СПИСОК ПАТЕНТОВ С УПОМИНАНИЕМ ГИАЛУРОНОВОЙ КИСЛОТЫ
-
- 2017751 Способ получения гиалурона
- 2192150 БАД для профилактики йодной недостаточности
- 2112542 Препарат для лечения патологий соединительных тканей
- 2225206 Препарат для лечения рака молочной железы
- 2299733 Лечение опорно-двигательного аппарата
- 2299732 Способ лечения глаукомы
- 2299726 Противоинфекционная губная помада
- 2299725 Косметическое средство для ухода за кожей
- 2198878 Ароматическое соединение
- 2198702 Способ подготовки трофических язв к аутодермапластике
- 2198653 Вагинальные суппозитории
- 2197946 Композиция для ухода за волосами
- 2197923 Фармацевтическая композиция для лечения отеков роговицы
- 2298410 Биотрансплантант и способ лечения ревматических и аутоиммунных заболеваний
- 2197501 Фотоотверженный гель на основе сшитой гиалуроновой кислоты
- 2197228 Твердые лекарственные формы
- 2197222 Водная компазиция для ухода за волосами, лица и тела
- 2297425 Полипептиды
- 2297240 Композиция с гиалуроновой кислотой
- 2297230 Фармацевтическая компазиция с ксантоновой смолой
- 2196588 Глазные капли
- 2195955 Применение биологически активных веществ
- 2195926 Дерматологические композиции
- 2295954 Микрочастицы для доставки нуклеиновых кислот
- 2295951 Косметика для ухода за кожей лица и век
- 2195262 Фармакологическое средство на основе гиалуроновой кислоты
- 2194512 Способ профилактики и коррекции процесса старения кожи
- 2194478 Лечение экземы
- 2294716 Расширяемый стент
- 2194055 Сшитые сополимеры
- 2099350 Ассоциаты депротонированной гиалуроновой кислоты
- 2293557 Средство для лечения кожи и слизистых
- 2292878 Приготовление микроцастиц, содержащих метопропол
- 2292746 БАД
- 2192256 Защита кишечника
- 2191782 Получение модифицированной гиалуроновой кислоты
- 2292219 Паратиреоидный гормон человека
- 2291686 Микроцастицы
- 2191000 Косметическая маска
- 2290921 Фармацевтические и косметические средства против старения кожи
- 2290900 Модифицированный биоматериал для использования в офтальмологии
- 2290899 Получение биоматерьяла
- 2290397 Новые инданилиденовые соединения
- 2290186 Лечение сирингомиелии
- 2288702 Иррингационный раствор для офтальмологии
- 2288699 Гель для лечения стоматологических заболеваний
- 2188011 Активирующая остеогенез фармацевтическая композиция
- 2187327 Средство с антисептиком
- 2187325 Средство с радиопротекторным действием
- 2287330 Композиции миноксидила
- 2186786 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2186593 Лечение раненого процесса кожи
- 2286801 Очищение воды
- 2286781 Лечение ожогов пищевода у детей
- 2286764 Средство лечения воспалений полости рта
- 2185840 Лечение инфекционных заболеваний
- 2286151 Альфа-2-Дельта-Лиганда
- 2185149 Ранозаживляющий гель
- 2285527 Лечение ИЛ-6 заболеваний
- 2184448 Раствор хранения роговицы, включающий гиалуроновую кислоту
- 2090179 Крем для кожи
- 2183961 Способ лечения кожи
- 2284331 Соли алифотических аминов
- 2284187 Производные амида
- 2089191 Снизить внутрение давление
- 2283320 Получение гликозаминогликанов
- 2283129 Лечение опухолей
- 2283098 Косметические средства с Q
- 2182574 Ароматические соединения
- 2088257 Средство с гипохолестеролемическим действием
- 2088218 Состав для гигиенических салфеток
- 2088206 Способ получения препарата, создающего исскуственный загар
- 2282462 Противомикробные средства
- 2182008 Интровагинальная компазиция
- 2181999 Препарат с отсроченным высвобождением
- 2181998 Новые композиции липидов
- 2181995 Лечение болевого синдрома
- 2181295 Вирионная вакцина
- 2087144 Витамин Е
- 2379336 Способ стирки
- 2379052 Вакцинация
- 2180855Композиция в виде ионного комплекса
- 2379025 Противоинфекционный гель
- 2180825 Лечение травм роговицы
- 2281082 Способ коррекции эстетических и возрастных проблем кожи
- 2180576 Биоактивная добавка для косметических средств
- 2280459 Средство для изменения скорости роста или репродукции клеток
- 2179981 Соли переходного металла
- 2378010 Жидкие вакцины
- 2378008 Комбинированные вакцины
- 2378007 Анаболическое средство
- 2377973 Растительные экстракты
- 2280041 Способ получения водорастворимых комплексов гиалурил
- 2280038 Биополимеры
- 2323733 Йодный обмен
- 2377260 Гель
- 2178693 Противовирусное средство на основе гиалуроновой кислоты
- 2178692 Облегчающие зуд косметическое средство
- 2377022 Гемостатические спреи
- 2376982 Увлажняющая сыворотка для лица
- 2376974 Трансдермальный гель для лица
- 2362784 Гипо-и гиперацетилированные менингокковые капсульные сахариды
- 2177789 Устройство для доставки лекарства к шейке матки
- 2277954 Крем для лица омолаживающий
- 2376378 Способ получения метионина
- 2177332 Биоматериал для предотвращения послеоперационных спаек, с производной гиалуроновой кислотой
- 2177310 Способ получения таблеток
- 2376011 Средство для позвоночника
- 2277410 Косметическое средство
- 2323748 Медицинская повязка
- 2276998 Гидрогелевые композиции
- 2082416 Способ получения препарата с коллагенном из животного сырья
- 2375081 Адсорбирующее изделие
- 2375049 Охлаждающий пластырь
- 2346049 Способ получения гиалурона
- 2275913 Фармацевтические средства
- 2174985 Полисахарид с антиоксидантом
- 2373957 Носитель для лекарственных средств и биологически активных веществ
- 2373941 Способ коррекции возрастных и патологических изменений кожных покров
- 2174845 Композиции и способы доставки генетического материала
- 2174830 Средство для укрепления волос
- 2373769 Синбиотическая композиция
- 2274472 Лечение апорно-двигательного аппарата и болевых синдромов
- 2372929 Профилактическая композиция на основе веществ фенольной природы в липосомной форме
- 2173563 Способ нанесения на поверхность предметов покрытия на основе гиалуроновой кислоты, её производных и полусинтетических полимеров
- 2079304 фармацевтическая композиция, обладающая иммуносупрессорной и антимикробной активностью
- 2273645 Полипептид ожирения
- 2173154 Фракция кератансульфатолигосахаридов и содержащий ее фармацевтический препарат
- 2173136 Грязная мазь
- 2173128 Способ хирургического лечения центральных разрывов сечатки
- 2078561 Косметическое средство предотвращающее старение кожи
- 2172490 Способ прогнозирования воспалительных заболеваний молочной железы при эндопластике
- 2272645 Способ лечения ЦМВ-Инфекции у детей раннего возроста
- 2272636 Фармацевтическая композиция для местного лечения воспаления
- 2272635 Фармацевтически активная субстанция для офтальмологии
- 2272599 Биоматерьял для стабилизации прогрессирующей миопии "Коллаплант"
- 2172168 Средство для заживления ран на основе гиалуроновой кислоты
- 2371172 Фармацевтическая композиция для лечения нервной системы на основе стефаглабрина
- 2171470 Способ прогнозирования послеоперационной трансформации доброкачественных опухолей нервной системы
- 2077317 Состав для ванн
- 2271213 Комбинированные композиции, содержащие экстракты из растений и морских животных
- 2076872 Способ получения окрашенной гиалуроновой кислоты
- 2076671 Раствор для защиты роговицы
- 2370281 Конъюгаты гидроксиалкилкрахмал
- 2370275 Способ лечения (коррекции) косметических и возрастных дефектов кожи
- 2370258 Фармацевтическая композиция для парентальной доставки в форме лиофилизата
- 2270023 Способ экстракции и очистки протеогликана хрящего типа (варианты)
- 2369408 Гемостатическая композиция, включающая гиалуроновую кислоту
- 2369387 Фармацевтическая композиция для лечения нервной системы
- 2369379 Нетаблитированные жевательные формы для индивидуального введения
- 2169136 Производное коричной кислоты
- 70792 Медицинский аппликатор
- 20741717 Способ стабилизации аскорбиновой кислоты
- 2074712 Способ получения препарата, препятствующего преждевременной эякуляции
- 2367954 Способ прогнозирования развития кожной патологии у женщин с синдромом склерополикистозных яичников (СПКЯ)
- 2268075 Устройство для электрокинетической доставки
- 2268052 Средство для лечения воспалительных и дегенеративных заболеваний суставов
- 2167649 Способ получения твердой дисперсии умеренного водорастворимого лекарственного вещества
- 2167647 Гель для бритья
- 2073520 Лечение урологических инфекций
- 2367476 Биопластический материал
- 2367475 Мембрана для использования при направленной регенерации тканей
- 2367469 Фармацевтическая композиция на основе лизоамидазы
- 2367456 Фармацевтическая композиция обладающая антибактериальным и некролитическим действием
- 2367455 Фармацевтическая композиция обладающая некролитическим и антибактериальным действием
- 2267324 Применение антиадгезивных углеводов, препарат для уменьшения и /или блокирования адгезии патогенных веществ
- 2166934 Композиции включающие биологический агент
- 2166510 Псевдодипептиды
- 2366460 Композиции, имеющие высокую противовирусную и антибактериальную активность
- 2360901 Производные феноксиуксусной кислоты
- 2165749 Способ восстановления эндотелия роговицы
- 2265441 Способ укрепления склеры
- 2365382 Композиции и способы для регуляции развития сосудов
- 2070879 Соли гликозаминогликанов
- 2164914 Циклические и гетероциклические N - замещенные - иминогидроксамовые карбоновые кислоты
- 2264627 Хламидийный конъюктивит
- 2364399 Фармацевтический препарат на основе стефаглабрина
- 2264230 Препарат с замедленным высвобождением активного вещества
- 2363497 Фармацевтические композиции
- 2363496 Способ увеличения объема мягких тканей
- 2363473 Способ антифлогистической активации в эксперементе
- 2363461 Фармацевтический препарат на основе сигетина
- 2363459 Средства для введения в роговицу глаз для предотвращения офтальмологических нарушений
- 2363448 Фармацевтические композиции
- 2163123 Глазные капли
- 2162687 Усовершенствованнная лекарственная форма индуктора интерферана
- 2162343 Биосовместимый полимерный материал и способ его получения
- 2162327 Лечение рака
- 2067841 Способ получения ароматизатора
- 2161478 Способ консервированого лечения гонартроза
- 2361617 Вольфрамовые частицы в качестве рентгеноконтрастных веществ
- 2361552 Способы и устройства для дренирования жидкостей и понижения внутриглазного давления
- 2066996 Способ изготовления пленочного материала для офтальмохирургии
- 2361417 Корм с глюкозамином и экстрактом ивы для профилактики артроза у животных
- 2161002 Пищевой общеукрепляющий лечебно-профилактический продукт из хрящевой ткани акул
- 2360928 Комплексная матрица для медико-биологического применения
- 2160574 Способ лечения глаукомы
- 2360688 Способ лечения повреждений переферических нервов
- 2360670 Фармацевтическая композиция при климактерических расстройствах
- 2360646 Эндолюминальный протез
- 2260445 Способ усовершенствования транспортировки через легко прспосабливаемый полупроницаемый барьер
- 2260007 Производные амида
- 2359975 Способ получения модифицированных арабиногалактанов
- 2359974 Антигенные Пептиды
- 2159775 Псевдопептидный продукт
