субстанция для офтальмологии
- 2272599 Биоматерьял для стабилизации прогрессирующей миопии "Коллаплант"
- 2172168 Средство для заживления ран на основе гиалуроновой кислоты
- 2371172 Фармацевтическая композиция для лечения нервной системы на основе стефаглабрина
- 2171470 Способ прогнозирования послеоперационной трансформации доброкачественных опухолей нервной системы
- 2077317 Состав для ванн
- 2271213 Комбинированные композиции, содержащие экстракты из растений и морских животных
- 2076872 Способ получения окрашенной гиалуроновой кислоты
- 2076671 Раствор для защиты роговицы
- 2370281 Конъюгаты гидроксиалкилкрахмал
- 2370275 Способ лечения (коррекции) косметических и возрастных дефектов кожи
- 2370258 Фармацевтическая композиция для парентальной доставки в форме лиофилизата
- 2270023 Способ экстракции и очистки протеогликана хрящего типа (варианты)
- 2369408 Гемостатическая композиция, включающая гиалуроновую кислоту
- 2369387 Фармацевтическая композиция для лечения нервной системы
- 2369379 Нетаблитированные жевательные формы для индивидуального введения
- 2169136 Производное коричной кислоты
- 70792 Медицинский аппликатор
- 20741717 Способ стабилизации аскорбиновой кислоты
- 2074712 Способ получения препарата, препятствующего преждевременной эякуляции
- 2367954 Способ прогнозирования развития кожной патологии у женщин с синдромом склерополикистозных яичников (СПКЯ)
- 2268075 Устройство для электрокинетической доставки
- 2268052 Средство для лечения воспалительных и дегенеративных заболеваний суставов
- 2167649 Способ получения твердой дисперсии умеренного водорастворимого лекарственного вещества
- 2167647 Гель для бритья
- 2073520 Лечение урологических инфекций
- 2367476 Биопластический материал
- 2367475 Мембрана для использования при направленной регенерации тканей
- 2367469 Фармацевтическая композиция на основе лизоамидазы
- 2367456 Фармацевтическая композиция обладающая антибактериальным и некролитическим действием
- 2367455 Фармацевтическая композиция обладающая некролитическим и антибактериальным действием
- 2267324 Применение антиадгезивных углеводов, препарат для уменьшения и /или блокирования адгезии патогенных веществ
- 2166934 Композиции включающие биологический агент
- 2166510 Псевдодипептиды
- 2366460 Композиции, имеющие высокую противовирусную и антибактериальную активность
- 2360901 Производные феноксиуксусной кислоты
- 2165749 Способ восстановления эндотелия роговицы
- 2265441 Способ укрепления склеры
- 2365382 Композиции и способы для регуляции развития сосудов
- 2070879 Соли гликозаминогликанов
- 2164914 Циклические и гетероциклические N - замещенные - иминогидроксамовые карбоновые кислоты
- 2264627 Хламидийный конъюктивит
- 2364399 Фармацевтический препарат на основе стефаглабрина
- 2264230 Препарат с замедленным высвобождением активного вещества
- 2363497 Фармацевтические композиции
- 2363496 Способ увеличения объема мягких тканей
- 2363473 Способ антифлогистической активации в эксперементе
- 2363461 Фармацевтический препарат на основе сигетина
- 2363459 Средства для введения в роговицу глаз для предотвращения офтальмологических нарушений
- 2363448 Фармацевтические композиции
- 2163123 Глазные капли
- 2162687 Усовершенствованнная лекарственная форма индуктора интерферана
- 2162343 Биосовместимый полимерный материал и способ его получения
- 2162327 Лечение рака
- 2067841 Способ получения ароматизатора
- 2161478 Способ консервированого лечения гонартроза
- 2361617 Вольфрамовые частицы в качестве рентгеноконтрастных веществ
- 2361552 Способы и устройства для дренирования жидкостей и понижения внутриглазного давления
- 2066996 Способ изготовления пленочного материала для офтальмохирургии
- 2361417 Корм с глюкозамином и экстрактом ивы для профилактики артроза у животных
- 2161002 Пищевой общеукрепляющий лечебно-профилактический продукт из хрящевой ткани акул
- 2360928 Комплексная матрица для медико-биологического применения
- 2160574 Способ лечения глаукомы
- 2360688 Способ лечения повреждений переферических нервов
- 2360670 Фармацевтическая композиция при климактерических расстройствах
- 2360646 Эндолюминальный протез
- 2260445 Способ усовершенствования транспортировки через легко прспосабливаемый полупроницаемый барьер
- 2260007 Производные амида
- 2359975 Способ получения модифицированных арабиногалактанов
- 2359974 Антигенные Пептиды
- 2159775 Псевдопептидный продукт
- 2259833 Фармацевтическая композиция для лечения роговицы глаза
- 2259816 Ранозаживляющее средство
- 2259815 Способ коррекции возрастных изменений, связанных с процессами старения кожи
- 2359706 Способ сохранения офтальмологических растворов
- 2359704 Антисептическое средство
- 2359662 Микрокапсулы
- 2159253 Катионные полимеры
- 2159111 Средство для ухода за кожей лица
- 2159105 Композиция для защиты кожи от опасных химических веществ Получение
- 2158593 Биосовместимый водный раствор
- 2358728 Способ лечения и предупреждения потери костной ткани
- 2258517 Способ хирургического лечения травмотических повреждений селезенки пленкой на основе гиалуроновой кислоты
- 2357968 Кристалические формы производной имидазола
- 2357957 Ингибиторы P38 и их применение
- 2157647 Пищевая добавка и ее получение
- 2357758 Препараты для чрескожной и чересслизистой добавки
- 2063244 Способ стабилизации растворов
- 2063140 Способ получения препарата для консервирования мяса
- 2157381 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2257198 Композиции микроцастиц
- 2356909 Белковый комплекс
- 2356570 Косметическая композиция
- 2256434 Способ закрытия перфорации барабанной перепонки
- 2356520 Способ лечения постконтузионного повреждения сечатки глаза
- 2156133 Гель
- 2255945 Полимерная композиция
- 2355761 Средства повторной дифференцировки
- 2061043 Способ повышения устойчивости урокиназы к нагреванию
- 2061005 Способ получения красителей для гистологических исследований
- 2355420 Зубная паста
- 2355385 Композиции пролонгированного действия с контролируемым высвобождением
- 2355240 Способ получения пищевого препарата хондропротекторного действия
- 2155057 Пихтово репейный бальзам
- 2354409 Способ производства высвобождающих лекарственные средчтва медицинских устройств
- 2254145 Раневое покрытие на основе коллаген-хитозанового комплекса
- 2254133 Лечение и профилактика ВИЧ-инфекции у человека
- 2253439 Фармацевтическая композиция для защиты и улучшения оптических свойств роговици при проведении эндовитреальных вмешательств
- 2253437 Способ омоложения кожи
- 2153352 Фармацевтическая композиция обладающая ранозаживляющим и противовоспалительным действием
- 2353354 Фармацевтический препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2252787 Способ получения искусственной матрицы кожи
- 2252767 Способ нормализации иммунобиохимического гомеостаза коров в предродовом и послеродовом периодах
- 2352583 Фармацевтическая композиция содержащая Fc-область иммуноглобулина в качестве носителя
- 2152403 Модифицированные полисахариды
- 2352356 Иммуногенная композиция
- 2352342 Исскусственный физиологический солевый раствор Способ его получения
- 2352330 Фармацевтический препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2352323 Фармацевтический препарат с модифицированным высвобождением
- 2152027 Способ подготовки ткани мозга для определения гликозаминогликанов
- 2251842 Интектицидный состав для борьбы с личинками оводов
- 2151580 Способ активации пролиферации эндотелия роговицы
- 2351648 Дифференцировка стромальных клеток, полученных из жировой ткани, в эндокринные клетки поджелудочной железы и их использование
- 2351595 N - гидроксиформамидные соединения в качестве ингибиторов металлопротеина
- 2251411 Косметическое средство в лиофилизированной фармацевтической форме
- 2251405 Косметика...ее композиции для косметических препаратов
- 2251367 Средство со сшитой гиалуроновой кислотой для наращивания тканей
- 2351359 Косметика для профилактики и лечения избыточной массы тела
- 2351322 Препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2351153 Диета при остеортрите собак
- 2350958 Способ определения групповой принадлежности синовальной жидкости
- 2350625 Производные гиалуроновой кислоты с пониженной биодеградируемостью
- 2150266 Крем после бритья
- 2350354 Фармацевтическое средство содержащие антагонист и фактор некроза
- 2350340 Способ коррекции процессов регенерации
- 2350309 Способ лечения избыточной массы тела с помощью рефлексотерапии
- 2250047 Профилактический продукт из хрящевой ткани гидробионтов
- 2249467 Медицинский матерьял и изделия на его основе
- 2055079 Способ получения препарата гиалуроновой кислоты
- 2349599 Биоадгезив мидии
- 2054903 Способ лечения коллагеноза у бычков на откорме
- 2249210 Способ прогнозирования предрасположенности к развитию и тяжести течения деформирующего остеоартроза коленного сустава у взрослых
- 2349339 Средство для соединительной ткани
- 2148988 Человеческий интерферона
- 2148399 Лечение атеросклероза
- 2148396 Способ определения активного вещества в дифильных мазевых основах
- 2148375 Способ диагностики близорукости
- 2348415 Способ противоспаечной терапии после хирургического вмешательства
- 2348400 Препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2348386 Способ непроникающего хирургического лечения первичной открытоугольной глаукомы
- 2248213 Лечение Галактозидальной А недостаточности
- 2347586 Микрофлюидизированные эмульсии типа "масло в воде" и вакцинные средства
- 2147243 Контрастное средство
- 2146526 Лечебный препарат дисбактериоза и урогенитальных инфекций
- 2146148 Терапевтическое применение фактора роста кератиноцитов (ФРК)
- 2146139 Способ повышения активности макрофагов и комбинации для его осуществления
- 2346277 Способ диагностики специфического синовита
- 2345793 Ультразвуковые контрастные вещества и их получение
- 2345782 Терапевтические комбинации на основе PORIFERA для лечения и предотвращения кожных заболеваний
- 2245131 Способ коррекции косметических недостатков кожи
- 2245130 Способ активации восстановительных процессов в коже
- 2144833 Хондроитиназа
- 2344809 Получение твердых дозированных форм с использованием сшитого нетермопластичного носителя
- 2244540 Косметический гель для ухода за кожей лица
- 2244536 Способ лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний тазобедренного сустава
- 2344167 Хмелевый экстракт
- 2143884 Агент регулирования дифференциации клеток кожи, культурная среда для клеток или тканей и способ регулирования дифференциации клеток кожи
- 2343932 Способ получения обладающих пониженной растворимостью в воде пленночных материалов
- 2343903 Устройство доставки лекарств для контролируемого введения препаратов
- 2048817 Способ получения материала для лечения ожогов и гнойно - некронических ран
- 2048803 Гидратантный крем
- 2242974 Средства и способы лечения воспалительных заболнваний
- 2142816 Способ получения антигерпетической вакцины
- 2342923 Средство для обработки рук с увлажняющим эффектом
- 2142781 Косметика для макияжа ресниц и бровей и агент ингирирующий рост микроорганизмов в косметических средствах
- 2242251 Трансплантируемые стенты с биоактивными покрытиями
- 2142257 Способ обработки глазных имплантантов и контакных линз
- 2342389 Мононатриевая соль