- 2259833 Фармацевтическая композиция для лечения роговицы глаза
- 2259816 Ранозаживляющее средство
- 2259815 Способ коррекции возрастных изменений, связанных с процессами старения кожи
- 2359706 Способ сохранения офтальмологических растворов
- 2359704 Антисептическое средство
- 2359662 Микрокапсулы
- 2159253 Катионные полимеры
- 2159111 Средство для ухода за кожей лица
- 2159105 Композиция для защиты кожи от опасных химических веществ Получение
- 2158593 Биосовместимый водный раствор
- 2358728 Способ лечения и предупреждения потери костной ткани
- 2258517 Способ хирургического лечения травмотических повреждений селезенки пленкой на основе гиалуроновой кислоты
- 2357968 Кристалические формы производной имидазола
- 2357957 Ингибиторы P38 и их применение
- 2157647 Пищевая добавка и ее получение
- 2357758 Препараты для чрескожной и чересслизистой добавки
- 2063244 Способ стабилизации растворов
- 2063140 Способ получения препарата для консервирования мяса
- 2157381 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2257198 Композиции микроцастиц
- 2356909 Белковый комплекс
- 2356570 Косметическая композиция
- 2256434 Способ закрытия перфорации барабанной перепонки
- 2356520 Способ лечения постконтузионного повреждения сечатки глаза
- 2156133 Гель
- 2255945 Полимерная композиция
- 2355761 Средства повторной дифференцировки
- 2061043 Способ повышения устойчивости урокиназы к нагреванию
- 2061005 Способ получения красителей для гистологических исследований
- 2355420 Зубная паста
- 2355385 Композиции пролонгированного действия с контролируемым высвобождением
- 2355240 Способ получения пищевого препарата хондропротекторного действия
- 2155057 Пихтово репейный бальзам
- 2354409 Способ производства высвобождающих лекарственные средчтва медицинских устройств
- 2254145 Раневое покрытие на основе коллаген-хитозанового комплекса
- 2254133 Лечение и профилактика ВИЧ-инфекции у человека
- 2253439 Фармацевтическая композиция для защиты и улучшения оптических свойств роговици при проведении эндовитреальных вмешательств
- 2253437 Способ омоложения кожи
- 2153352 Фармацевтическая композиция обладающая ранозаживляющим и противовоспалительным действием
- 2353354 Фармацевтический препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2252787 Способ получения искусственной матрицы кожи
- 2252767 Способ нормализации иммунобиохимического гомеостаза коров в предродовом и послеродовом периодах
- 2352583 Фармацевтическая композиция содержащая Fc-область иммуноглобулина в качестве носителя
- 2152403 Модифицированные полисахариды
- 2352356 Иммуногенная композиция
- 2352342 Исскусственный физиологический солевый раствор Способ его получения
- 2352330 Фармацевтический препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2352323 Фармацевтический препарат с модифицированным высвобождением
- 2152027 Способ подготовки ткани мозга для определения гликозаминогликанов
- 2251842 Интектицидный состав для борьбы с личинками оводов
- 2151580 Способ активации пролиферации эндотелия роговицы
- 2351648 Дифференцировка стромальных клеток, полученных из жировой ткани, в эндокринные клетки поджелудочной железы и их использование
- 2351595 N - гидроксиформамидные соединения в качестве ингибиторов металлопротеина
- 2251411 Косметическое средство в лиофилизированной фармацевтической форме
- 2251405 Косметика...ее композиции для косметических препаратов
- 2251367 Средство со сшитой гиалуроновой кислотой для наращивания тканей
- 2351359 Косметика для профилактики и лечения избыточной массы тела
- 2351322 Препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2351153 Диета при остеортрите собак
- 2350958 Способ определения групповой принадлежности синовальной жидкости
- 2350625 Производные гиалуроновой кислоты с пониженной биодеградируемостью
- 2150266 Крем после бритья
- 2350354 Фармацевтическое средство содержащие антагонист и фактор некроза
- 2350340 Способ коррекции процессов регенерации
- 2350309 Способ лечения избыточной массы тела с помощью рефлексотерапии
- 2250047 Профилактический продукт из хрящевой ткани гидробионтов
- 2249467 Медицинский матерьял и изделия на его основе
- 2055079 Способ получения препарата гиалуроновой кислоты
- 2349599 Биоадгезив мидии
- 2054903 Способ лечения коллагеноза у бычков на откорме
- 2249210 Способ прогнозирования предрасположенности к развитию и тяжести течения деформирующего остеоартроза коленного сустава у взрослых
- 2349339 Средство для соединительной ткани
- 2148988 Человеческий интерферона
- 2148399 Лечение атеросклероза
- 2148396 Способ определения активного вещества в дифильных мазевых основах
- 2148375 Способ диагностики близорукости
- 2348415 Способ противоспаечной терапии после хирургического вмешательства
- 2348400 Препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2348386 Способ непроникающего хирургического лечения первичной открытоугольной глаукомы
- 2248213 Лечение Галактозидальной А недостаточности
- 2347586 Микрофлюидизированные эмульсии типа "масло в воде" и вакцинные средства
- 2147243 Контрастное средство
- 2146526 Лечебный препарат дисбактериоза и урогенитальных инфекций
- 2146148 Терапевтическое применение фактора роста кератиноцитов (ФРК)
- 2146139 Способ повышения активности макрофагов и комбинации для его осуществления
- 2346277 Способ диагностики специфического синовита
- 2345793 Ультразвуковые контрастные вещества и их получение
- 2345782 Терапевтические комбинации на основе PORIFERA для лечения и предотвращения кожных заболеваний
- 2245131 Способ коррекции косметических недостатков кожи
- 2245130 Способ активации восстановительных процессов в коже
- 2144833 Хондроитиназа
- 2344809 Получение твердых дозированных форм с использованием сшитого нетермопластичного носителя
- 2244540 Косметический гель для ухода за кожей лица
- 2244536 Способ лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний тазобедренного сустава
- 2344167 Хмелевый экстракт
- 2143884 Агент регулирования дифференциации клеток кожи, культурная среда для клеток или тканей и способ регулирования дифференциации клеток кожи
- 2343932 Способ получения обладающих пониженной растворимостью в воде пленночных материалов
- 2343903 Устройство доставки лекарств для контролируемого введения препаратов
- 2048817 Способ получения материала для лечения ожогов и гнойно - некронических ран
- 2048803 Гидратантный крем
- 2242974 Средства и способы лечения воспалительных заболнваний
- 2142816 Способ получения антигерпетической вакцины
- 2342923 Средство для обработки рук с увлажняющим эффектом
- 2142781 Косметика для макияжа ресниц и бровей и агент ингирирующий рост микроорганизмов в косметических средствах
- 2242251 Трансплантируемые стенты с биоактивными покрытиями
- 2142257 Способ обработки глазных имплантантов и контакных линз
- 2342389 Мононатриевая соль
- 2342107 Способ устранения западения верхнего века при анофтальме
- 2141828 Средство, пролонгирующее эффективность чесночного порошка
- 2241489 Косметическое средство матриксных протеинов для залечивания ран
- 2241443 Средство для лечения герпеса
- 2241414 Способ получения протезов кровеносных сосудов
- 2341539 Гидрогель
- 2141324 Регулятор скорости воздействия препарата для инъекций
- 2141312 Косметическое средство для ухода за кожей лица
- 2341296 Средства и способы покрытия медицинских имплантантов
- 2341272 Средство для неспецифической иммунотерапии
- 2341266 Стенты с нанесенным покрытием содержащим N - (5-(4-(4-
- 2341257 Иммуномодулирующее средство
- 2341255 Средство для лечения климактерических расстройств
- 2240821 Способ лечения урологических инфекций
- 2140786 Способ лечения лишая
- 2140243 Способ хирургического лечения диабетической ретинопатии и отслоек сечатной оболочки
- 2240140 Медицинская многослойная повязка и изделия на ее основе
- 2240135 Культура клеток, содержащая клетки - предшественники остеонегеза, имплантант на ее основе и его использование для восстановления целостности кости
- 2240123 Экзогенные биологически активные коньюгирующие вещества
- 2139886 Фотоотвержаемое производное гликозаминогликата, сшитое производное гликозаминогликата и способы их получения, способ предотвращения клеточной и тканевой адгезии
- 2139729 Вакцина. Способ стимулирования иммунной системы
- 2339386 Средство обладающее радио - и химиозащитным действием
- 2339369 Лечение офтальмологических нарушений с использованием мочевины и ее производных
- 2139041 Гидратантный регенерирующий крем и способ его получения
- 2139039 Косметический суперкрем для ухода за кожей
- 2139017 Способ получения боисовместимого материала
- 2138503 Производные камптотецина, способы их получения, уникальное средство
- 2338556 Средство содержащие антагонист Р2Х - рецептора и нестероидное противоспалительное лекарственное средство
- 2338514 Косметическое средство для профилактики старения кожи
- 2138297 Медицинские устройства, подверженные вызываемому разложению
- 2138295 Покрытие для ран
- 2337906 Ингибиторы цитозольной фосфолипазы А2 Применение физиологически допустимого корпускулярного ферримагнитного или ферромагнитного материала. Способ формирования магнитометрического изображения
- 2137501 Устройство формирования изображения
- 2137477 Способ лечения заболеваний характеризующихся аутоиммунной агрессией
- 2137467 Крем для кожи лица и тела
- 2137449 Способ коррекции дефектов преломления в глазу млекопитающего
- 2137402 Пищевая Добавка БАД
- 2336899 Способ стимуляции миелопоэза
- 2336862 Способ получения раствора для лечения роговицы
- 2336830 Способ восстановления костных структур челюсти
- 2136696 Новый полипептид и средство против ВИЧ - Инфекции
- 2336092 Биоадгезивное средство, по существу свободное от воды
- 2336089 Средство и способ лечения заболеваний периодонтальных и пульпы
- 2336074 Средства и способы лечения заднего сегмента глаза
- 2235548 Ранозаживляющее средство
- 2135186 Способ лечения рефлекторных синдромов при остеохондрозе
- 2234945 Стабилизатор водного раствора и водосодержащего сырья
- 2334762 Растворимая ассоциативная карбоксиметилцеллюлоза
- 2234514 Макропористые хитозановые гранулы и способ их получения. Способ культивирования клеток
- 2133615 Средство для лечения неврологических заболеваний
- 2233164 Способ профилактики развития послеоперационных спаек брюшной полости
- 2133127 Неткатный материал, способ его получения и способ лечения
- 2333223 Альдегидные производные сиаловой кислоты и средства на их основе
- 2333007 Полипептидные вакцины для широкой защиты против рядов поколений менингококов с повышенной вирулентностью
- 2332985 Дозированные формы анестезирующих средств с длительным высвобождением для обезболивания
- 2132677 Косметическая маска
- 38603 Пленочный аппликатор
- 2232594 Средство содержащие ингибирующие остеокластогенез фактор и полисахарид
- 2332238 Средство для прокладок, раневых повязок и других изделий, контактирующих с кожей
- 2331668 Стромальные клетки, получение из жировой ткани, для заживления дефектов роговицы и внутриглазных дефектов и их использование
- 2331438 Альфа - 2 - Дельта Лигант для лечения симптомов нижних мочевыводящих путей
- 2331411Электропряденые аморфные фармоцевтические средства
- 2331367 Способ профилактики образования спаек и их рецидива
- 2130767 Масло в воде для получения косметических и дерматологических средств, способ косметической обработки
- 2230752 Поперечносшитые гиалуроновые кислоты и их применение в медицине
- 2230558 Способ восстановления и сохранения здоровья скмьи
- 2230550 Средства длительного высвобождения, способ их получения и применения
- 2230458 Поддержания здоровья суставов
- 2330290 Способ определения состояния метаболических процессов в ткани суставного хряща
- 2230073 Способ поперечного сшивания карбоксилированных полисахаридов
- 2329059 Способ лечения полипозного риносинусита
- 2329037 Комбинированная терапия для лечения иммуновоспалительных заболеваний
- 2128666 Гиалуроновая кислота и ее соли, способ очистки гиалуроновой кислоты, способ получения гиалуроновой кислоты. Фармацевтический препарат с гиалуроновой кислотой и средства с гиалуроновой кислотой используемые в офтальмологии
- 2328740 Способ экспресс - оценки действия зубных паст
- 2128502 Косметический гель
- 2328272 Суппозитории индуктора интерферона
- 2328268 Косметика содержащая амфолитный сополимер
- 2128057 Композиционная мембрана, способ ее получения и способ направленной регенерации тканей с ее применением
- 2128055 Средство замедленного освобождения и способ его получения
- 2128049 Свечи
- 2227743 Полипептидные варианты с повышенной гепаринсвязывающей способностью
- 2326893 Ковалентное и нековалентное сшивание гидрофильных полимеров
- 2326697 Новый перевязочный материал для быстрого заживления раневой поверхности кожи
- 2126264 Фармацевтическое средство с гиалуроновой кислотой
- 2326137 Способ получения содержащих альгинат пористых формованных изделий
- 2325902 Способ выделения гликозаминогликанов из минерализованной соединительной ткани
- 2225195 Репелленты против насекомых
- 2325193 Сосудистый стент
- 2325184 Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий
- 2325153 Многокомпонентная фармацевтическая дозированная форма
- 2325152 Удерживаемая в желудке система регулируемой доставки лекарственного средства
- 2029955 Способ предоперационного определения помутнения задней капсулы хрусталика при экстракции катаракты
- 2324688 Производные бисбензизоселеназолонила с противоопухолевым, противовоспалительным и антитромбоническим действием
- 2323017 Устройство и способ контролируемый доставки активных веществ в кожу
- 2323011 Содержащий Коллаген I и Коллаген II способный к рассасыванию внеклеточный матрикс, предназначенный для реконструирования хряща
- 2322955 Способ изготовления имплантанта для пластики дефектов хрящевой ткани
- 2322454 Антитело против CCR5
- 2322263 Система продолжительного высвобождения растворимого лекарственного средства
- 2221561 Витамин Е и его сложные эфиры
- 2321634 Гены участвующие в метаболизме углерода и продуцировании энергии
- 2321597 Биоматерьял, способ его приготовления и его применение, медицинское средство, имплантант и вкладыш
- 2121340 Средство для похудения
- 2220737 Средство для улучшения состояния опорно-двигательного аппарата
- 2220729 Гель используемый в стоматологии
- 2320720 Способ культивирования фибропластов для заместительной терапии
- 2320378 Накожный аппликатор
- 2320369 Средства, содержащие Альфа - 2 - Дельта Лиганды и ингибиторы обратного захвата серотонина/норадреналина
- 2320362 Местные фармацевтические средства, содержащие проантоцианидины, для лечения дерматитов
- 2320322 Биоадгезивная доставка лекарств
- 2320318 Чувствительное к температуре изменяющие состояние средство гидрогеля
- 2025120 Способ получения препарата, содержащего Фактор /G-CSF/, стимулирующий рост колоний гранулоцитов
- 2319490 Средство для введения железа при лечении синдрома беспокойных ног
- 25995 Содержащее адгезив приспособление для фиксации зубных протезов в полости рта
- 2218907 Средство для ухода за кожей лица и веками
- 2318830 Способ получения модифицированного дерматансульфата
- 2118153 Косметика - туш для ресниц
- 2217441 Способ получения полимера
- 2317296 Изетионатная соль селективного ингибитора CDK4
- 2217171 Мембрана для использования при направленной регенерации тканей
- 2317095 Экстракты ECHINACEA ANGUSTIFOLIA
- 2216332 Препарат для лечения астроза
- 2216314 Крем - маска для обезвоженной кожи
- 2316333 Средство оздоровительно-восстановительных косметических панто-магниевых ванн
- 2021304 Способ получения биологически активного средства
- 2115662 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2315627 Впрыскиваемые имплантанты на керамической основе для заполнения морщин, кожных впадин, шрамов
- 2315623 Средство получаемое путем лиофилизации препарата
- 2114862 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2314791 Лечебно-Косметическое средство
- 2314791 Косметический крем-бальзам для ухода за кожей лица и шеи
- 2214600 Способ оценки эффективности лечения неврологических проявлений
- 2114602 Способ косметической обработки
- 2114587 Раствор для защиты роговицы
- 2214283 Имплантант для подкожного или внутрикожного введения
- 2313370 Медицинские протезы, имеющие улучшенную биологическую совместимость
- 2313356 Препарат для лечения демодекоза
- 2313338 Средство на основе этиллинолеата и триэтилцитрата для лечения себореи и угрей
- 2313328 Косметика содержащая тонкодисперный и пористый порошок
- 2212880 Способ получения препарата содержащего антибиотик, с замедленным высвобождением активного вещества
- 2312640 Способ лечения Блефароконьюнктивальной формы синдрома сухого глаза
- 2017751 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2312145 Гены CORYNEBACTERIUM GLUTAMICUM, кодирующие белки, участвующие в синтезе мембран и мембранном транспорте
- 2311458 Белки вызывающие измененную иммуногенную реакцию. Способ их получения и использования
- 2311183 Улучшенное разделение с использованием гталуроновой кислоты
- 2311177 Ингибиторы интегрина для лечения заболевания глаз
- 2300069 Косметическая маска
- 2211024 Уход за сухой кожей
- 2310440 Раствор для защиты роговицы от повреждений
- 2309684 Лечение межфалангового остеоатроза узелковой формы
- 2309406 Способ мониторинга фиброза печени у больных хроническим гепатитом с (ХГС)
- 2209088 Опосредованная рецепторами доставка генов с использованием векторов на основе бактериофагов
- 2308967 Уменьшение объема ткани
- 2308962 Средство для опорно-дигательного аппарата
- 2308957 Способ получения препарата для мезотерапии
- 2308954 Средство для лечения ран, содержащее плазму или сыворотку крови
- 2308951 Комплексный способ профилактики вагинальных дисбактериозов
- 2308937 Косметическая биологически активная добавка и косметический литофитокомплекс на ее основе
- 2208638 ДНК (варианты), способ получения белка
- 2207885 Способ подачи небольшого объема лечебного раствора к целевому месту
- 2207858 Лишенные побочных эффектов производные простагландинов для лечения глаукомы
- 2207845 Твердая лекарственная форма пролонгированного действия
- 2207844 Препарат для местного неинвазивного применения
- 2207841 Средства с антиферментативным действием
- 2306335 Стволовые клетки и решетки полученные из жировой ткани
- 2306140 Новые рецепторы для Helicobacter pylori и их применение
- 2205612 Способ эндотелизации IN VITRO протезов кровеносных сосудов
- 2105540 Депигментирующее средство
- 2304960 Косметическое средство для кожи
- 2304616 Гены участвующие в гомеостазе и адаптации
- 2204550Способ получения длинноцепочечной N-Ацилированной кислотой Аминокислот
- 2204415 Способ получения изображения
- 2204394 Средство для лечения грибковых инфекций, желудочных язв
- 2204366 Способ хирургического лечения глаукомы
- 2104034 Вагинальное увлажняющие средство, способ его получения
- 2303991 Биологически активная добавка
- 2303990 БАД
- 2303973 Адсорбирующее изделие
- 2203676 Средство обладающее иммунокорригирующим действием
- 2203672 Способ предупреждения беременности
- 2303635 Гены кодирующие белки резистентности и толерантности к стрессам
- 2303529 Способ фиксации альгинатного геля на твердой фазе, способ получения клеточного чипа на его основе
- 2203078 Способ лечения гнойных ран
- 2302412 Гидразоно-малонитрилы
- 2102400 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2202356 Способ стимуляции репаративных процессов длительно незаживающих ран и трофических язв
- 2202336 Средство для ухода за кожей
- 2302231 Глазные капли
- 2102082 Способ магнитометрического исследования тела человека или животного
- 2301814 Полиакриламидный гидрогель
- 2201765 Гибридные матричные имплантанты и эксплантанты
- 2301677 Биотрансплантант для лечения дегенеративных и трвматических заболеваний хрящевой ткани и способ его получения
- 2301676 Способ лечения ревматизма
- 2301674 Способ лечения больных с переломами нижней челюсти
- 2301661 Средство с регулируемым освобождением и способ его получения
- 2005488 Средство для лечения болезней соединительной ткани
- 2200001 Крем для кожи
|
РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
|
Патент №2188011 |
(54) АКТИВИРУЮЩАЯ ОСТЕОГЕНЕЗ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ
(57) Реферат:
Изобретение относится к области фармакологии и обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую непептидное остеогенез активирующее оптически активное вещество и сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты, которая может быть безопасно использована в качестве более эффективного профилактического терапевтического средства для различных заболеваний костей (например, переломов костей). 10 з.п.ф-лы, 3 ил., 7 табл. Изобретение относится к фармацевтической композиции, имеющей повышенную активирующую остеогенез остеогенную активность, содержащей непептидное остеогенное активирующее оптически активное вещество и биоразлагаемый сополимер, которая является агентом, полезным для лечения и/или предотвращения заболеваний костей. Предпосылки изобретения