- 2342107 Способ устранения западения верхнего века при анофтальме
- 2141828 Средство, пролонгирующее эффективность чесночного порошка
- 2241489 Косметическое средство матриксных протеинов для залечивания ран
- 2241443 Средство для лечения герпеса
- 2241414 Способ получения протезов кровеносных сосудов
- 2341539 Гидрогель
- 2141324 Регулятор скорости воздействия препарата для инъекций
- 2141312 Косметическое средство для ухода за кожей лица
- 2341296 Средства и способы покрытия медицинских имплантантов
- 2341272 Средство для неспецифической иммунотерапии
- 2341266 Стенты с нанесенным покрытием содержащим N - (5-(4-(4-
- 2341257 Иммуномодулирующее средство
- 2341255 Средство для лечения климактерических расстройств
- 2240821 Способ лечения урологических инфекций
- 2140786 Способ лечения лишая
- 2140243 Способ хирургического лечения диабетической ретинопатии и отслоек сечатной оболочки
- 2240140 Медицинская многослойная повязка и изделия на ее основе
- 2240135 Культура клеток, содержащая клетки - предшественники остеонегеза, имплантант на ее основе и его использование для восстановления целостности кости
- 2240123 Экзогенные биологически активные коньюгирующие вещества
- 2139886 Фотоотвержаемое производное гликозаминогликата, сшитое производное гликозаминогликата и способы их получения, способ предотвращения клеточной и тканевой адгезии
- 2139729 Вакцина. Способ стимулирования иммунной системы
- 2339386 Средство обладающее радио - и химиозащитным действием
- 2339369 Лечение офтальмологических нарушений с использованием мочевины и ее производных
- 2139041 Гидратантный регенерирующий крем и способ его получения
- 2139039 Косметический суперкрем для ухода за кожей
- 2139017 Способ получения боисовместимого материала
- 2138503 Производные камптотецина, способы их получения, уникальное средство
- 2338556 Средство содержащие антагонист Р2Х - рецептора и нестероидное противоспалительное лекарственное средство
- 2338514 Косметическое средство для профилактики старения кожи
- 2138297 Медицинские устройства, подверженные вызываемому разложению
- 2138295 Покрытие для ран
- 2337906 Ингибиторы цитозольной фосфолипазы А2 Применение физиологически допустимого корпускулярного ферримагнитного или ферромагнитного материала. Способ формирования магнитометрического изображения
- 2137501 Устройство формирования изображения
- 2137477 Способ лечения заболеваний характеризующихся аутоиммунной агрессией
- 2137467 Крем для кожи лица и тела
- 2137449 Способ коррекции дефектов преломления в глазу млекопитающего
- 2137402 Пищевая Добавка БАД
- 2336899 Способ стимуляции миелопоэза
- 2336862 Способ получения раствора для лечения роговицы
- 2336830 Способ восстановления костных структур челюсти
- 2136696 Новый полипептид и средство против ВИЧ - Инфекции
- 2336092 Биоадгезивное средство, по существу свободное от воды
- 2336089 Средство и способ лечения заболеваний периодонтальных и пульпы
- 2336074 Средства и способы лечения заднего сегмента глаза
- 2235548 Ранозаживляющее средство
- 2135186 Способ лечения рефлекторных синдромов при остеохондрозе
- 2234945 Стабилизатор водного раствора и водосодержащего сырья
- 2334762 Растворимая ассоциативная карбоксиметилцеллюлоза
- 2234514 Макропористые хитозановые гранулы и способ их получения. Способ культивирования клеток
- 2133615 Средство для лечения неврологических заболеваний
- 2233164 Способ профилактики развития послеоперационных спаек брюшной полости
- 2133127 Неткатный материал, способ его получения и способ лечения
- 2333223 Альдегидные производные сиаловой кислоты и средства на их основе
- 2333007 Полипептидные вакцины для широкой защиты против рядов поколений менингококов с повышенной вирулентностью
- 2332985 Дозированные формы анестезирующих средств с длительным высвобождением для обезболивания
- 2132677 Косметическая маска
- 38603 Пленочный аппликатор
- 2232594 Средство содержащие ингибирующие остеокластогенез фактор и полисахарид
- 2332238 Средство для прокладок, раневых повязок и других изделий, контактирующих с кожей
- 2331668 Стромальные клетки, получение из жировой ткани, для заживления дефектов роговицы и внутриглазных дефектов и их использование
- 2331438 Альфа - 2 - Дельта Лигант для лечения симптомов нижних мочевыводящих путей
- 2331411Электропряденые аморфные фармоцевтические средства
- 2331367 Способ профилактики образования спаек и их рецидива
- 2130767 Масло в воде для получения косметических и дерматологических средств, способ косметической обработки
- 2230752 Поперечносшитые гиалуроновые кислоты и их применение в медицине
- 2230558 Способ восстановления и сохранения здоровья скмьи
- 2230550 Средства длительного высвобождения, способ их получения и применения
- 2230458 Поддержания здоровья суставов
- 2330290 Способ определения состояния метаболических процессов в ткани суставного хряща
- 2230073 Способ поперечного сшивания карбоксилированных полисахаридов
- 2329059 Способ лечения полипозного риносинусита
- 2329037 Комбинированная терапия для лечения иммуновоспалительных заболеваний
- 2128666 Гиалуроновая кислота и ее соли, способ очистки гиалуроновой кислоты, способ получения гиалуроновой кислоты. Фармацевтический препарат с гиалуроновой кислотой и средства с гиалуроновой кислотой используемые в офтальмологии
- 2328740 Способ экспресс - оценки действия зубных паст
- 2128502 Косметический гель
- 2328272 Суппозитории индуктора интерферона
- 2328268 Косметика содержащая амфолитный сополимер
- 2128057 Композиционная мембрана, способ ее получения и способ направленной регенерации тканей с ее применением
- 2128055 Средство замедленного освобождения и способ его получения
- 2128049 Свечи
- 2227743 Полипептидные варианты с повышенной гепаринсвязывающей способностью
- 2326893 Ковалентное и нековалентное сшивание гидрофильных полимеров
- 2326697 Новый перевязочный материал для быстрого заживления раневой поверхности кожи
- 2126264 Фармацевтическое средство с гиалуроновой кислотой
- 2326137 Способ получения содержащих альгинат пористых формованных изделий
- 2325902 Способ выделения гликозаминогликанов из минерализованной соединительной ткани
- 2225195 Репелленты против насекомых
- 2325193 Сосудистый стент
- 2325184 Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий
- 2325153 Многокомпонентная фармацевтическая дозированная форма
- 2325152 Удерживаемая в желудке система регулируемой доставки лекарственного средства
- 2029955 Способ предоперационного определения помутнения задней капсулы хрусталика при экстракции катаракты
- 2324688 Производные бисбензизоселеназолонила с противоопухолевым, противовоспалительным и антитромбоническим действием
- 2323017 Устройство и способ контролируемый доставки активных веществ в кожу
- 2323011 Содержащий Коллаген I и Коллаген II способный к рассасыванию внеклеточный матрикс, предназначенный для реконструирования хряща
- 2322955 Способ изготовления имплантанта для пластики дефектов хрящевой ткани
- 2322454 Антитело против CCR5
- 2322263 Система продолжительного высвобождения растворимого лекарственного средства
- 2221561 Витамин Е и его сложные эфиры
- 2321634 Гены участвующие в метаболизме углерода и продуцировании энергии
- 2321597 Биоматерьял, способ его приготовления и его применение, медицинское средство, имплантант и вкладыш
- 2121340 Средство для похудения
- 2220737 Средство для улучшения состояния опорно-двигательного аппарата
- 2220729 Гель используемый в стоматологии
- 2320720 Способ культивирования фибропластов для заместительной терапии
- 2320378 Накожный аппликатор
- 2320369 Средства, содержащие Альфа - 2 - Дельта Лиганды и ингибиторы обратного захвата серотонина/норадреналина
- 2320362 Местные фармацевтические средства, содержащие проантоцианидины, для лечения дерматитов
- 2320322 Биоадгезивная доставка лекарств
- 2320318 Чувствительное к температуре изменяющие состояние средство гидрогеля
- 2025120 Способ получения препарата, содержащего Фактор /G-CSF/, стимулирующий рост колоний гранулоцитов
- 2319490 Средство для введения железа при лечении синдрома беспокойных ног
- 25995 Содержащее адгезив приспособление для фиксации зубных протезов в полости рта
- 2218907 Средство для ухода за кожей лица и веками
- 2318830 Способ получения модифицированного дерматансульфата
- 2118153 Косметика - туш для ресниц
- 2217441 Способ получения полимера
- 2317296 Изетионатная соль селективного ингибитора CDK4
- 2217171 Мембрана для использования при направленной регенерации тканей
- 2317095 Экстракты ECHINACEA ANGUSTIFOLIA
- 2216332 Препарат для лечения астроза
- 2216314 Крем - маска для обезвоженной кожи
- 2316333 Средство оздоровительно-восстановительных косметических панто-магниевых ванн
- 2021304 Способ получения биологически активного средства
- 2115662 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2315627 Впрыскиваемые имплантанты на керамической основе для заполнения морщин, кожных впадин, шрамов
- 2315623 Средство получаемое путем лиофилизации препарата
- 2114862 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2314791 Лечебно-Косметическое средство
- 2314791 Косметический крем-бальзам для ухода за кожей лица и шеи
- 2214600 Способ оценки эффективности лечения неврологических проявлений
- 2114602 Способ косметической обработки
- 2114587 Раствор для защиты роговицы
- 2214283 Имплантант для подкожного или внутрикожного введения
- 2313370 Медицинские протезы, имеющие улучшенную биологическую совместимость
- 2313356 Препарат для лечения демодекоза
- 2313338 Средство на основе этиллинолеата и триэтилцитрата для лечения себореи и угрей
- 2313328 Косметика содержащая тонкодисперный и пористый порошок
- 2212880 Способ получения препарата содержащего антибиотик, с замедленным высвобождением активного вещества
- 2312640 Способ лечения Блефароконьюнктивальной формы синдрома сухого глаза
- 2017751 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2312145 Гены CORYNEBACTERIUM GLUTAMICUM, кодирующие белки, участвующие в синтезе мембран и мембранном транспорте
- 2311458 Белки вызывающие измененную иммуногенную реакцию. Способ их получения и использования
- 2311183 Улучшенное разделение с использованием гталуроновой кислоты
- 2311177 Ингибиторы интегрина для лечения заболевания глаз
- 2300069 Косметическая маска
- 2211024 Уход за сухой кожей
- 2310440 Раствор для защиты роговицы от повреждений
- 2309684 Лечение межфалангового остеоатроза узелковой формы
- 2309406 Способ мониторинга фиброза печени у больных хроническим гепатитом с (ХГС)
- 2209088 Опосредованная рецепторами доставка генов с использованием векторов на основе бактериофагов
- 2308967 Уменьшение объема ткани
- 2308962 Средство для опорно-дигательного аппарата
- 2308957 Способ получения препарата для мезотерапии
- 2308954 Средство для лечения ран, содержащее плазму или сыворотку крови
- 2308951 Комплексный способ профилактики вагинальных дисбактериозов
- 2308937 Косметическая биологически активная добавка и косметический литофитокомплекс на ее основе
- 2208638 ДНК (варианты), способ получения белка
- 2207885 Способ подачи небольшого объема лечебного раствора к целевому месту
- 2207858 Лишенные побочных эффектов производные простагландинов для лечения глаукомы