Заболевания костей (например, переломы костей) могут иметь место у всех категорий людей вследствие различных причин в спорте и при дорожно-транспортных авариях. И, поскольку требуется длительное время для их излечения, заболевания костей вносят значительные затруднения в повседневную нормальную жизнь пациента. В последние годы число больных остеопорозом увеличилось в связи со старением населения. Так, частота переломов костей конечностей, связанных с остеопорозом, заметно увеличилась пропорционально этому. В частности, перелом кости шейки бедра делает необходимой длительную госпитализацию и часто приводит к внутренним осложнениям, в том числе к деменции, обусловленной длительной госпитализацией, и создает большие социальные и экономические проблемы. Неотъемлемой задачей является обеспечение возможности ранней выписки из больницы пациентов с переломом костей. Излечивание перелома кости является формой заживления ран, характеризующейся местным проявлением и прогрессированием. Обычно различные местные факторы действуют хорошо в месте перелома для активирования заживления in vivo. Такие факторы включают в себя биоактивные вещества пептидного типа, такие как костные морфогенетические белки (BMP) и трансформирующие факторы роста (TGF), которые, как сообщалось, активируют остеогенез на моделях животных "Proceedings of the National Acagemy of Sciences, USA, vol.87, pp. 2220-2224 (1990), and Endocrinology, vol.124, pp.2991-2993 (1989)". Что касается непептидного остеогенного активирующего вещества, сообщалось, например, о производных простагландина A1, производных витамина D3, производных бензилфосфоновой кислоты, производных фенолсульфофталеновой кислоты. Вышеуказанные биоактивные вещества пептидного типа являются пептидами или белками с молекулярными массами более 5000 и они быстро метаболизируются in vivo и не являются стабильными. С учетом этого были получены некоторые препараты в попытке получения удовлетворительной стабильности, но все они не достигали достаточной активирующей остеогенез активности, и не существует препаратов, удовлетворительных в отношении качества и т.д. "Clinical Orthopaedics and Related Research, vol.178, pp.274-285". Также вышеуказанные непептидные активирующие остеогенез вещества не являются клинически эффективными в отношении активирования остеогенеза активности для излечивания переломов костей. По этим причинам существует большая потребность в агенте высокого качества для лечения костного заболевания, который является высокостабильным, безопасным и активным, клинически эффективным при продолжительном лечении переломов костей. Описание изобретения
Было проведено обширное исследование для решения указанных проблем и обнаружено, что агент для лечения заболевания костей, содержащий непептидное активирующее остеогенез оптически активное вещество и биоразлагаемый сополимер, неожиданно хорошо может служить для активации заживления переломов костей с более сильной остеогенной стимулирующей активностью непептидного остеогенного активирующего вещества, чем при его введении отдельно. Было проведено дальнейшее исследование на основании данного открытия и создано настоящее изобретение. Таким образом, данное изобретение относится к:
(1) фармацевтической композиции, содержащей непептидное остеогенез активирующее оптически активное вещество формулы:
где R3 представляет низшую алкильную группу; и R4 и R5 независимо представляют низшую алкильную группу или связаны вместе с образованием низшей алкиленовой группы и сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты,
(2) фармацевтической композиции по п.(1), в которой R3, R4 и R5 независимо представляют C1-6-алкильную группу,
(3) фармацевтической композиции по п.(1), в которой соединение представляет собой (2R, 4S)-(-)-N-[4-(диэтоксифосфорилметил)фенил]-1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоксамид,
(4) фармацевтической композиции по п.(1), в которой весовое отношение указанного сополимера относительно непептидного остеогенного активирующего оптически активного вещества является приблизительно 1-100-кратным,
(5) фармацевтической композиции по п.(2), которая дополнительно содержит фосфорную кислоту или ее соль,
(6) фармацевтической композиции по п.(5), в которой фосфорная кислота или ее соль представляет собой фосфат натрия,
(7) фармацевтической композиции по п.(2), в которой относительное содержание (2R, 4S)-(-)-N-[4-(диэтоксифосфорилметил)фенил] -1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоксамида в расчете на указанный сополимер равно приблизительно 5-30% (масс.) и относительное содержание фосфата натрия в расчете на (2R,4S)-(-)-N-[4-(диэтоксифосфорилметил)фенил] -1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоксамид и данный сополимер равно приблизительно 0,1-20% (масс.). (8) фармацевтической композиции по п.(1), в которой отношение молочная кислота/гликолевая кислота равно приблизительно 90/10-50/50 мас.% и средневесовая молекулярная масса равна приблизительно 8000-50000,
(9) фармацевтической композиции по п.(1) в форме суспензии,
(10) фармацевтической композиции по п.(1), используемой для инъекции, и т.д. Применимые непептидные остеогенные активирующие оптически активные вещества данного изобретения включают серосодержащие гетероциклические соединения, такие как (2R,4S)-(-)-N-[4-(диэтоксифосфорилметил)фенил]-1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоксамид или его соли, описанные в US5071841, US5158943 и JP529460, производные бензопирана, такие как N-(4-диметоксифосфорилметилфенил)-4-оксо-4Н-1-бензопиран-2-карбоксамид или его соли, описанные в ЕР625522, производные фосфоновой кислоты, такие как диэтил-4-(7-циклогексил-3,4-дигидро-2-нафталинкарбоксамид)бензилфосфонат или его соли, описанные в W096/01267, производные простагландина A1, описанные в Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, vol.258, pp.1120-1126 (1991), производные витамина D3, описанные в Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, vol.3, pp.1815-1819 (1993), производные бензилфосфоновой кислоты, описанные в ЕР524023, производные бисфосфоновых кислот, описанные в Bone, vol.13, pp.249-255 (1992), и производные витамина К2, описанные в Biochemical and Biophysical Research Communicatios, vol.187, pp.814-820 (1992). Фармацевтическая композиция данного изобретения может содержать одно или несколько непептидных остеогенных активирующих веществ, описанных выше, в качестве активного ингредиента. В вышеуказанных непептидных остеогенез активирующих оптически активных веществах предпочтительно используют для данного изобретения соединение, представленное формулой (I), или его соль. Оптически активное соединение, представлено формулой (I):
где R3 представляет низшую алкильную группу; R4 и R5 независимо представляют низшую алкильную группу или связываются вместе с образованием низшей алкиленовой группы. Примерами низшей алкильной группы, представленной R3, R4 или R5 в формуле (I), являются алкильные группы, имеющие 1-6 (предпочтительно 1-4) атомов углерода, такие как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, неопентил и гексил. R4 и R5 могут связываться вместе с образованием низшей алкиленовой группы. В этом случае часть молекулы:
может обозначать группу:
где р равно целому числу от 2 до 4. Предпочтительные группы для R3, R4 и R5 включают алкильные группы, имеющие 1-4 атома углерода, такие как метил и этил. Соединение (I) является оптически активным соединением (2R,4S)конфигурации и по существу не содержит соединения (2S, 4R)конфигурации. Предпочтительным является соединение (I) с оптической чистотой, близкой к 100%. Наиболее предпочтительным в качестве соединения (I) является, например, соединение (2R, 4S)-(-)-N-[4-(диэтоксифосфорилметил)фенил] -1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоксамид (далее называемое также соединением А). Солью непептидного остеогенного активирующего соединения согласно данному изобретению является предпочтительно фармацевтически приемлемая соль. Фармацевтически приемлемые соли включают соли с неорганическими основаниями, соли с органическими основаниями и соли с основными или кислотными аминокислотами. Неорганические основания, способные к образованию таких солей, включают гидроксиды щелочных металлов (например, натрия, калия) и щелочноземельных металлов (например, кальция, магния), такие органические основания включают триметиламин, триэтиламин, пиридин, пиколин, N,N-дибензилэтилендиамин и диэтаноламин, такие неорганические кислоты включают хлористоводородную кислоту, бромистоводородную кислоту, иодистоводородную кислоту, фосфорную кислоту, азотную кислоту и серную кислоту, такие органические кислоты включают муравьиную кислоту, уксусную кислоту, трифторуксусную кислоту, щавелевую кислоту, винную кислоту, фумаровую кислоту, малеиновую кислоту, метансульфоновую кислоту, бензолсульфоновую кислоту, п-толуолсульфокислоту и лимонную кислоту, и такие основные или кислотные аминокислоты включают аргинин, лизин, аспарагиновую кислоту и глутаминовую кислоту. Непептидное остеогенное активирующее оптически активное вещество данного изобретения может быть получено, например, по общеизвестной методике (например, согласно US5071841, US5158943, описанным выше) и по способу, описанному ниже, или его модификации. Например, соединение (I) или его соль может быть получено взаимодействием оптически активного соединения формулы (II):
где R3 имеет значения, приведенные выше, или реакционноспособного производного по карбоксильной группе или его соли с соединением формулы (III):
где R4 и R5 имеют значения, приведенные выше, его реакционноспособным производным по аминогруппе или его солью. Предпочтительные реакционноспособные производные аминогруппы на соединении (III) включают таутомерные изомеры имино- или енамино-формы оснований Шиффа, образующиеся в результате взаимодействия соединения (III) и карбонильного соединения, такого как альдегид (например, ацетальдегид) или кетон (например, ацетон); силильные производные, образующиеся в результате взаимодействия соединения (III) и силильного соединения, такого как бис(триметилсилил)ацетамид, моно(триметилсилил)ацетамид или бис(триметилсилил)мочевина; и производные, получающиеся при взаимодействии соединения (III) и трихлорида фосфора или фосгена. Предпочтительные реакционноспособные производные карбоксильной группы на соединении (II) включают галогенангидриды, ангидриды кислот, активированные амиды и активированные сложные эфиры, которые получают по общепринятым методикам. Предпочтительные реакционноспособные производные включают хлорангидриды; азиды кислот; смешанные ангидриды кислот с замещенной фосфорной кислотой, такой как диалкилфосфорная кислота, фенилфосфорная кислота, дифенилфосфорная кислота, дибензилфосфорная кислота или галогенированная фосфорная кислота, диалкилфосфорная кислота, сернистой кислотой, тиосерной кислотой, серной кислотой, сульфоновой кислотой, такой как метансульфоновая кислота, алифатической карбоновой кислотой, такой как уксусная кислота, пропионовая кислота, масляная кислота, изомасляная кислота, пивалиновая кислота, пентановая кислота, изопентановая кислота или трихлоруксусная кислота, или ароматической карбоновой кислотой, такой как бензойная кислота; симметричные ангидриды кислот; активированные амиды с имидазолом, 4-замещенным имидазолом, диметилпиразолом, триазолом