- 2207845 Твердая лекарственная форма пролонгированного действия
- 2207844 Препарат для местного неинвазивного применения
- 2207841 Средства с антиферментативным действием
- 2306335 Стволовые клетки и решетки полученные из жировой ткани
- 2306140 Новые рецепторы для Helicobacter pylori и их применение
- 2205612 Способ эндотелизации IN VITRO протезов кровеносных сосудов
- 2105540 Депигментирующее средство
- 2304960 Косметическое средство для кожи
- 2304616 Гены участвующие в гомеостазе и адаптации
- 2204550Способ получения длинноцепочечной N-Ацилированной кислотой Аминокислот
- 2204415 Способ получения изображения
- 2204394 Средство для лечения грибковых инфекций, желудочных язв
- 2204366 Способ хирургического лечения глаукомы
- 2104034 Вагинальное увлажняющие средство, способ его получения
- 2303991 Биологически активная добавка
- 2303990 БАД
- 2303973 Адсорбирующее изделие
- 2203676 Средство обладающее иммунокорригирующим действием
- 2203672 Способ предупреждения беременности
- 2303635 Гены кодирующие белки резистентности и толерантности к стрессам
- 2303529 Способ фиксации альгинатного геля на твердой фазе, способ получения клеточного чипа на его основе
- 2203078 Способ лечения гнойных ран
- 2302412 Гидразоно-малонитрилы
- 2102400 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2202356 Способ стимуляции репаративных процессов длительно незаживающих ран и трофических язв
- 2202336 Средство для ухода за кожей
- 2302231 Глазные капли
- 2102082 Способ магнитометрического исследования тела человека или животного
- 2301814 Полиакриламидный гидрогель
- 2201765 Гибридные матричные имплантанты и эксплантанты
- 2301677 Биотрансплантант для лечения дегенеративных и трвматических заболеваний хрящевой ткани и способ его получения
- 2301676 Способ лечения ревматизма
- 2301674 Способ лечения больных с переломами нижней челюсти
- 2301661 Средство с регулируемым освобождением и способ его получения
- 2005488 Средство для лечения болезней соединительной ткани
- 2200001 Крем для кожи
|
РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
|
Патент №2166510 |
(54) ПСЕВДОДИПЕПТИДЫ, СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ, СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ
(57) Реферат:
Описываются новые псевдопептиды, полученные путем конденсации гистамина или метилзамещенного гистамина и аминокислоты, общей формулы I, где А означает аминогруппу или амидогруппу, представленную СН3ОСОNH; R1 и R'1 представляют атом водорода или один из них представляет атом водорода, а другой - углеводородный радикал; R" представляет атом водорода или группу СН3; Y, Z каждый являются атомами водорода; n - целое число больше или равное 1, при условии, что  - аланин-гистамин исключается. Соединения могут найти применение как активное начало в таких областях, как терапия и косметология, а также в качестве фактора, улучшающего стабильность композиций, применяемых в терапии, косметологии, сельском хозяйстве и пищевой промышленности. Описываются также способы их получения, фармацевтические композиции и способы лечения. 9 с. и 20 з.п.ф-лы, 1 ил., 9 табл.  Изобретение относится к продуктам, получаемым из гистамина и, в особенности, к продуктам конденсации гистамина или метилзамещенного гистамина и аминокислоты, способу их приготовления и применения как активного начала в таких областях, как терапия и косметология, а также в качестве фактора (агента), улучшающего стабильность композиций, применяемых в терапии, косметологии, сельском хозяйстве и пищевой промышленности (области). Биологические характеристики дипептидов, подобных -аланил-гистидину, представляют интерес в отношении их возможности увеличивать естественные защитные и репарационные свойства организма. Однако, несмотря на то, что соединения, подобные -аланил-гистидину, включающие в свой состав одну или более аминокислот, обладают различными видами активностей и хорошо переносятся организмом, их эффективность значительно снижена из-за быстрого разрушения указанных соединений в организме. Кроме того, несмотря на снижение чувствительности очень малых пептидов к ферментативному разрушению (J. Dressman "Opportunities for peptide absorbtion in the GI tract", Communication GTRV 1992, Paris), процесс ферментативной дезактивации дипептидов может в некоторых случаях привести к высвобождению гистамина. Такая "прогистаминная активность", связанная с потерей активности исходного препарата, является нежелательной в рамках данного изобретения. Поэтому главной целью данного изобретения является создание пептоидных продуктов, близких к вышеуказанным дипептидам, но эффективность которых не снижается из-за отсутствия их разрушения в организме. Другим объектом изобретения является создание псевдопептидных продуктов, получаемых из гистамина и характеризующихся действием на повышение уровня защитных и репарационных процессов в организме. Еще одним объектом изобретения является получение вышеупомянутого псевдопептидного продукта, биодоступность которого улучшена благодаря ацетилированию концевой аминогруппы. Еще одним объектом изобретения является получение пептоидного продукта, имеющего вышеупомянутую ацетильную группу, как указано выше, так, что гидролиз продукта ферментами, относящимися к ацетилпептид гидролазам, приводит к высвобождению физиологически активных соединений in situ. Таким образом, изобретение относится к созданию псевдодипептидных продуктов, получаемых путем конденсации гистамина или метилзамещенного гистамина и аминокислоты, имеющих формулу:
 ,
где A представляет радикал, выбранный из группы, включающей аминный, амидный, лактамовый или уретановый; R1, R'1, R2, R'2... Rn, R'n являются атомами водорода или углеводородными радикалами, которые могут быть замещены одной или несколькими функциональными группами; Y и Z являются либо атомом водорода, либо фтора, либо углеводородным радикалом, который может быть заменен одной или несколькими функциональными группами; n - целое число, больше или равное 1; ковалентная связь с гистамином или метилзамещенным гистамином является пептидной связью между карбоксильной группой (карбоксильным радикалом) аминокислоты и аминогруппой (аминным радикалом) гистамина. Другим объектом изобретения является псевдодипептид, определенный ранее, в котором атом кислорода карбонильной группы, находящейся в месте конденсации аминокислоты и гистамина, замещен атомом серы. Среди аминокислот, соответcвующих формуле изобретения, следующие аминокислоты дают наилучшие результаты:
- аланин, формулой которого является
H2N-CH2-CH2-COOH
 - аминомасляная кислота, формулой которой является
H2N-CH2-CH2-CH2-COOH
- аминоизомасляная кислота, формулой которой является
5-аминовалерьяновая кислота, формулой которой является
H2N-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH
3-фенил-3-аминопропионовая кислота, формулой которой является
6-аминокапроновая кислота, формулой которой является
H2N-(CH2)5-COOH
8-аминооктановая кислота, формулой которой является:
H2N-(CH2)7-COOH
4-метил-аминомасляная кислота, формулой которой является
CH3-HN-CH2-CH2-CH2-COОH
DL--аминомасляная кислота, формулой которой является
L-глутаминовая кислота, формулой которой является
 . Аминокислоты, в которых произведено пироглутаминирование аминогруппы (аминорадикала)
 ,
или следующие аминокислоты, в которых концевая аминогруппа была ацетилирована. Фактически гидролиз этой группы некоторыми ферментами, типа ацетилпептидгидролаз, позволяет поддерживать in situ образование активного продукта. N-ацетил--аланин
N-ацетил-3-фенил-3-аминопропионовая кислота
 . Помимо этого ацилирование аминокислоты придает ей заданные антиоксидантные свойства, что усиливает биологическую активность псевдодипептидного продукта в соответствии с изобретением
 . Тем не менее, -аланин является аминокислотой, позволяющей получать псевдодипептидный продукт, полностью удовлетворяющий объектам данного изобретения. - Аланин может быть сопряжен как с гистамином, формула которого
так и с 1-метил-гистамином или 1-метил-имидоазолетил-амином
или с 3-метил-гистамином или 3-метил-имидоазолетил-амином
 . Предпочтительным псевдодипептидом в рамках данного изобретения является - аланил-гистамин, формула которого
 . Получение псевдодипептидного продукта согласно изобретению может быть произведено как с помощью химического процесса, так и с помощью синтеза, частично или полностью ферментативного. Процесс химического получения продукта происходит по следующей схеме
Первая стадия процесса заключается в N-защите аминогруппы аминокислоты (AA) путем конденсации с X-агентом и O-активации карбоксигруппы путем образования связи с Y-группой (Y- конденсация). N-защита предпочтительно осуществляется путем замещения атома водорода в аминокислотной аминогруппе на X- группировку, которой могут быть ацил-, ацилоксирадикалы и другие. Среди протекторных групп, представляющих наибольший интерес, можно назвать бензилоксикарбонильную, трет-бутилоксикарбонильную (Boc), 9-флуоренилметил-оксикарбонильную (Fmoc), бензильные радикалы, фталоил, 2-нитрофенил-сульфенил, трифторацетил, но трет-бутилоксикарбонильная - являются предпочтительной. Хотя можно обойтись и без этого, но активация карбоксигруппы является одной из характеристик процесса получения псевдодипептидного продукта согласно данному изобретению. Эта активация проводится преимущественно путем эстерификации аминокислотной карбоксигруппы соединениями из следующей группы: цианометилового спирта, o-нитрофенола, 2,4,5-трихлорфенола, p-нитрофенола, 2,4-динитрофенола, пентахлорфенола, пентафторфенола, N-гидроксифталемида, N-гидроксисукцинимида, 1- гидроксипиперидина и 5-хлор-8-гидроксихинолина. Так, если в качестве Y-группы использовать пентафторфенол, то реакция с аминокислотой (R-COOH) согласно изобретению осуществляется следующим образом
 . Вторым этапом процесса получения продукта является образование связи с гистамином, которое может быть осуществлено в присутствии или отсутствие агента конденсации, при этом аминокислота имеет протектор аминогруппы и/или активатор карбоксильной группы для реакции с гистамином преимущественно в форме дигидрохлорида. Следует отметить, что конденсирующий агент несущественен для взаимодействия с аминокислотой, имеющей активированную карбоксильную группу (O-активация аминокислоты). Образование связи в отсутствие конденсирующих агентов осуществляется в органическом растворителе (например, хлороформе, 1,2-диметоксиэтане, диметилформамиде и т.д.) вместе с кислотой (например, уксусной и др.) или основанием (например, триэтиламином и др. ), в водно-органическом растворителе (например, смесях пиридин-вода или вода-1,2-диметоксиэтан и т.д.) вместе с основанием (например, едким натром или бикарбонатом натрия и др.), затем с кислотой (например, соляной кислотой и др.); в некоторых каталитических условиях (например, имидазол, N-этилморфолин и др.). В случае использования конденсирующего агента, им могут являться, например, дициклогексил-карбодиимид (DCC), 1- изобутилоксикарбонил-2-изобутилокси-1,2-ди-гидрохинолин, карбонилдиимидазол, K-реагент Вудворда, a-хлорвинил этиловый эфир, а,a-дихлордиэтиловый эфир, дихлорметил метиловый эфир, DCC с добавлениями, DCC-пентахлорфенол, DCC-пентафторфенол, цианамид, кетимины и кетены, соли оксазолия, EEDQ (1-этоксикарбонил-2- этокси-1,2-дигидрохинолин), инамины ацилфосфониумов, трифенилфосфит и имидазол, комплексы двухвалентной меди, SiCl4 и др. На третьем этапе синтеза продукта удаляется конденсирующая группа X или N-защитная группа. Удаление защитной группы осуществляется путем гидрогенолиза, восстановлением натрия в жидком аммиаке, гидразинолизом, ацидолизом, гидролизом или ферментативным путем. Предпочтительное осуществление этого этапа заключается в снятии защиты путем проведения ацидолиза соляной кислотой в уксусной кислоте. На этом последнем этапе псевдодипептидный продукт получается в форме гидрохлорида, и поэтому он должен быть обработан щелочной смолой, для того чтобы перевести продукт в форму основания. В качестве примера может быть рассмотрено получение - аланил-гистамина следующим образом:
370 мг гистамина гидрохлорида (2 ммоль) растворяют в 7 мл диметилформамида (DMF). 0,56 мл триэтиламина (4 ммоль) смешивают с 800 мг N-трет-бутилоксикарбонил--аланил-пентафторфенилового эфира (2,25 ммоль). Смесь перемешивают в течение 30 минут при 0oC, а затем, в течение 3 часов, при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают и затем промывают диметилформамидом, который затем выпаривают в вакууме. К осадку добавляют эфир, и полученное маслянистое вещество-N-трет-бутилоксикарбонил- -аланил-гистамин отделяется от смеси декантированием. Затем получают аланил-гистамин гидрохлорид путем обработки N-трет-бутилоксикарбонил- - -аланил-гистамина в течение 30 минут соляной кислотой, растворенной в уксусной кислоте. Уксусная кислота частично удаляется под вакуумом и к осадку снова добавляют эфир. Затем осадок отфильтровывают. Перекристаллизация в системе этанол/метанол (50/50) - этиловый эфир приводит к получению 300 мг -аланил-гистамин гидрохлорида. Окончательно -аланил-гистамин в своей основной форме получают при элюировании гидрохлорида продукта с помощью соответствующих смол. Метод ферментативного синтеза осуществляют путем нижеприведенной реакции конденсации аминокислоты (AA), содержащей N-защищенную (X) и активированную карбоксильную (Y) группы
В этом случае N-защита, которая была уже описана при получении препарата химическим путем, позволяет повысить растворимость аминокислоты в реакционной среде. Можно выбрать конденсирующую X-группу таким образом, чтобы увеличить растворимость аминокислоты в соответствующем органическом растворителе. Предпочтительно использовать в качестве аминопротектора бензилоксикарбонильный радикал. X=Ph-CH2-O-CO-
O-активация карбоксильной группы может быть осуществлена путем эстерификации карбоксильного радикала аминокислоты одним из спиртов, входящих в следующую группу: алифатические спирты, предпочтительно этанол, галогеноалкил спирты, такие как 2,2,2,- трихлорэтанол, ароматические спирты, такие как фенол, а также спирты, уже упомянутые для получения продукта химическим путем. Однако третичные спирты должны быть исключены. Реакция конденсации с гистамином (или его метилированными формами), или солью гистамина (или его метилированными формами), например, дигидрохлоридом гистамина, проводится в различных органических растворителях, таких как, алифатические углеводороды (циклогексан, гептан и др.) или ароматические соединения (толуол), третичные спирты (трет-бутанол, трет-амиловый спирт), алкилгалоиды (метиленхлорид), эфиры (изопропиловый эфир), ацетонитрил, диметилформамид или диметилсульфоксид. Указанные растворители могут быть использованы как одни, так и в смеси друг с другом, они могут быть как безводными, так и содержащими небольшое количество воды. Реакция может быть проведена как без оснований, так и с ними, как, например, с триэтиламином. Ферментным катализатором может являться гидролаза (липаза) микробного, животного или растительного происхождения, как в очищенном, так и неочищенном состоянии. Так, в качестве катализатора могут использоваться липазы, экстрагированные из микроорганизмов: Pseudomonas sp., Candida rugosa, Mucor sp. или же - животного происхождения: панкреатическая липаза свиньи (LPP), протеазы: трипсин, химотрипсин, субстилизин, папаин и др. Катализаторы, нерастворимые в реакционной среде, распределяются в растворе непосредственно или на инертном носителе, для того чтобы облегчить их рециклизацию. Реакция проводится в диапазоне температур от 4oC до 70oC, но предпочтительно от 35oC до 45oC при постоянном перемешивании. Продукт сопряжения собирается путем фильтрации или экстракции в соответствующем растворителе. Удаление защитных групп и очистка могут быть проведены в соответствии с вышеописанным методом для препаративного химического процесса. Однако этап удаления защитных групп может быть проведен с помощью ферментативной реакции в соответствии со следующей диаграммой
 . Указанный процесс сходен с таковым, описанным как реакция конденсации. Однако в том случае, когда R=H, реакцию осуществляют в воде. На этапе конденсации могут применяться растворы, хотя и реже используемые, но позволяющие снизить необходимым образом затраты производства. Сюда относится использование аминокислот без защиты аминогруппы (где X=Н), но с активированной карбоксильной группой или N-замещенных аминокислот, но без активации карбоксильной группы (где Y=H) или даже аминокислот (X=Y=H). Условия проведения реакций аналогичны тем, что описаны выше для случая использования N-защищенной аминокислоты с активированной карбоксильной группой. В нижеприведенном примере N-ацетил--аланил-гистамин получают следующим образом:
- 2,38 г (15 ммоль) этилового эфира N-ацетил-бетааланина и 1,11 г (10 ммоль) гистамина растворяют в 40 мл смеси трет-амиловый спирт - гептан (25: 75)
- добавляют 0,5 г липазы Amano P (Pseudomonas sp.) и суспензию поддерживают при 40oC при постоянном перемешивании в течение 48 часов. Полное исчезновение гистамина контролируют с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии под высоким давлением (RPC -18-H2O-CH3CN-TFA: 99/1/0,1). Катализатор затем восстанавливают путем фильтрации. Органический растворитель выпаривают под вакуумом для получения маслянистого вещества. Этот осадок измельчают в этиловом эфире для удаления избытка этилового эфира N-ацетил- -аланина. В нашем случае выход N-ацетил- -аланил-гистамина составил 1,9 г. Фармакологические свойства
Как уже было отмечено, псевдодипептидные продукты, полученные согласно данному изобретению, могут усиливать некоторые защитные и репарационные свойства организма. Таким образом, они препятствуют старению и дегенеративным изменениям тканей глаза, мышц, кожи и др. и улучшают здоровье. Антиоксидантные характеристики указанных продуктов и их более избирательный характер действия в качестве ловушек свободных радикалов, а также их способность удалять токсичные для организма продукты пероксидации частично объясняют наблюдаемые фармакологические свойства. Способность этих продуктов препятствовать "окислительному стрессу" и тем самым дополнять собственную антиоксидантную систему защиты организма позволяет им препятствовать развитию различных патологий. Так, можно упомянуть их противовоспалительное действие, участие в защите от радиационного воздействия при проведении радиотерапии, их антиатеросклеротическое действие (ингибирование окисления сывороточных липопротеидов низкой плотности), антикатарактальные и противоопухолевые характеристики, описанные в настоящее время в научной литературе. Как уже было отмечено, псевдодипептидные продукты в соответствии с данным изобретением обладают геропротекторными свойствами, а также замедляют дегенеративные изменения кожных и слизистых покровов. В целом, эти свойства продуктов обусловлены их антиоксидантной активностью и, в частности, антисвободнорадикальной, псевдопероксидазной, антиретикулярной (способностью препятствовать образованию межмолекурных сшивок) и регенераторной активностями для тканей, которые они проявляют. Более того, существуют многочисленные экспериментальные и эпидемиологические доказательства теории о том, что накопление биохимических повреждений, обусловленных свободными радикалами, вносит существенный вклад в процесс старения. Это особенно явно проявляется при воздействии солнечной радиации, вызывающей образование активных свободнорадикальных форм кислорода, которые, в свою очередь, являются причиной раннего старения кожи, так же как и основным фактором формирования так называемой старческой катаракты. Большинство клеточных составляющих обычно представляют собой потенциальные мишени для атаки свободными радикалами. Ненасыщенные жирные кислоты, являющиеся составной частью мембранных фосфолипидов, особенно чувствительны к подобной атаке. Их окисление приводит к дезорганизации мембран, к потере внутриклеточных компонентов, к образованию токсичных альдегидов и липопротеиновых комплексов (липофусцинов). Белки также представляют собой мишени для свободных радикалов, атака которых приводит к денатурации белков и их фрагментации. Повреждение соединительной ткани свободными радикалами также является важнейшим аспектом их деструктивного воздействия. Компоненты, содержащие сахара, также атакуются свободными радикалами, при этом деполимеризуется гиалуроновая кислота, а также повреждаются гликопротеиновые рецепторы мембран. Наконец, мишенями большой функциональной значимости являются нуклеиновые кислоты. Другой характеристикой псевдодипептидных продуктов по данному изобретению, объясняющей их защитное действие на белки при "окислительном стрессе", является наличие имидазольного кольца гистамина. Действительно, в окислительные процессы, обуславливающие повреждение белков, частично вовлечено имидазольное кольцо аминокислоты - гистидина (см. "Hydroxyl radical mediated damage to proteins with special reference to the crystallins" - Biochemistry, vol. 31 (1992), p.4296). Это показывает, что гистидин псевдодипептидов может играть роль отвлекающей ловушки для свободных радикалов. Продукты псевдодипептидов, заявленные в изобретении, могут противодействовать "окислительному стрессу" и на другом уровне. Указанные вещества способны взаимодействовать не только с различными видами свободных радикалов, но и воздействовать на токсичные промежуточные продукты - перекиси, возникающие вследствие взаимодействия свободных радикалов с некоторыми компонентами клетки. Такая активность была названа "пероксидазной", по аналогии с названием фермента, осуществляющего в организме разрушение и нейтрализацию указанных перекисных соединений, препятствуя при этом развитию цепных окислительных реакций, которые, в частности, ведут к повреждению клеточных мембран. В этом аспекте мы добились репарирующей активности. Несколько тестов in vitro было проведено для того, чтобы выявить различные антиоксидантные свойства препаратов. Экспериментальная процедура описана J. М. C. Gutteridge в Biochemistry Journal, vol. 224 (1984), p. 761-767:
- субстрат окисления: дезоксирибоза
- система генерации супероксид анион радикалов: ксантин оксидаза/гипоксантин
- детекция: тиобарбитуровая кислота/малоновый диальдегид (МДА) (см. Тест А в конце текста). Указанная активность также проявляется в протекторном действии на мембранные фосфолипиды. Свободнорадикальные активные формы кислорода взаимодействуют с фосфолипидами, формируя нестабильные продукты, которые нарушают структуру мембран и индуцируют ее разрывы. Это воздействие на мембраны показано в следующих тестах. Тест 1 (см. в конце текста)
- субстрат окисления: фосфатидилхолиновые липосомы,
- система генерации свободных радикалов: Fe / аскорбиновая кислота,
- обнаружение: тиобарбитуровая кислота (ТБК) / малоновый диальдегид (МДА). Протокол эксперимента описан в "Antioxidant activity of L-carnosine, a natural histidine-containing dipeptide in crystalline lens" Biochim. Biophys. Acta (1989), vol. 1004, p. 363-371. Тест 2 (см. в конце текста)
- субстрат окисления: линолевая кислота (0,25 мг/мл)
- система генерации свободных радикалов: Fe/аскорбиновая кислота,
обнаружение: тиобарбитуровая кислота (ТБК)/малоновый диальдегид (МДА). Пероксидазный тип активности псевдодипептидов данного изобретения проявляется в уменьшении концентрации перекисей типа L-OOH, возникающих вследствие атаки мембранных фосфолипидов свободными радикалами кислорода. Такие перекиси могут распадаться и вызывать разрушение клеточных мембран. Механизм действия псевдодипептидов на перекиси дополняет их антирадикальную активность, поскольку позволяет эффективно устранять разрушительное воздействие перекисей на биологические мембраны. Указанный тип активности назван "пероксидазной" по аналогии с некоторыми ферментами (каталазой, глутатионпероксидазой), которые взаимодействуют с перекисью водорода. Псевдодипептидные продукты, заявленные в изобретении, такие как - аланил-гистамин, ингибируют следующую реакцию
L-OOH ---> продукты распада (тетрадиены, кетодиены),
путем восстановления перекисей по типу
L-OOH ---> L-OH. Ряд тестов, проведенных с перекисями, такими как 13- моногидроперекись линолевой кислоты или гидроперекись фосфотидилхолина показали, что псевдодипептидный продукт данного изобретения - аланил-гистамин ведет себя сходным образом с - аланил-гистидином, или карнозином. Поведение этого продукта схоже также с химическим восстановительным агентом боргидридом натрия, осуществляющим идентичным образом реакцию распада перекисей. Следующие тесты иллюстрируют указанный тип активности. Тест 1A (см. в конце текста)
Кинетику изменения концентрации перекисей исследовали с помощью трех следующих методов:
1*) Спектрофотометрия при 233 нм,  = 2,8 104 М-1 см-1
(O. S. Privett, C. Nickell, W.O. Lundberg and P.D. Boyer. J. Am. Oil Chem. Soc., vol. 32 (1955), p.505-511. 2*) Йодометрическое титрование: М. Hicks, J.M. Gebicki, Analytical Biochemistry, vol. 99, (1979), p. 249-253. 3*) Тонкослойная хроматография на пластинах силикагеля
(гексан/эфир/уксусная кислота 8/7/0,1). Примечание к тесту 1А:
(a) 0,5 мМ 13-моногидроперекись линолевой кислоты без восстанавливающего агента (получение согласно H.W. Gardner Lipids, Vol. 10 (1975), p.248-252. (b) активность полностью ингибируется путем добавления 0,5 мМ ЭДТА
(с) химический восстанавливающий агент. Тест 2 (см. в конце текста)
"Пероксидазный" тип активности также был выявлен на липосомной модели окисления. Гидроперекиси фосфатидилхолина (PC-ООН) приготовлены по методу, уже описанному для моногидроперекиси линолевой кислоты. Восстановление гидроперекисей оценивали по титрованию остаточных гидроперекисей методом М. Hicks, J.M. Gebicki, Analytical Biochemistry, vol. 99, (1979), p. 249-253. Следует отметить, что судя по вышеприведенным тестам, в ряде случаев L-карнозин дает лучшие результаты, чем - аланил-гистамин. Однако наличие ферментативного разрушения карнозина уже на уровне кожи не позволяет надеяться на успешные результаты его применения in vivo. Псевдодипептиды, заявленные в данном изобретении, могут воздействовать на последствия окислительного стресса, проявляя свой "антилипофусциновый эффект". Как мы уже видели, окисление жирных кислот и, особенно, фосфолипидов, ведет к их разрушению. Возникающие при этом продукты фрагментации токсичны, в частности они индуцируют межмолекулярные сшивки в белках. Образующиеся в результате этого пигментированные липопротеиновые комплексы названы "липофусцинами". Перекисное окисление жирных кислот, индуцированное свободными радикалами, не только разрушает эти кислоты, но и инактивирует белки за счет образования поперечносшитых полимеров. Этот процесс, повреждающий ряд ферментов и клеточных органоидов, рассматривается как один из значительных факторов процесса старения. Полимеры, возникающие за счет образования поперечных молекулярных связей между полиненасыщенными жирными кислотами и белками, названы липофусцинами. Псевдодипептиды по данному изобретению созданы с целью усиления естественных механизмов защиты организма и позволяют ограничить степень повреждения белков, за счет уменьшения процесса образования липопротеидных комплексов. Другой механизм действия псевдодипептидов по данному изобретению основан на их антигликирующих свойствах, которые заключаются в способности указанных продуктов ингибировать спонтанную конденсацию между аминогруппами белков и сахарами, главным образом глюкозой. Последовательность данных химических реакций известна на протяжении последнего десятилетия химикам, изучающим пищевые продукты, под названием реакций Мейяра (Maillard). Эти реакции индуцируют накопление необратимых сшивок между белками, количество которых возрастает по мере старения. Подобным образом возникают поперечные сшивки между такими белками, как коллаген и эластин (см. K. Reiser, R.J. Mс Cormick and R.B. Rucker "Enzymatic and nonenzymatic cross-linking of collagen and elastin" - FASEB Journal, vol.6, (1992), p. 2439-3449), в результате чего возрастает жесткость и ригидность тканей, являющиеся типичными проявлениями старения тканей. Прежде всего, это явление относится к белкам, имеющим длительную продолжительность жизни - белкам хрусталика, коллагену, миелину. Подобные явления у такой категории лиц связаны с формированием диабетических катаракт и ускорением образования "ретикулярных" белков, т.е. белковых сетей, удерживаемых поперечными сшивками. Антигликирующий эффект осуществляется благодаря тому, что продукты псевдодипептидов по данному изобретению являются аминированными нуклеофильными агентами, которые сами по себе направлены против белковой ретикуляризации, опосредованной сахарами, и так становятся препятствием на уровне интермедиатов реакции Мейяра (Maillard) (см. выше). В продуктах по данному изобретению содержится стерически недостаточно скрытый нуклеофильный амин, обеспечивающий указанное свойство. Наконец, для псевдодипептидов, заявленных в изобретении, продемонстрирована активность действия на клеточную регенерацию в процессах заживления. Обычно процесс заживления слагается из трех фаз: фазы сосудистых и воспалительных изменений, пролиферативной фазы, в которой происходит пролиферация фибробластов и синтез нового коллагена, а также фазы реорганизации рубца, в которой достигается равновесие между лизисом и биосинтезом коллагена. В указанном процессе псевдодипептидные продукты действуют как хемоатрактанты или активаторы движения клеток, участвующих в восстановлении тканей, на заживляемые участки. Тест, демонстрирующий действие псевдодипептидного продукта в соответствии с изобретением -аланил-гистамина, на репарацию соединительной ткани кожи был проведен на крысах. Эксперимент произведен на группе из 12 крыс линии Вистар. На коже крыс были сделаны надрезы длиной 12 мм, проходящие целиком через эпидермис и дерму. В конце периода заживления у крыс на раны наносили - аланил-гистамин в течение 3-х недель. В то же время, в контрольной группе из 12 крыс была проведена обработка ран плацебо в течение указанной продолжительности эксперимента. После 3-х недель эксперимента гистологический анализ заживляемой ткани показал, что рубец едва видим или даже совсем невидим на поверхности кожи. Эпидермис хорошо восстановлен. Ороговевающие слои эпидермиса идентичны таковым, окружающим нормальную эпидерму. Заметны различия во внешнем виде ран контрольных животных и животных, обработанных псевдодипептидом. Заживление зоны дермы выглядит в виде относительно узких полос, расходящихся от эпидермиса к мышечному слою. Граница с неповрежденной зоной отчетлива и ровная без выраженной переходной зоны. Плотность и вид элементов соединительной ткани явно одинаковы как в капиллярном, так и нижележащем слоях. Между тем, тонкие эластические или ретикулиновые волокна, в целом, более многочисленны в поверхностных слоях дермы. Основное вещество соединительной ткани представлено в большем количестве, чем в норме, что обнаруживается с помощью окраски толуидиновым синим (метахромазия при кислых значениях pH и окраске по Лиссберry (Lissberg)). С другой стороны, эпидермис крыс контрольной группы животных характеризовался рубцовой припухлостью с утолщением, превышающим уровень для нормальной кожи. Наблюдалась также гиперплазия фибробластов и новообразованных кровеносных сосудов (неоваскуляризация) по всей зоне заживления (формирование рубца). Помимо этого фибробласты умеренно гипертрофированы. Изредка наблюдались утолщенные коллагеновые тяжи, но большая часть коллагеновых волокон короткого размера и средней толщины. В соответствии с другим механизмом действия, продукты псевдодипептидов, заявленные в изобретении, стимулируют процесс заживления, воздействуя на клетки иммунной системы, вовлеченные на ранней стадии в процесс заживления: лимфоциты, тучные клетки, моноциты, которые играют главную роль в секреции факторов роста. Указанная иммуностимулирующая активность выявляется благодаря тесту in vitro на мышиных спленоцитах. Методика взята из работы J. Kunert-Radek, Н. Stepien, K. Lyson and М. Pawlikowski "Effects of calcium channel modulators on the proliferation of mouse spleen lymphocytes in vitro" - Agents and Actions, vol. 29, N 3-4 (1990), p.254- 258. Клеточная пролиферация оценивалась по степени включения тимидина, меченного тритием, в клетки, и выражалась в количестве импульсов радиоактивного распада за мин, после вычитания фона. Результаты, полученные с использованием в качестве эталона иммуностимулятора конканавалина A, представлены для сравнения. Иммуностимулирующий эффект оценивается индексом стимуляции (ИС)
Представленные значения величины соответствуют среднему из трех измерений. Обычно максимум иммуностимулирующего эффекта наблюдался для концентрации -аланил-гистамина, равной 25 мкг/мл (). Короче говоря, наблюдается достаточный иммуностимулирующий эффект (клеточная пролиферация) указанного псевдодипептида для концентраций в диапазоне от 5 до 25 мкг/мл (см. Тест 3 в конце текста). Наблюдаемая активность сравнима с таковой эталонного митогена - конканавалина A. Псевдодипептидные продукты, заявленные в изобретении, могут участвовать в защите организма от аллергических реакций и, в частности, блокировать анафилактический шок, а также быть регуляторами активности иммунного ответа. Указанный тип продуктов может также ограничивать проницаемость кровеносных сосудов, ответственную за развитие отека, и обладать антагонистическим действием по отношению к брадикинину, являющемуся эффектором развития отека (см. К. Nagai Ed. - "Studies of carnosine and related chemicals on the physiology of wound repair mechanism", p. 24-26, Tokyo, 1976). Потенциально антигистаминный характер данного ряда соединений мог бы играть роль в проявлении указанных свойств. Терапевтическое и косметологическое применение