или тетразолом; активированные сложные эфиры, такие как цианометиловый эфир, метоксиметиловый эфир, диметилиминометиловый эфир, виниловый эфир, пропаргиловый эфир, п-нитрофениловый эфир, трихлорфениловый эфир, пентахлорфениловый эфир, мезилфениловый эфир, фенилазофениловый эфир, фенилтиоэфир, п-нитрофениловый эфир, п-крезилтиоэфир, карбоксиметилтиоэфир, пираниловый эфир, пиридиловый эфир, пиперидиловый эфир или 8-хинолилтиоэфир; и сложные эфиры N-гидроксисоединений, такие как N, N-диметилгидроксиламин, 1-гидрокси-2-(1Н)-пиридон, N-гидроксисукцинимид, N-гидроксифталимид, 1-гидрокси-1Н-бензо-триазол и N-гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксиимид. Эти реакционноспособные производные могут быть необязательно выбраны в соответствии с типом соединения (II). Предпочтительные соли реакционноспособных производных соединения (II) или (III) включают основные соли, например соли щелочных металлов, такие как соль натрия и соль калия, соли щелочноземельных металлов, такие как соль кальция и соль магния, соль аммония, и соли органических оснований, таких как соль триметиламина, соль триэтиламина, соль пиридина, соль пиколина, соль дициклогексиламина и соль дибензилэтилендиамина. Указанную реакцию, как правило, проводят в обычном растворителе, таком как вода, спирт (например, метанол, этанол), ацетон, диоксан, ацетонитрил, хлороформ, метиленхлорид, этиленхлорид, тетрагидрофуран, этилацетат, N,N-диметилформамид или пиридин, но ее можно проводить в любом другом органическом растворителе, если он не мешает протеканию реакции. Указанные обычные растворители могут быть использованы в смеси с водой. В данной реакции при применении соединения (II) или (III) в форме свободной кислоты или ее соли реакцию предпочтительно осуществляют в присутствии обычного конденсирующего агента, такого как N,N'-дициклогексилкарбодиимид; N-циклогексил-N'-морфолиноэтилкарбодиимид; N-циклогексил-N'-(4- диэтиламиноциклогексил)карбодиимид; N,N'-диэтилкарбодиимид; N,N'-диизопропилкарбодиимид; N-этил-N'-(3-диметиламинопропил)карбодиимид; N,N'-карбонилбис(2-метилимидазол); пентаметиленкетен-N-циклогексилимин; дифенилкетен-N-циклогексилимин; этоксиацетилен; 1-алкокси-1-хлорэтилен; триалкилфосфит; этилполифосфат; изопропилполифосфат; оксихлорид фосфора; дифенилфосфорилазид; тионилхлорид; оксалилхлорид; низший алкилгалогенформиат, такой как этилхлорформиат или изопропилхлорформиат; трифенилфосфин; соль 2-этил-7-гидроксибензизооксазолия; внутримолекулярная соль гидроксида 2-этил-5-(м-сульфофенил)изоксазолия; N-гидрокси-бензотриазол; 1-(п-хлорбензолсульфонилокси)-6-хлор-1Н-бензотриазол или реагент Вилсмейера, полученный взаимодействием N,N'-диметилформамида с тионилхлоридом, трихлорметилхлорформиатом или оксихлоридом фосфора. Также желательной является методика с использованием конденсирующего агента, такого как N,N'-дициклогексилкарбодиимид, в присутствии N-гидроксибензотриазола или N-гидрокси-5-норборнен-эндо-2,3-дикарбоксиимида. Данную реакцию можно также проводить в присутствии неорганического или органического основания, такого как бикарбонат щелочного металла, три(низший)алкиламин, пиридин, N-(низший)алкилморфолин или N, N-ди(низший)алкилбензиламин. Хотя температура реакции не ограничивается, данную реакцию обычно проводят в условиях охлаждения - нагревания (-10 -120oС). Время реакции равно обычно приблизительно 0,5-100 часам, предпочтительно приблизительно 1-50 часам. Соединение (I), полученное таким образом, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, такими как концентрирование, концентрирование при пониженном давлении, экстракция растворителем, кристаллизация, перекристаллизация, повторное растворение и хроматография. Исходное соединение (II) может быть получено, например, оптическим разделением рацемата соединения (II), описанным в US5158943. В частности, оптически активное соединение получают приготовлением соли рацемата соединения (II) и оптически активного основания (например,  -метилбензиламина, бруцина, хинина, цинхонина), повторения фракционной кристаллизации на основе различия растворимости между образующимися диастереоизомерами с получением слаборастворимой соли в чистом виде и с последующей обработкой кислотой. Другое оптически активное соединение можно получить этерификацией рацемата соединения (II) оптически активным спиртом (например, оптически активным метиллактатом, метилманделатом), получением другого сложного эфира в чистом виде на основе различия физических свойств между образующимися диастереоизомерами с последующим проведением гидролиза. Сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты согласно данному изобретению представляет собой сополимер, который растворим или нерастворим в воде и является разлагаемым in vivo. Полимеризация может быть произвольной полимеризацией, блок-сополимеризацией или графт-полимеризацией. Среднюю молекулярную массу указанных сополимеров данного изобретения выбирают предпочтительно из диапазона приблизительно от 2000 до 800000, более предпочтительно приблизительно от 5000 до 200000. Относительное содержание молочной кислоты и гликолевой кислоты в сополимере молочной кислоты-гликолевой кислоты равно предпочтительно приблизительно 100/0-50/50 по массе и более предпочтительно приблизительно 90/10-50/50 по массе. Средневесовая молекулярная масса сополимера молочной кислоты-гликолевой кислоты равна предпочтительно приблизительно от 5000 до 100000, более предпочтительно приблизительно 8000-50000. Сополимер молочной кислоты-гликолевой кислоты можно синтезировать по общеизвестной методике получения, такой как описано в ЕР172636. Данный сополимер предпочтительно синтезируют дегидрогенизационной поликонденсацией в отсутствии катализатора. В данной заявке средневесовую молекулярную массу определяют как средневесовую массу в расчете на полистирол, измеренную при помощи гель-проникающей хроматографии (ГПХ). Измерения проводили с применением колонки ГПХ KF804L 2 (производимой Showa Denko) и монитора RI L-3300 (производимого Hitachi Ltd.) с хлороформом в качестве подвижной фазы. Количество данного сополимера меняется в соответствии с величиной фармакологической активности непептидного остеогенез активирующего вещества, скорости и продолжительности высвобождения лекарственного средства из данного сополимера и так далее, пока не будет достигнута желаемая цель. Например, сополимер используют в приблизительно 0,2-10000-кратных количествах (соотношение по массе), предпочтительно приблизительно 1-1000-кратных количествах более предпочтительно приблизительно 1-100-кратных количествах, относительно количества биоактивного вещества. Фармацевтическая композиция данного изобретения может быть получена обычными способами получения фармацевтической композиции, например, она может быть получена диспергированием непептидного активирующего вещества в данном сополимере или помещением непептидного остеогенного активирующего вещества в предварительно сформованный полый сополимер. В частности, используемые способы включают способ сушки в воде, способ разделения фаз, способ сушки распылением и их модификации. Фармацевтическая композиция данного изобретения, полученная по способу, указанному выше, может быть в форме, например, мелких частиц, сфер, палочек, игл, гранул, пленок или кремов, но форма ее не ограничивается только указанными формами для достижения желаемой цели. В данной заявке фармацевтическую композицию мелких частиц называют также микрокапсулами или микросферами. Ниже описаны примеры способов получения микрокапсул. (1) Способ сушки в воде (м/в, т.е. способ получения эмульсии типа "масло в воде"). В данном способе сначала готовят раствор в органическом растворителе, содержащий сополимер. Органический растворитель, используемый для получения фармацевтической композиции данного изобретения, предпочтительно имеет точку кипения не выше 120oС. Такие органические растворители включают галогенированные углеводороды (например, дихлорметан, хлороформ, хлорэтан, дихлорэтан, трихлорэтан, четыреххлористый углерод), алифатические сложные эфиры (например, этиловый эфир, бутиловый эфир), простые эфиры (например, этиловый простой эфир, изопропиловый простой эфир) и ароматические углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол). Данные растворители можно использовать в сочетании из двух или нескольких типов растворителей в подходящих соотношениях. Предпочтительным растворителем является дихлорметан или ацетонитрил, более предпочтительно дихлорметан. Концентрацию сополимера в растворе органического растворителя обычно выбирают в диапазоне приблизительно от 0,01 до 80 мас. %, предпочтительно приблизительно 0,1-70 мас.% и более предпочтительно приблизительно 1-60 мас.%, хотя она изменяется в зависимости от молекулярной массы данного сополимера и от типа растворителя, и т.д. Непептидное остеогенное активирующее вещество добавляют и растворяют в полученном таким образом растворе в органическом растворителе, содержащем данный сополимер, если необходимо, после лиофилизации или сушки в вакууме. Количество непептидного остеогенного активирующего вещества составляет приблизительно от 0,001 до 90 мас.%, предпочтительно приблизительно 0,1-80 мас.% и более предпочтительно приблизительно 0,1-50 мас.% в расчете на концентрацию сополимера в растворе органического растворителя, хотя количество изменяется в зависимости от типа лекарственного средства, механизма его действия на остеогенез, продолжительности действия и т.д. Полученный таким образом раствор в органическом растворителе добавляют затем к водной фазе с получением эмульсии типа масло в воде при помощи приводной мешалки турбинного типа или т.п. Объем водной фазы обычно выбирают из диапазона приблизительно от 1 до 10000-кратного, предпочтительно приблизительно от 2 до 5000-кратного и более предпочтительно приблизительно от 5 до 2000-кратного относительно объема масляной фазы. К водной фазе может быть добавлен эмульгатор. Это может быть любой эмульгатор, если он способен образовывать стабильную эмульсию типа масло в воде. Примеры таких эмульгаторов включают анионогенные поверхностно-активные вещества, неионогенные поверхностно-активные вещества, полиоксиэтиленовые производные касторового масла, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, карбоксиметилцеллюлозу, лецитин, желатин и гиалуроновую кислоту. Они могут быть использованы в подходящем сочетании. Концентрация эмульгатора в водной фазе равна предпочтительно приблизительно 0,001-20 мас.%, более предпочтительно приблизительно 0,01-10 мас. % и еще более предпочтительно приблизительно 0,05-5 мас.%. Выпаривание растворителя из масляной фазы может быть выполнено общепринятыми способами, в том числе по методике, в которой растворитель выпаривают при нормальном или постепенно уменьшающемся давлении во время перемешивания пропеллерной мешалкой или магнитной мешалкой и т.д., и по методике, в которой растворитель выпаривают при доведении вакуума до нужной величины с использованием роторного испарителя и т.д. Полученные микрокапсулы разделяют центрифугированием или фильтрованием, после чего их промывают, например, водой или гептаном, несколько раз для удаления свободных непептидных остеогенных активирующих веществ, эмульгатора и т.д., прилипших к поверхности микрокапсул. Затем микрокапсулы опять диспергируют в дистиллированной воде и т.д. и лиофилизуют. В описанном выше м/в-способе микрокапсулы могут быть получены по р/м/в-способу (растворитель/масло/вода), в котором непептидное остеогенное активирующее вещество диспергируют в растворе органического растворителя, содержащем данный сополимер. (2) Способ сушки в воде (в/м/в способ)