Существенной характеристикой свойств, в целом изложенных выше, является участие в укреплении естественных защитных и репарационных свойств организма, положенных в основу важных терапевтических и косметологических применений псевдодипептидов по данному изобретению. Антиоксидантные свойства псевдодипептидных продуктов, в соответствии с изобретением, позволяют предложить указанные продукты для лечения патологий, вызванных "окислительным стрессом". Важным терапевтическим применением является лечение катаракты. Причины, вызывающие разные типы катаракт, различны. Патогенетические механизмы указанных патологических процессов, будь то сенильная или диабетическая катаракта, могут быть объединены в две категории: механизм окислительного стресса (M. A. Babizhayev, A.I. Deyev, L.F. Linberg "Lipid peroxidation as a possible cause of cataract", Mechanisms of Ageing Dev., vol. 44 (1988); p. 69-89), и механизм гликирования, вызывающий сшивание белков (Т. J. Lyons, G. Silvestri, J. A. Dunn, D. G. Dyer, J.W. Baynes "Role of glycation of lens crystyllins in diabetic and non diabetic senile cataracts", Diabetes, vol. 40, N 8, (1991), p.1010-1015). Как было показано ранее, антиоксидантные свойства псевдодипептидов, и, в особенности, экспериментально обнаруженные их антирадикальная, "пероксидазоподобная" и антигликирующая активности, делают псевдодипептидные продукты, заявленные в изобретении, эффективными препаратами для лечения катаракты. Псевдодипептидные продукты в соответствии с изобретением могут препятствовать окислительным процессам, ответственным за развитие атеросклероза. В развитии указанной патологии окисление липопротеидов низкой плотности (ЛПНП), находящихся в кровеносном русле, ответственно за фрагментацию их белковой составляющей - апопротеина В и липидной фракции этих частиц. Формирующиеся фрагменты могут индуцировать появление таких аномальных клеток, как нагруженные холестерином моноциты и макрофаги, способные к агрегации на стенках кровеносных сосудов, что ведет к формированию атеросклеротических бляшек. Псевдодипептидные продукты, в соответствии с изобретением, могут быть использованы для лечения вышеуказанного заболевания, тем более что недавно было показано, что процессы гликирования также вовлечены в формирование атероматозной бляшки (см. T.J. Lyons - "Glycation and oxidation - A role in the pathogenesis of atherosclerosis" - American Journal of Cardiology, vol. 71, N 6, (1993), p. 1326-1331). Псевдодипептидные продукты, заявленные в изобретении, могут также препятствовать канцерогенезу, поскольку показано, что свободнорадикальные активные формы кислорода ответственны за повреждение цепей ДНК, и такого рода изменения способны запускать процесс трансформации здоровых клеток в опухолевые. Сходным образом антиоксидантные свойства псевдодипептидных продуктов по данному изобретению позволяют их использовать для лечения патологий воспалительного генеза и, в особенности, для лечения ревматоидного артрита. Дело в том, что характерным симптомом воспалительных заболеваний суставов (артритов) является нарушение состава синовиальной жидкости; при этом обнаружено, что деградация одного из ее существенных компонентов - гиалуроновой кислоты - происходит вследствие "окислительного стресса". Исследования последних лет (см. В. Halliwell, J.M.C. Gutteridge "Chronic inflammation and the autoimmune disease" - Free radicals in Biology and Medicine - B. Halliwell, J. M. C. Gutteridge Eds. - Clarenton Press (1989), Oxford, p. 422-438) показали, что перекисное окисление липидов также вовлечено в развитие указанного процессам, и этим может объясняться успешное действие продуктов по данному изобретению на течение указанных заболеваний. Антиоксидантные свойства псевдодипептидных продуктов в соответствии с изобретением могут также быть использованы в качестве дополнительных средств при проведении радиотерапии. Радиопротектронный эффект, уже известный для -аланилгистидина, основывается на цитостимулирующих свойствах указанного типа веществ, в особенности в отношении клеток костного мозга, очень чувствительных к радиационным воздействиям, применяемым в радиотерапии. Согласно последним данным некоторые симптомы эпилепсии могут быть результатом повреждения определенных зон головного мозга активными формами кислорода (см. G.R. Jackson, K. Werbach-Perer, J.R. Perez-Polo - "Role of nerve growth factor in oxidant-antioxidant balance and neuronal injury. 11. A conditioning lesion paradigon" - Journal of Neuroscience Research, vol. 25, N 3 (1990), p. 369-374). Стимулирующее действие продуктов по данному изобретению на способность к регенерации тканей (в данном случае, нервной), является достаточно важным фактором для патологий, связанных с дегенерацией нервной ткани. Указанные продукты по изобретению могут быть также использованы для лечения паркинсонизма, в патогенез которого также может вовлекаться "окислительный стресс", затрагивающий ткань мозга. В отношении кожи антиоксидантные свойства псевдодипептидных продуктов, заявленных в изобретении, могут быть использованы для нейтрализации эффектов активных форм кислорода, возникающих под действием солнечного света. В этом отношении они будут эффективно блокировать фотоаллергические реакции (под действием свободных радикалов в коже формируются фотосенсибилизаторы). В отношении чувствительных к окислению веществ (например, хлорпромазина), псевдодипептидные продукты будут препятствовать их трансформации в токсичные соединения. Такая специфика действия находит для псевдодипептидов наилучшее применение во время проведения фотохимиотерапии определенных заболеваний кожи. Действительно, указанные виды лечения основываются на использовании фотосенсибилизатора (например, псоралена), который при облучении дает положительный эффект, взаимодействуя с ДНК, но указанные воздействия, к сожалению, связаны с формированием свободных радикалов, ответственных за нежелательные вторичные эффекты. Продукты данного изобретения могут также применяться, чтобы препятствовать кожным проявлениям у больных с порфирией, поскольку порфирины потенциируют повреждающее действие, вызванное свободными радикалами. Они могут быть также назначены больным с целью уменьшения повреждений кожи, связанных с "окислительным стрессом" при аутоиммунных заболеваниях, таких, например, как системная красная волчанка. Также псевдодипептиды эффективны при назначении против солнечных ожогов: эритемы, отеке и образовании пигментных клеток в коже при загаре. Антиоксидантные свойства соединений в соответствии с изобретением могут, разумеется, быть использованы для предотвращения старения кожи. Теоретические и экспериментальные доказательства, подтверждающие данный подход, приведены ранее. Наконец, было продемонстрировано, что указание вещества (псевдодипептиды) активно противостоят различным проявлениям старения тканевых структур кожи. - Неферментативному образованию сшивок (ретикуляризации), опосредованному сахарами, в таких белках, как коллаген или эластин (V. М. Monnier "Nonenzymatic glycosylation, the Maillard reaction and the aging process" - Journal of Gerontology, vol. 45, N 4, (1990), p. B105-111);
- Формированию липопротеиновых комплексов (липофусцинов). Другой диапазон применений определяется цитостимулирующими свойствами псевдодипептидных продуктов, заявленных в изобретении, и, как было показано, их иммуностимулирующими свойствами. Указанные свойства позволяют улучшать регенерацию и заживление тканей, и, в известной степени, регулировать функции, в которые вовлечены медиаторы иммунного ответа. Таким образом, псевдодипептиды могут быть использованы для улучшения нарушенной регенерации соединительной ткани кожи. Они благоприятствуют восстановлению слизистых оболочек после ожогов или химио- и радиотерапии. В соответствии с механизмом действия указанные продукты могут также использоваться для предотвращения развития и уменьшения морщин. Цитостимулирующие и регенеративные свойства псевдопептидов оказывают особое воздействие на мышечные ткани, где находятся высокие концентрации родственного природного дипептида - аланилгистидина. Хотя физиологическая роль этого соединения в настоящее время не полностью установлена, она может быть тесно связана с улучшением мышечной сократимости и регуляции сердечного сокращения. Возможно также использовать указанный вид активности для лечения определенных дегенеративных мышечных заболеваний, таких как миодистрофия Дюшена. Заживляющее действие псевдодипептидных продуктов, в соответствии с изобретением находит свое применение в различных областях. Можно назвать лечение язвы желудка, для которого дипептидный продукт, родственный карнозину, дал хорошие результаты (М. Ito, Т. Tanaka, Y. Suzuki - "Effect of N-(3-aminopropionyl) - L-histidinato zinc (Z-103) on healing and hydrocortisone- induced release of acetic acid ulcers in rats with limited food- intake-time" - Japanese Journal of Pharmacology, vol. 54, (1990), p. 513-521). Кроме того, антиоксидантные и противовоспалительные свойства продуктов, указанных в изобретении, полезны для лечения этой патологии. Заживляющее действие псевдодипептидных продуктов в соответствии с изобретением также является существенным для лечения повреждений роговицы. Они могут применяться в постоперационном периоде, например после нанесения насечек на роговицу с целью коррекции миопии. Также указанные вещества могут иметь большие преимущества при их использовании для лечения синдрома "сухого глаза", которое не только способствует заживлению эпителия роговицы, но также, благодаря тому, что эти вещества по поведению подобны "искусственной слезе", обеспечивает защиту поврежденных тканей против "окислительного стресса" (в нормальных условиях здоровой роговицы, воспалении, облучении ультрафиолетовым светом), и поэтому могут быть использованы в композициях, помогающих восстановлению слезной пленки на поверхности роговицы. Состав, содержащий дипептиды, заявленные в изобретении, может также противостоять явлениям дегенерации сетчатки, благодаря своему иммуностимулирующему и регенеративному действию. Поскольку окислительный стресс также вовлечен в развитие этой патологии (см. R.E. Anderson, L.M. Rapp, R.D. Wiegand - Current Eye Research, vol. 3, (1984), p.223- 237), указанные вещества могут проявить усиленное воздействие. Другое важное применение псевдодипептидных продуктов изобретения специфично в отношении их свойств как иммуномодуляторов. В особенности это свойство может благоприятствовать включению псевдодипептидных продуктов, по данному изобретению в парфюмерные изделия и дезодоранты с целью препятствовать развитию аллергических реакций и, в особенности, анафилактического шока, провоцированного некоторыми сильнопахнущими веществами (композициями). Применение в качестве стабилизаторов и консервантов