В данном способе непептидное остеогенное активирующее вещество или его соль сначала растворяют или диспергируют в воде с получением указанной выше концентрации для получения внутренней водной фазы, если необходимо, с растворением или суспендированием, добавляя удерживающее лекарственное средство вещество, такое как белок (например, желатин), морская водоросль (например, агар), полисахарид (например, альгиновая кислота), синтетическое высокомолекулярное вещество (например, поливиниловый спирт), основная аминокислота (например, аргинин, лизин) или т.п. Внутренняя водная фаза может быть дополнена органической кислотой, такой как уксусная кислота, щавелевая кислота или лимонная кислота, неорганической кислотой, такой как угольная кислота или фосфорная кислота, гидроксидом щелочного металла, таким как гидроксид натрия, основной аминокислотой, такой как аргинин или лизин, или их солью (например, солями с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, лимонная кислота, или солями с неорганическими кислотами, такими как угольная кислота, фосфорная кислота и соляная кислота), в качестве регулятора pН для сохранения стабильности и растворимости непептидного остеогенного активирующего оптически активного вещества или его соли. В качестве стабилизатора непептидного остеогенного активирующего оптически активного вещества могут быть добавлены белок (например, альбумин, желатин), производное крахмала (например, декстрин, пуллулан и т.д.), органическая кислота (например, лимонная кислота), соль щелочного металла этилендиаминтетрауксусной кислоты (например, этилендиаминтетраацетат натрия), кислая соль щелочного металла сернистой кислоты (например, бисульфит натрия), синтетическое высокомолекулярное вещество (например, полиэтиленгликоль) или т. п. Могут быть также добавлены обычные консерванты, такие как п-оксибензоаты (например, метилпарабен, пропилпарабен), бензиловый спирт, хлорбутанол и тимеросал. Дополнительное количество непептидного остеогенного активирующего вещества равно приблизительно 0,001-90 мас.%, предпочтительно приблизительно 0,01-80 мас. %, более предпочтительно приблизительно 0,1-50 мас. %, хотя это количество меняется в зависимости от типа лекарственного средства, механизма действия его на остеогенез или продолжительности действия и т.д. Полученную внутреннюю водную фазу добавляют к раствору (масляная фаза), содержащему данный сополимер, с последующей эмульгирующей обработкой с получением эмульсии типа вода в масле. Эмульгирование достигается известными способами диспергирования, которые включают в себя способ прерывистого встряхивания, способ с применением смесителя, такого как пропеллерный смеситель или турбинный смеситель, способ с применением коллоидной мельницы, способ с применением гомогенизатора и способ обработки ультразвуком. Описанный выше раствор (масляная фаза), содержащий данный сополимер, представляет собой раствор, полученный растворением сополимера в органическом растворителе. Данный растворитель может быть любым растворителем, если его точка кипения не превышает приблизительно 120oС и если он не смешивается с водой. Такие растворители включают галогенированные углеводороды (например, дихлорметан, хлороформ, хлорэтан, дихлорэтан, трихлорэтан, четыреххлористый углерод), алифатические сложные эфиры (например, этилацетат, бутилацетат), простые эфиры (например, этиловый простой эфир, изопропиловый простой эфир) и ароматические углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол). Указанные растворители можно применять в сочетании из двух или более типов в подходящих соотношениях. Затем полученную эмульсию типа вода в масле добавляют к водной фазе с получением эмульсии типа вода/масло/вода, из которой растворитель масляной фазы выпаривают с получением микрокапсул. Специфический способ для данного получения идентичен способу, описанному в (1) выше. (3) Способ разделения фаз
В данном способе к вышеописанной эмульсии вода/масло постепенно добавляют коацерватирующий агент при перемешивании для осаждения и отверждения данного сополимера. В качестве коацерватирующего агента могут быть использованы силиконовое масло, растительные масла и жиры (например, кунжутное масло, соевое масло, кукурузное масло, хлопковое масло, льняное масло), минеральные масла, углеводороды (например, н-гексан, н-гептан), если они представляют собой полимерные соединения минерального масла или растительного масла, которые могут смешиваться с растворителем данного сополимера и которые не растворяют данный сополимер, для инкапсулирования. Они могут быть использованы в сочетании из двух или нескольких типов коацерватирующих агентов. Полученные микрокапсулы после их фильтрования и отделения повторно промывают гептаном и т. д. для удаления коацерватирующего агента. Затем свободное лекарственное средство и растворитель удаляют с использованием того же способа сушки в воде. Для предотвращения флокуляции частиц во время промывания могут быть добавлены антифлокулянты: водорастворимые сахара, такие как маннит, лактол, глюкоза, и крахмалы (например, кукурузный крахмал), аминокислоты, такие как глицин и аланин, и белки, такие как желатин, фибрин и коллаген. (4) Способ сушки распылением
Для получения микрокапсул по данному способу вышеописанную эмульсию типа вода в масле распыляют через распылительное сопло в сушильную камеру распылительной сушки для испарения органического растворителя и воды в виде мелких капелек за короткое время и получают микрокапсулы. Примерами распылительного сопла являются двухкомпонентная форсунка, сопло высокого давления и сопло с вращающимся диском. Для предотвращения флокуляции микрокапсул через другое сопло может распыляться водный раствор описанного выше антикоагулянта одновременно с распылением эмульсии типа вода в масле. Полученные таким образом микрокапсулы могут быть нагреты при пониженном давлении для облегчения удаления содержащихся в них воды и растворителя. Кроме получения вышеописанных микрокапсул, фармацевтическая композиция согласно данному изобретению может быть получена путем растворения диспергированного в данном сополимере непептидного остеогенного активирующего оптически активного вещества и формования данного раствора в сферы, иглы, гранулы, пленки или т.п. при помощи подходящего для этого способа. Диспергированное в сополимере непептидное остеогенное активирующее оптически активное вещество получают, например, согласно способу, описанному в US3773919. Кроме того, фармацевтическая композиция данного изобретения также может быть получена распылением до подходящего размера частиц диспергированного в данном сополимере непептидного остеогенного активирующего оптически активного вещества согласно способу, такому как описано в JP62234656, в котором используют разбрызгиватель струйной мельницы турбинного типа или ультразвуковой струйный разбрызгиватель. В частности, непептидное остеогенное активирующее оптически активное вещество добавляют к органическому растворителю, содержащему сополимер, и растворяют в нем. Затем твердый раствор, полученный вакуумной сушкой, грубо измельчают и просеивают с последующим удалением растворителя, после чего грубые частицы измельчают до контролируемого размера частиц при помощи ультразвукового струйного пульверизатора с получением фармацевтической композиции данного изобретения. Фармацевтическая композиция данного изобретения может быть использована в форме микрокапсул как таковых или сформулирована в различные дозированные формы с микрокапсулами, сферами, палочками, иглами, шариками, пленками или кремами в качестве исходного материала. Фармацевтическая композиция данного изобретения может содержать фосфорную кислоту или ее соль (например, фосфат натрия, фосфат калия) в количестве приблизительно 0-30%. Фармацевтическая композиция данного изобретения может также вводиться в виде парентерального средства для местного введения (например, в виде инъецируемых препаратов для внутримышечного, подкожного введения, введения в органы или суставы и т.д., твердых препаратов, таких как вводимые надолго препараты, гранулы и порошки, жидких препаратов, таких как суспензии и мази). Инъецируемый препарат может быть приготовлен в виде водной суспензии суспендированием микрокапсул в воде вместе с диспергирующим агентом (например, поверхностно-активными веществами, такими как Твин 80 и НСО-60, полисихаридами, такими как карбоксиметилцеллюлоза, альгинат натрия и гиалуроновая кислота и полисорбат), консервантом (например, метилпарабен, пропилпарабен), изотоническим агентом (например, хлорид натрия, маннит, сорбит, глюкоза), буфером (например, карбонат кальция), агентом для доведения рН (например, фосфат натрия, фосфат калия) и т.д., и он может быть приготовлен в виде масляной суспензии диспергированием микрокапсул в растительном масле, таком как кунжутное масло или кукурузное масло, с фосфолипидом, таким как лецитин, или без него или триглицеридом жирной кислоты с цепью умеренной длины (например, MIGLYOL 812). Фосфат может повышать остеогенную активирующую активность фармацевтической композиции согласно данному изобретению. Концентрация фосфата натрия или фосфата калия в таком инъецируемом препарате равна приблизительно от 0,1 мМ до 500 мМ, предпочтительно приблизительно 1 мМ-100 мМ. Предпочтительным вариантом данного изобретения является следующий вариант. (A) сополимер молочной кислоты-гликолевой кислоты, в котором соотношение молочной кислоты/гликолевой кислоты равно приблизительно 90/10-50/50 по массе и средневесовая молекулярная масса равна приблизительно 8000-50000,
(B) (2R,4S)-(-)-N-[4-(диэтоксифосфорилметил)фенил]-1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоксамид и (С) фосфат натрия. Относительное содержание (В) в расчете на (А) равно приблизительно 30 мас.%. Относительное содержание (С) в расчете на (А) и (В) равно приблизительно 0,1-20 мас.%. При использовании микрокапсул, например, в виде инъецируемой суспензии размер их частиц выбирают в диапазоне приблизительно 0,1-300 мкм (средний диаметр частиц), если они удовлетворяют требованиям, касающимся степени диспергирования и способности прохождения через иглу шприца. Предпочтительно размер частиц равен приблизительно 1-150 мкм, более предпочтительно приблизительно 2-100 мкм. Фармацевтическая композиция данного изобретения представляет собой предпочтительно суспензию, как описано выше. Фармацевтическая композиция данного изобретения предпочтительно находится в форме мелких частиц. Это связано с тем, что такая композиция будет вызывать меньшую боль у пациента при введении через иглу для инъекции для подкожной или внутримышечной инъекции. Фармацевтическая композиция данного изобретения предпочтительно представляет собой препарат для инъекции. Способы получения микрокапсул в виде стерильного препарата включают (но не ограничиваются ими) способ, в котором весь процесс получения является стерильным, способ, в котором в качестве стерилизующего агента используют гамма-излучение, и способ, в котором добавляют антисептическое средство. Фармацевтическая композиция данного изобретения может быть использована для предотвращения и лечения заболеваний костей (например, переломов костей, рефрактур, остеопороза, остеомаляции, синдрома Бехчета (тройного симптомокомплекса), анкилозирующего спондилоартрита, ревматоидного артрита и деструкции ткани сустава, вызываемой деформирующим гонартритом, и родственных заболеваний), для восстановления костной ткани после хирургии по поводу миеломной болезни (болезни Калера), рака легких, рака молочной железы и т.д. и для регенерации периодонтальной ткани в парадонтопатии, поскольку данная композиция обнаруживает свойство пролонгированного (замедленного) высвобождения с повышенной активностью непептидного остеогенного активирующего вещества и имеет время пролонгированного высвобождения от 1 недели до 3 месяцев в зависимости от типа и содержания сополимера и т.д. Фармацевтическая композиция данного изобретения особенно эффективна в случае пациентов с переломами костей, поскольку указанные пациенты обычно имеют фиксированную пораженную часть, покрытую гипсовой повязкой, и желают охотнее ускорить выздоровление посредством однократного введения, чем посредством многочисленных введений. Препарат пролонгированного действия, состоящий из фармацевтической композиции данного изобретения, можно использовать в сочетании с другими активными агентами. Например, в случае соединения, представленного формулой (I), в качестве остеогенного активирующего вещества для сочетания с ним можно использовать препараты кальция (например, карбонат кальция), кальцитонин, витамин D (например, альфакальцидол), половой гормон (например, эстроген, эстрадиол), простагландин A1, бисфосфоновую кислоту, иприфлавон, соединение фтора (например, фторид натрия), витамин K2, BMP (морфогенетический белок костей), FGF (фибробластный фактор роста), PDGF (тромбоцитарный фактор роста), TGF- (трансформирующий фактор роста-), IGF-1 (инсулин-подобный фактор роста-1), IGF-2 (инсулин-подобный фактор роста-2), РТН (паратиреоидный гормон) и так далее. Обладая низкой токсичностью, фармацевтическая композиция данного изобретения может безопасно использоваться для млекопитающих (например, для людей, крупного рогатого скота, лошадей, свиней, кошек, мышей, крыс, кроликов). Ожидается, что фармацевтическая композиция данного изобретения может служить в качестве безопасного препарата с высокой эффективностью, обеспечивая постоянное действие лекарственного средства с низкой токсичностью и удовлетворяя требованиям предотвращения и лечения заболеваний костей, восстановления поврежденной костной ткани и регенерации периодонтальной ткани в случае периодонтита и т. д., поскольку данная композиция постоянно высвобождает лекарственное средство на протяжении длительного периода времени. Например, при применении фармацевтической композиции данного изобретения для лечения переломов костей (например, перелома кости шейки бедра) она может эффективно проявлять ее остеогенное активирующее действие местно и значительно сокращать время выздоровления, которое обычно составляет 2-6 месяцев после перелома кости. Поэтому пациенты быстро возвращаются к нормальной общественной жизни и могут быть также предотвращены различные осложнения, вызываемые переломами костей в старческом возрасте. Доза фармацевтической композиции данного изобретения может быть эффективным количеством непептидного остеогенного активирующего оптически активного вещества, находящимся, однако, в зависимости от типа и содержания данного непептидного остеогенного активирующего оптически активного вещества, времени высвобождения лекарственного средства, конкретного животного и т. д. Например, при применении фармацевтической композиции данного изобретения в форме микрокапсул для лечения участка кости с переломом ее можно вводить в дозе приблизительно от 0,01 до 500 мг, предпочтительно приблизительно 5-50 мг в расчете на содержание активного ингредиента (например, соединения (I)) на взрослого больного (с весом 50 кг) на одну дозу, от одного раза в неделю до одного раза в месяц. Краткое описание рисунков
Фиг. 1 - графическое изображение минерального содержания (мг) малоберцовой кости через 2 недели после введения соединения А в виде микрокапсул и микрокапсул плацебо (контроль) крысам. Фиг. 2 - графическое изображение временного изменения скорости удерживания соединения А в месте введения у крыс, получивших подкожную имплантацию таблетки, содержащей соединение А в виде микрокапсул в спину. Абсцисса указывает время (недели) после введения. Ордината показывает остающуюся под кожей дозу (%) соединения А. Фиг. 3 - графическое изображение изменения во времени концентрации соединения А в крови крыс, получивших подкожную имплантацию в спинки находящегося в виде микрокапсул соединения А. Абсцисса указывает время (недели) после введения. Ордината показывает концентрацию (мкг/мл) соединения А в крови. Наилучший способ воплощения изобретения
Данное изобретение описано далее более подробно при помощи следующих приводимых в качестве справочных примеров, рабочих примеров и примеров испытаний, которые не предназначены для ограничения данного изобретения. В рабочих примерах и примерах испытаний комнатной температурой называют температуру между приблизительно 0 и 30oС. Примеры
Справочный пример 1
Получение (R)--метоксикарбонилбензилового эфира (2R,4S)-(-)-1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоновой кислоты
Раствор гидрохлорида 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимида (12,59 г) в дихлорметане (200 мл) добавляли по каплям к раствору ( )-т-1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоновой кислоты (15,34 г) и метил-(R)-(-)-миндальной кислоте (18,19 г) в N,N-диметилформамиде (ДМФ) (200 мл) при 0oС с последующим добавлением 4-диметиламинопиридина (ДМАР) (3,34 г). После перемешивания при 0oС в течение 1 часа и при комнатной температуре в течение 15 часов смесь выливали на воду и экстрагировали этилацетатом. Слой этилацетата промывали водой и сушили (MgSO4), после чего растворитель выпаривали. Оставшиеся кристаллы собирали фильтрованием, промывали смесью эфир-гексан и дважды перекристаллизовывали из смеси этилацетат-гексан с получением соединения заголовка (4,09 г, выход 17%). Точка плавления: 140-141oС. Оптическое вращение []D (23oС): -244,2oС (с=0,50, СНСl3). Справочный пример 2
Получение (2R, 4S)-{-)-1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоновой кислоты
Смесь (R)--метоксикарбонилбензилового эфира (2R,4S)-(-)-1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоновой кислоты, полученного в справочном примере 1 (4,18 г), уксусной кислоты (45 мл) и концентрированной соляной кислоты (30 мл) перемешивали в течение 30 минут при нагревании с обратным холодильником. Реакционную смесь выливали в воду (800 мл). Полученное кристаллическое вещество собирали фильтрованием и растворяли в этилацетате (150 мл). Слой этилацетата промывали водой и сушили (MgS04), после чего растворитель выпаривали. Оставшиеся кристаллы собирали фильтрованием, промывали гексаном и перекристаллизовывали из смеси этилацетат-гексан с получением соединения заголовка (1,62 г, выход 59%) в форме бесцветных игольчатых кристаллов. Точка плавления: 194-195oС. Оптическое вращение []D (23oС): -210,8o (с=0,50, СН3ОН). Справочный пример 3
Получение (2R, 4S)-(-)-N-[4-(диэтоксифосфорилметил)фенил] -1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоксамида (соединения А)
Раствор гидрохлорида 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (0,39 г) в дихлорметане (7 мл) добавляли по каплям к раствору (2R,4S)-(-)-1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоновой кислоты (0,47 г), полученной в справочном примере 2, и диэтил 4-аминобензилфосфоната (0,41 г) в N,N-диметилформамиде (ДМФ) (7 мл) при 0oС с последующим добавлением 1-гидроксибензотриазола (HOBt) (0,28 г). После перемешивания при 0oС в течение 1 часа и при комнатной температуре в течение 15 часов смесь выливали на воду и экстрагировали этилацетатом. Слой этилацетата промывали водой и сушили (MgSO4), после чего растворитель выпаривали. Оставшиеся кристаллы собирали фильтрованием и перекристаллизовывали из смеси этилацетат-гексан и смеси метанол-гексан с получением соединения А (0,37 г, выход 44%) в форме бесцветных призм. Точка плавления: 181-182oС. Оптическое вращение []D (23oС): -187,4o (с=0,50, СНСl). Пример 1
Готовили раствор в дихлорметане сополимера молочной кислоты-гликолевой кислоты, далее называемого ПМГК; относительное содержание молочной кислоты-гликолевой кислоты (мол. %) и средневесовая молекулярная масса согласно ГПХ показаны в таблице 1; производимого Wako Pure Chemical Industry. С применением формулы, показанной в таблице 1 (раствор далее называют раствором А). Подобным образом раствор в дихлорметане соединения А также готовили с применением формулы, показанной в таблице 1 (раствор далее называют раствором В). Растворы А и В однородно смешивали
вместе. Данную смесь вводили в 0,1% водный раствор поливинилового спирта (EG-40, производимого Nippon Synthetic Chemical Industry) (далее называемый раствором ПВС), охлажденный до 15oС заранее, в объеме, указанном в таблице 1, и эмульгировали с применением гомосмесителя турбинного типа при 7000 об/мин с получением эмульсии типа масло в воде, которую затем перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов для выпаривания дихлорметана. После отверждения масляную фазу центрифугировали при 2000 об/мин, используя центрифугу (05PR-22, Hitachi Ltd. ). Собранную фракцию микрокапсул опять диспергировали в дистиллированной воде, затем центрифугировали с последующим промыванием высвобожденного лекарственного средства и т.д. Собранные микрокапсулы опять диспергировали в небольшом количестве дистиллированной воды и затем лиофилизовали. Получали микрокапсулы с размерами частиц, показанными в таблице 1. Содержание микрокапсул, включавших в себя соединение А, было 100%. Пример 2