Прекрасная переносимость псевдодипептидных продуктов по данному изобретению и их умеренные антиоксидантные и цитостимулирующие свойства позволяют предложить указанные продукты для консервирования и защиты чувствительных веществ от окисления при приготовлении пищевых продуктов, а также для переживающих органов и тканей ex vivo. Можно упомянуть защиту от окисления липосом для улучшения их стабильности и предотвращения образования сопутствующих токсичных продуктов, защиту гиалуроновой кислоты, включенной в косметические формулы, от деполимеризирующего воздействия свободных радикалов, защиту масел и легкоокисляемых компонентов обычных пищевых и диетических продуктов. Продукты по данному изобретению позволяют улучшить вакцины, получаемые из крови и сывороток, сохранение органов и, в особенности, сердец, предназначенных для трансплантации. Различные виды применений псевдодипептидных продуктов по данному изобретению раскрыты в следующих примерах, в которых указаны дозы и составы продуктов, используемых как лекарство или в качестве стабилизирующего агента. Пример 1
Данный пример относится к использованию -аланилгистамина для лечения пациентов, страдающих катарактой. Исследование было выполнено с целью оценки возможных изменений во времени мутности хрусталика пациентов, страдающих катарактой. Все пациенты вначале были подвергнуты офтальмологическому обследованию. Оно включало запись истории болезни пациента, измерение остроты зрения при наилучшей коррекции, прямую и обратную офтальмоскопию, оценку помутнений с помощью щелевой лампы, клиническую оценку градаций степени помутнения хрусталика при максимальном мидриазе, классификацию катаракты по типу, получение ретроиллюминационных изображений хрусталика. Кроме того, были взяты пробы крови для химического анализа вначале и в последующие периоды обследования. Полное обследование позволило установить начальный статус пациентов перед лечением, который определялся как исходный (базовый) уровень. Офтальмологические обследования проводились каждые две недели в течение двух месяцев, затем - каждый месяц. Они включали оценку максимальной остроты зрения после коррекции, прямую и обратную офтальмоскопию, исследование с помощью щелевой лампы, и после максимального расширения зрачка (за исключением пациентов с первичной открытоугольной глаукомой) проведение клинической оценки степени (градации) помутнений, классификацию катаракты. Изображения хрусталика регистрировали при ретроиллюминационном обследовании и с помощью щелевой лампы. У всех испытуемых изменения в хрусталиках исследовались путем биомикроскопии с помощью щелевой лампы. С помощью этой же техники осуществляли фотографическую регистрацию, включающую исходный уровень, промежуточное и заключительное обследования, выполненные в конце срока применения препарата. Используя фотощелевую лампу, хрусталик фотографировали послойно для визуализации всего переднего сегмента глаза, начиная с роговицы и кончая задней капсулой хрусталика. С помощью этой же техники проводили исследование рефлекса глазного дна согласно общепринятой методике ретроиллюминации. Изменения хрусталика оценивали по их анатомической локализации и степени выраженности. Кортикальные помутнения оценивали и регистрировали в виде изображения методом ретроиллюминации. Впоследствии проводили линейную денситометрию негативных изображений на микроденситометре. Степень помутнения выражали в величинах оптической плотности, используя стандартную шкалу помутнений. Измерения кортикальных помутнений проводили также с учетом общей площади, экспонированной к облучению светом. Задние субкапсулярные помутнения измеряли с использованием ретроиллюминации по наибольшей высоте от нижней части до вершины и по наибольшей ширине, используя соответствующую шкалу увеличения щелевой лампы. Также получали изображения ядерных и кортикальных помутнений хрусталика, которые впоследствии шкалировались по градациям помутнения. Полученные с помощью щелевой лампы негативы анализировали с помощью телевизионной трубки (plumbicon tube). С помощью указанного оборудования измеренные интенсивности света с большой точностью переводятся в электрические сигналы, которые интегрируются и накапливаются в компьютерной системе, анализирующей изображения. С помощью специальной программы изображения хрусталика оцифровывались и воспроизводились в виде двух- или трехмерных изображений. Детальное описание данного метода преобразования изображений дано в работе: Babizhayev М.A., Zhukotskii A.V. and Sologub A.A. (1992), "Image analysis of the lens opacities induced in developing chick embryo by glucocorticoid", Exp. Eye Res. vol. 55, p. 521-537. Примеры оценки изображений даны на чертеже. Представленные гистограммы (см. чертеж) показывают на конкретном примере значение данного вычислительного метода. Случай задней субкапсулярной катаракты изучен перед и после двух с половиной месяцев лечения путем закапывания в глаз глазных капель, содержащих 1% - аланилгистамина. На гистограммах дано количественное распределение мутностей с соответствующими интегральными пиками 58,44 18,14 (до воздействия) и 44,95 8,77 (после двух с половиной месяцев лечения). Проведенный анализ показывает частичное снижение степени помутнения в задней субкапсулярной области хрусталика. Результаты, полученные описанным методом, согласуются с данными клинического обследования. В данном исследовании испытуемые пациенты были распределены на следующие группы:
Группа сравнения 1, испытуемые без воздействия (5 испытуемых, 7 глаз). Группа 2, в которой испытуемые получали глазные капли, содержащие в изотоническом солевом растворе 1% - аланилгистамин (pH 7,4). Ежедневно они закапывали капли дважды в день (10 испытуемых, 15 глаз). Группа 3 была подвергнута тем же воздействиям, что и группа 2, но со стимуляцией путем энергичного воздействия в первые 2 недели, заключающегося в двух субконъюнктивальных инъекциях дважды в неделю, от 0,10 до 0,15 мл раствора препарата того же состава, что и в группе 2 (3 пациента, 4 глаза). Группа 4 получала дважды в день в качестве глазных капель изотонический солевой раствор (5 пациентов, 7 глаз). Группа 4 подобна группе сравнения 1. Следуя протоколу эксперимента, описанному выше, были определены величины оптической плотности хрусталика, характеризующие степень его помутнения, а также острота зрения, в целом, на протяжении 24 месяцев. На основании указанных двух параметров получены таблицы, представляющие результаты по изменению остроты зрения (таблица 1) и помутнения (таблицы 2 и 3) по прошествии 24 месяцев. На основании рассмотрения двух выбранных параметров можно заключить, что данный продукт весьма значительно улучшает зрение и уменьшает развитие катаракты. Сходным образом были испытаны глазные капли, в основу которых положен активный ингредиент N-ацетил- -аланилгистамин в виде 1% изотонического солевого раствора, которые также показали результаты, соответствующие цели данного изобретения. Даже с единичной дневной дозой местного применения для глаза результаты оказались идентичны полученным ранее. Указанный установленный факт может объясняться лучшим проникновением в ткани ацетилированной формы активного ингредиента. Хотя вышеприведенный пример указывает на применении глазных капель, возможно использование продуктов по данному изобретению в виде всех общепринятых глазных композиций, таких как гель (глазное желе) или иные (см. "Remington's pharmaceutical sciences handbook" Hack Pub. Co. USA), содержащих от 1 до 100 мМ -аланилгистамина. Пример 2
Была продемонстрирована репарирующая активность на слизистую оболочку продуктов по данному изобретению при использовании композиций, содержащих очень малые дозы продукта. Указанное действие изучено при воспалительных процессах слизистой оболочки десен (гингивитах) различной этиологии (плохо пригнанные коронки, химический ожог при случайном попадании едких жидкостей, лучевая гамма-терапия верхней части глотки). Во всех случаях повреждение слизистой оболочки десен и щек останавливалось. Помимо и дополнительно к использованию повседневных классических воздействий, проводимых систематически, 50% пациентов получали водный гель, ароматизированный апельсином и содержащий 0,28% N-ацетил-3-фенил-3-аминопропионилгистамина. Наблюдения, проведенные в указанных различных случаях, показали прекрасную переносимость и значительное снижение времени заживления от 20 до 55%. Это позволяет сделать заключение о положительном эффекте относительно использованных доз препарата. Пример 3
Нами также были продемонстрированы заживляющие свойства при использовании крема для заживления следующего состава:
Наносферы (диаметр 100 нм), содержащие 5% -аминобутирил-гистамина - 10 г
Индифферентная среда для лекарства (гидродисперсия) qs - 100 г
(pH 6,5). Этот крем применялся дважды в день легким втиранием (массажем) на закрытые раны. Рубец и зона, прилегающая к рубцу, поглаживались до полного втирания помады. Изучаемыми случаями являлись: 3 постхирургических рубца, возникших менее 14 месяцев назад, 2 случая с келоидами и 5 случаев с последствиями перенесенного воспаления сальных желез (прыщей). Во всех случаях наблюдалось значительное улучшение рубца, уменьшение степени набухания и неровностей кожи вплоть до полного их исчезновения в двух случаях. В то же время было замечено восстановление естественного (однородного) цвета кожи с исчезновением набухания. Полученные результаты подтверждают значительный положительный эффект препаратов. Пример 4
Глазные капли следующего состава были использованы для лечения повреждений роговицы и, в особенности, такой патологии, как "синдром сухого глаза":
липосомы, приготовленные из фосфатидилхолина - 8 мг/мл
фибронектин из плазмы человека - 10 мкг/мл
- аланилгистамин - 25 мкг/мл
в буферной среде с pH в пределах 6,2 - 7,4. Фибронектин и -аланилгистамин были инкапсулированы в липосомы. Фибронектин является молекулой клеточной адгезии, которая обеспечивает свойства заживления и воссоздание тонкой пленки слезной жидкости. Глазные капли наносили на поверхность глаза в течение 10 дней, исходя из двух инсталляций в день. Наносимое количество препарата должно быть достаточным для того, чтобы сформировать непрерывную пленку на поверхности глаза. Результаты
Использованная композиция длительно воссоздает защитный слой на поверхности глаза, как было показано при изучении удержания на поверхности роговицы флуоресцентных маркеров (методика заимствована из R.F. Barber, P.N. Shek "Liposomes and tear film. 1.Release of vesicle entrapped carboxyfluorescein" - Biochimica Biophysica Acta: Lipids and Lipid Metabolism, vol. 879 (L81), N 2 (1986), p. 157-163). Положительный эффект заживления прослеживается с помощью щелевой лампы: наблюдается быстрое восстановление роговичного эпителия. Пример 5
В этом примере использована помада для обработки поверхностных ожогов 1-ой и 2-ой степеней:
парагидроксикоричная кислота - 0,1 г
мятное масло - 0,3 г
лавандовое масло - 0,5 г
ментол (в форме наносфер) - 0,05 г
-аминоизобутирилгистамин - 0,5 г
индифферентная среда для лекарства гидродисперсия qs - 100
Мы применяем помаду, нанося ее тонким слоем, как можно раньше после возникновения ожога. В первое время нанесение помады повторяется каждый час, пока не прекратится боль. При ожогах первой степени эритема быстро исчезает. При поверхностных ожогах второй степени, сопровождающихся пузырями и отеком покрасневшего эпидермиса на площади ожога, мы наблюдали рассасывание отека в течение 2-х часов, уменьшение боли в течение 3-х или 4-х часов. В течение двух или трех прошедших дней регенерация подлежащих тканей проходила более быстро. Возможным было открывание пузырьков с жидкостью, удерживаемой последними, с формированием нового слоя эпидермиса и удалением отмерших тканей. С одной стороны, мы наблюдали ускорение восстановления эпителия, а с другой стороны - его прекрасное качество. Пример 6
Антирадикальная активность псевдодипептидных продуктов по данному изобретению была продемонстрирована в следующем примере косметических композиций, используемых как лосьоны после бритья:
6-аминокапроил-гистамин (в форме 5% наносфер) - 16 г
жидкий ароматизированный водно-спиртовый растворитель 6 qs - 100 г
регулярное употребление в качестве лосьона после бритья позволяет сохранить кожу в хорошем состоянии. Пример 7
Основываясь на той же активности, что и в вышеприведенных примерах, использовался лосьон против солнечных ожогов, имеющий следующий состав:
3-фенил-3-аминопропионил-гистамин - 1 г
микродисперсия водно-липидного растворителя qs - 100 г
Исследованы различные случаи во время проведения курсов облучения ультрафиолетовым светом (область В) в салонах красоты. При одинаковой степени загара, в случаях применения крема после сеанса облучения, эпидермис характеризовался лучшим качеством в последующие после облучения дни. Пример 8
Основываясь на той же самой активности, использовался крем для ухода за кожей лица следующего состава:
раствор 5-аминовалерьянил-гистамина (в форме 4% наносфер) - 20 г
ионы Cu++, Fe++ (в форме ацетилметионина) индифферентная среда для лекарства гидродисперсия qs - 100 г
(pH 6,5)
Для геропротекторного крема, применяемого дважды в день, мы отметили снижение числа мелких морщин, появление более нежной и естественно окрашенной кожи. Для крема, обладающего выраженным восстанавливающим действием в ответ на различные повреждающие воздействия, ежедневное применение вполне достаточно. Мы наносили крем путем втирания до его полного впитывания, суспензия наносфер - формирует гомогенную пленку с продолжительным высвобождением действующих ингредиентов. Возможно нанесение пленки после применения того же крема. Мы наблюдали на коже лица определенные результаты воздействия, демонстрирующие следующие критерии хорошего здоровья: мягкость и свежесть комплекции кожи, равномерный цвет и хорошее увлажнение. Пример 9
Псевдодипептидные продукты могут быть также использованы для защиты легкоокисляемых косметических масел, богатых ненасыщенными жирными кислотами, входящими в косметические и диетические продукты. Для этого необходимо добавить от 15 до 25 ммоль псевдодипептидов по данному изобретению на литр масла, согласно следующей формуле:
20 ммоль ацетилированного -аланилгистамина
масляный экстракт из микроскопических морских водорослей, культивированных в морской воде, обогащенной ненасыщенными жирными кислотами, включая EPA qs до 1 литра. Мы сравнили сохранность (по степени, старения) масел с протектором и без такового, определяя в конце месяца хранения концентрацию малонового диальдегида. В незащищенном масле мы наблюдали гораздо большее накопление малонового диальдегида, чем в защищенном, что указывает на активность ацетилированного -аланилгистамина в защите против окисления. Пример 10
В соответствии с ранее изложенными принципами мы приготовили косметическое масло следующего состава:
25 ммоль 8-аминооктаноилгистамина
масло из лепестков роз (розовое масло) qs до 1 литра. Мы сравнили защищенное и незащищенное масла в конце 5 недели методом кислотного титрования. Доза кислоты для незащищенного масла была значительно (более чем в 10 раз) больше, чем в защищенном. Таким образом, можно заключить, что присутствие 8-аминооктаноилгистамина оказывает антиокислительное действие в розовом масле. Все вышеприведенные примеры показывают, что псевдодипептиды по данному изобретению проявляют статистически достоверную активность в диапазоне от 1 до 100 миллимолей на литр, имея пик активности в диапазоне концентраций 10-25 мМ.
Формула изобретения
1. Псевдодипептиды, полученные путем конденсации гистамина или метилзамещенного гистамина и аминокислоты общей формулы
где А - аминогруппа или амидогруппа, представленная CH3OCONH;
R1, R'1 - атом водорода или один из них атом водорода, другой - углеводородный радикал;
R'' = H, CH3;
y и Z каждый являются атомами водорода;
n - целое число больше или равное 1,
при условии, что исключается -аланин-гистамин. 2. Псевдодипептиды формулы I по п.1, полученные конденсацией гистамина или метилзамещенного гистамина и аминокислоты формулы
где Х - атом водорода или ацетильная группа, значения остальных радикалов указаны в п.1. 3. Псевдодипептиды формулы 1 по п.2, где аминокислота имеет формулу
где R1 - атом водорода или фенильный радикал;
R2 = водород; p целое число, 0  p 3. 4. Псевдодипептиды формулы I по п.2, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из -аминомасляной, -аминоизобутиловой, 5-аминовалериановой, 3-фенил-3-аминопропионовой, 6-аминокапроновой, 8-аминооктановой, N-ацетил-3-фенил-3-аминопропионовой кислоты, N-ацетил--аланина. 5. Способ получения псевдодипептидов общей формулы I по пп.1 - 4, характеризующийся следующими этапами: приготовлением указанной N-защищенной аминокислоты с использованием защитной группы Х, приготовлением указанной N-защищенной аминокислоты, активированной по карбоксильной группе, конденсацией указанной N-защищенной аминокислоты с активированной карбоксильной группой с гистамином или метилзамещенным гистамином с последующим удалением либо сохранением Х-группы в соответствии с получаемым псевдодипептидом. 6. Способ получения псевдодипептидов по п.5, заключающийся в том, что аминокислота О-активирована путем этерификации карбоксильной группы. 7. Способ получения псевдодипептидов по п.6, заключающийся в том, что этап этерификации карбоксильной группы аминокислоты проводят путем взаимодействия с компонентами, выбранными из группы: цианометиловый спирт, о-нитрофенол, 2,4,5-трихлорфенол, п-нитрофенол, 2,4-динитрофенол, пентахлорфенол, пентафторфенол, N-гидроксифталимид, N-гидроксисукцинимид, 1-гидроксипиперидин, 5-хлор-8-гидроксихинолин. 8. Способ получения псевдодипептидов общей формулы I по пп.1 - 4 формулы изобретения, заключающийся в конденсации аминокислоты с гистамином или метилзамещенным гистамином в присутствии ферментативного катализатора типа гидролазы. 9. Способ по п.8, заключающийся в том, что ферментный катализатор является гидролазой, выбранной в группе, состоящей из липаз, экстрагированных из микроорганизмов или липаз животного происхождения и протеаз. 10. Способ по п.8, характеризующийся следующими этапами: приготовлением указанной N-защищенной аминокислоты с использованием защитной группы Х, приготовлением указанной N-защищенной аминокислоты с активированной карбоксильной группой, конденсацией указанной активированной по карбоксильной группе N-защищенной аминокислоты с гистамином или метилзамещенным гистамином с помощью указанного катализатора и, в случае необходимости, отщеплением Х-группировки, защищающей аминогруппу в соответствии с получаемым псевдодипептидом. 11. Способ по п.10, заключающийся в том, что проводят О-активацию функциональной карбоксильной группы указанной аминокислоты путем этерификации. 12. Способ по п.11, заключающийся в том, что этерификацию проводят путем реакции с компонентами, выбранными из следующей группы, состоящей из алифатических или ароматических спиртов, исключая третичные спирты, но предпочтительно включая этанол, 2,2,2-трихлорэтанол, фенол, цианометиловый спирт, О-нитрофенол, п-нитрофенол, 2,4,5-трихлорфенол, 2,4-динитрофенол, пентахлорфенол, N-гидроксифталимид, N-гидроксисукцинимид, 1-гидроксипиперидин, 5-хлор-8-гидроксихинолин. 13. Способ по одному из пп.8 - 12, заключающийся в том, что псевдодипептид, являющийся N-ацетил--аланилгистамином, получен следующим образом: 2,38 г (15 ммоль) этилового эфира N-ацетил--аланина и 1,11 г (10 моль) гистамина растворяют в 40 мл смеси трет-амиловый спирт-гексан (25 : 75), добавляют 0,5 г липазы Amano P (Pseudomonas sp) и суспензию поддерживают при 40oС при постоянном перемешивании до полного исчезновения гистамина, липазу отфильтровывают, растворитель трет-амиловый спирт-гептан удаляют под вакуумом до получения маслянистого вещества, и остаток обрабатывают этиловым эфиром для удаления избытка этилового эфира N-ацетил--аланина, получают 1,9 г N-ацетил--аланил гистамина. 14. Псевдодипептиды формулы I по пп.1 - 4, обладающие антиоксидантной активностью. 15. Псевдодипептиды по п.14, обладающие "пероксидазной" активностью. 16. Псевдодипептиды по п.14, обладающие репарирующей активностью. 17. Псевдодипептиды по п.14, обладающие антиатеросклеротической активностью. 18. Псевдодипептиды по п.14, обладающие противовоспалительной активностью. 19. Псевдодипептиды по п.14, обладающие противоаллергической или иммуностимулирующей активностью. 20. Псевдодипептиды по п.14, обладающие консервирующей или стабилизирующей активностью в материалах, чувствительных к окислению, пищевых продуктах и органах или тканях, сохраняемых ех vivo. 21. Фармацевтическая композиция, обладающая антиоксидантной активностью, содержащая в качестве активного вещества эффективное количество псевдодипептида формулы I
где А - аминогруппа или амидогруппа, представленная CH3OCONH;
R1, R'1 - атом водорода или один из них - атом водорода, другой - углеводородный радикал;
R'' = Н, CH3;
y и Z каждый являются атомами водорода;
n - целое число больше или равное 1,
в смеси с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. 22. Фармацевтическая композиция по п.21 для использования в качестве косметических средств регенерирующего и омолаживающего действия для кожи. 23. Фармацевтическая офтальмологическая композиция для лечения катаракты, содержащая в качестве активного вещества псевдодипептид формулы I
где А - аминогруппа или амидогруппа, представленная CH3OCONH,
R1, R'1 - атом водорода или один из них атом водорода, другой - углеводородный радикал;
R'' = Н, CH3;
y и Z каждый являются атомами водорода,
n - целое число больше или равное 1, в эффективном количестве в смеси с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. 24. Композиция по п.23 в виде глазных капель или геля. 25. Фармацевтическая офтальмологическая композиция для лечения повреждений роговицы и, в особенности, синдрома "сухого глаза", содержащая в качестве активного вещества псевдодипептид формулы I
где А - аминогруппа или амидогруппа, представленная CH3OCONH,
R1, R'1 - атом водорода или один из них - атом водорода, другой - углеводородный радикал;
R'' = Н, CH3;
y и Z каждый являются атомами водорода,
n - целое число больше или равное 1,
в эффективном количестве в смеси с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. 26. Композиция по п.25 в виде глазных примочек (лосьонов). 27. Способ лечения катаракты путем введения пациенту фармацевтической композиции по любому из пп.23 - 24. 28. Способ лечения воспалительных состояний, связанных с "окислительным стрессом", путем введения пациенту псевдодипептида формулы I по пп.1 - 4 в эффективном количестве. 29. Способ лечения по п.28, где в число воспалительных состояний входят такие заболевания, как фотоаллергия, порфирия, красная волчанка. |