500 мг микрокапсул 1, полученных в примере 1, однородно диспергировали в двух тест-пробирках раствора фибриногена для Tisseel (производимого Nippon Zoki Pharmaceutical). Постепенно добавляли в две тест-пробирки раствор тромбина для Tisseel. Затем каждую смесь сразу же набирали в пластиковый шприц. Шприцу давали стоять при 37oС в течение 30 минут для отверждения содержимого. После отверждения содержимое выдавливали из кончика шприца и разрезали бритвой на гранулы с объемом приблизительно 200 мкл. Пример 3
К микрокапсулам 3, полученным в примере 1, которые содержат соединение А (относительное содержание 4%), добавляли 20% измельченного желатина (производимого Nitta Gelatin) с получением содержащего микрокапсулы препарата в виде таблетки диаметром 5,5 мм и весом 125 мг. Пример 4
Микрокапсулы 7, содержащие соединение А (относительное содержание 10%), получали так же, как в примере 1, за исключением того, что PLGA (ПМГК) имела относительное содержание молочной кислоты-гликолевой кислоты 85/15 (мол.%) и средневесовую молекулярную массу 14900 (Wako Pure Chemical Industry). Средний размер частиц был 31 мкм. Пример 5
Раствор в дихлорметане, содержащий 2,4 г PLGA (ПМГК) (Wako Pure Chemical Industry), относительное содержание молочной кислоты/гликолевой кислоты которого равно 85/15 и средневесовая молекулярная масса равна 14900, и 0,1 г соединения А, получали так же, как описано в примере 1. В раствор добавляли 0,2 г эстрадиола. Затем раствор PVA добавляли в данный раствор для получения эмульсии типа масло в воде. Получали микрокапсулы 8, содержащие соединение А и эстрадиол. Средний размер частиц был 27 мкм. Пример испытаний 1
500 мг микрокапсул 1, полученных в примере 1, точно взвешивали и переносили в стеклянную центрифужную пробирку и давали стоять при 37oС в виде порошка. После определенного времени микрокапсулы растворяли в небольшом количестве ацетонитрила и количественно анализировали при помощи ВЭЖХ. Испытания стабильности представлены в таблице 2. Содержание лекарственного средства было более 95% даже после 4 недель. Пример испытаний 2
Микрокапсулы 2 и 3, полученные в примере 1, по 5 мг каждая, точно взвешивали и переносили в стеклянный сосуд с последующим встряхиванием при 37oС на водяной бане (TAITEC, термостат М-100, 115 толчков/мин) в присутствии 10 мл тест-раствора высвобождения (фосфатный буфер с добавлением 10% бычьего сывороточного альбумина, pН 7,0). К каждой пробе 100 мкл, взятой после определенного времени, добавляли 100 мкл ацетонитрила. После встряхивания смесь центрифугировали. Полученный супернатант анализировали при помощи ВЭЖХ для определения количества высвободившегося соединения А. Испытания на высвобождение представлены в таблице 3. Были получены три вида различных распределений высвобождения. Пример испытаний 3
Микрокапсулы 3-5, полученные в примере 1, по 25 мг каждая, диспергировали в 0,3 мл диспергирующего раствора (раствора 1,5 мг карбоксиметилцеллюлозы, 0,3 мг полисорбата 20 и 15 мг маннита в дистиллированной воде) и инъецировали подкожно в головы самцов крыс SD (n=5) в возрасте 5 недель при анестезии эфиром при помощи иглы для инъекции 22G. Крыс умерщвляли при заданных интервалах времени после введения. Микрокапсулы, остающиеся в месте введения, вынимали и анализировали ВЭЖХ для определения количества соединения А в микрокапсулах. Результаты представлены в таблице 4. Также и in vivo были получены различные типы распределения высвобождения микрокапсул. В частности, было обнаружено, что микрокапсулы 3 имеют пролонгированное высвобождение в течение 1 месяца, микрокапсулы 4 более 1 месяца и микрокапсулы 5 в течение 3 недель. Пример испытаний 4
При анестезии пентобарбиталом головы самцов крыс SD в возрасте 6 недель надрезали и отделяли надкостницу (периост). Затем делали отверстие диаметром 4 мм в левом своде черепа при помощи стоматологической бормашины. Спустя 1 неделю после наложения швов 25 мг микрокапсул 3, полученных в примере 1, диспергировали в 0,3 мл диспергирующего агента (раствора 1,5 мг карбоксиметилцеллюлозы, 0,3 мг полисорбата 20 и 15 мг маннита в дистиллированной воде) и вводили подкожно в правый висок при помощи иглы для инъекции 22G. Для контроля использовали крыс, получавших 0,3 мл указанного выше раствора диспергирующего агента. Спустя три недели крыс умерщвляли. Свод черепа разрезали и подвергали мягкому рентгенографическому анализу. При помощи полученной фотографии зону новообразованной костной ткани в поврежденном участке кости определяли анализом изображений. Значительное увеличение зоны вновь образованной костной ткани отмечали в группе с введением микрокапсул, что свидетельствует о превосходной остеогенез активирующей способности фармацевтической композиции согласно данному изобретению. Пример испытаний 5
При анестезии пентобарбиталом левые конечности самцов крыс SD (n=8) в возрасте 6 недель надрезали и центральную часть левой малоберцовой кости обнажали и затем разрезали режущим инструментом. 25 мг микрокапсул 1, полученных в примере 1, погружали в участок разреза малоберцовой кости с последующим наложением швов. Спустя две недели крыс убивали. Малоберцовую кость вырезали и анализировали с применением анализатора минерального содержимого костей (DSC-600, Aloca Co., Ltd., Tokyo) для определения минерального содержимого кости. Также определяли минеральное содержимое кости в необработанной правой малоберцовой кости. Измерение для правой малоберцовой кости вычитали из измерения для левой малоберцовой кости для получения содержимого минеральных компонентов в каллусе. Для контроля микрокапсулы плацебо без соединения А готовили по способу, использованному для получения микрокапсул 1, и сравнивали с капсулами, содержащими А так же, как в примере испытаний 4. Эти результаты показаны на фиг.1. Введение содержащих лекарственное средство микрокапсул приводило к значительно повышенному минеральному содержимому кости, демонстрируя превосходную остеогенную активирующую способность фармацевтической композиции согласно данному изобретению. Пример испытаний 6
25 мг микрокапсул 1, содержащих соединение А (относительное содержание 4%), полученных в примере 1, вводили местно модели крыс с переломом малоберцовой кости согласно способу, описанному в примере испытаний 5. После 2 и 3 недель определяли минеральное содержимое кости. Для контроля минеральное содержимое кости определяли в группе, получившей микрокапсулы с плацебо (не содержащие лекарственного средства), и в самопроизвольно выздоравливающей группе. Эти результаты показаны в таблице 5. Было обнаружено, что группа, получавшая микрокапсулы, содержащие лекарственное средство, имела значительно более высокое содержание минеральных веществ в сравнении с контрольными группами, что свидетельствовало о превосходной остеогенной активирующей способности фармацевтической композиции согласно данному изобретению. Пример испытаний 7
Содержащий микрокапсулы препарат в виде таблетки, полученный в примере 3, имплантировали подкожно в спинки самцов крыс SD (n=8) в возрасте 5 недель под анестезией эфиром. Количество лекарственного средства, остающегося в месте введения, определяли при помощи ВЭЖХ во времени. Результаты представлены на фиг.2. Исследуемая таблетка обнаружила свойство пролонгированного действия в течение 6 недель. Пример испытаний 8
В соответствии со способом Miyamoto et al. "Shinpei Miyamoto, Hideki Yoshikava and Kunio Takaoka: The Bone, 7, 85-96 (1983)" большеберцовые кости кроликов (весом 3-4 кг) разрезали с образованием костного повреждения длиной 5 мм, которое затем заполняли введением содержащего микрокапсулы препарата в виде таблетки, полученного в примере 3, и затем рану фиксировали снаружи. Для контроля использовали препарат в виде таблетки, содержащий микрокапсулы с плацебо, которые не содержали соединения А. Мягкий рентгеновский радиографический анализ выявил заживление кости у кроликов, которым вводили таблетку, содержащую соединение А, спустя 2 месяца после хирургии, тогда как у кроликов, получавших таблетку с плацебо, не было замечено заживление. Пример испытаний 9
Микрокапсулы 7, содержащие соединение А (относительное содержание 10%), полученные в примере 4, вводили подкожно в спинки самцов крыс SD (n=5) в возрасте 5 недель под эфирной анестезией согласно способу, описанному в примере испытаний 2 (100 мг/кг веса тела крысы в расчете на соединение А). Концентрацию лекарственного средства в крови определяли при помощи ВЭЖХ во времени. Результаты показаны на фиг.3. Даже при 4 неделях после введения получали концентрацию лекарственного средства в крови 0,05-0,1 мкг/мл. Пример испытаний 10
Крысиную модель перелома малоберцовой кости получали согласно способу, описанному в примере испытаний 5. Этой модели перелома вводили местно микрокапсулы 7, содержащие соединение А (относительное содержание 10%), полученные в примере 4, в форме лиофилизированного порошка (1 мг/крысу) или суспензии в диспергирующем агенте, описанном в примере испытаний 4 (5 мг/0,25 мл на крысу). Спустя две недели определяли минеральное содержимое кости согласно способу, описанному в примере испытаний 5, и сравнивали с контрольной группой, получавшей микрокапсулы плацебо. Результаты представлены в таблице 7. Было обнаружено, что независимо от того, было ли лекарственное средство в форме лиофилизованного порошка или в форме суспензии, группа с микрокапсулами, содержащими лекарственное средство, имела значительно большее содержание минеральных веществ кости в сравнении с контрольными группами, что свидетельствовало о превосходной остеогенной активирующей способности фармацевтической композиции согласно данному изобретению. Пример испытаний 11
Крысиную модель перелома малоберцовой кости получали согласно способу, описанному в примере испытаний 5. Микрокапсулы 7 суспендировали в диспергирующей среде, содержащей различные концентрации фосфата натрия, которую готовили с использованием раствора D-сорбита (2,5 г), хлорида натрия (0,9 г) и карбоксиметилцеллюлозы (0,5 г) в дистиллированной воде. Суспензию вводили локально (5 мг/0,25 мл на крысу). Спустя две недели минеральное содержимое кости определяли согласно способу, описанному в примере испытаний 5. Результаты показаны в таблице 7. Результаты изобретения
Обнаруживая повышенную остеогенез усиливающую активность при низкой токсичности на протяжении продолжительного периода времени, фармацевтическая композиция согласно данному изобретению может безопасно использоваться в качестве профилактического/терапевтического средства для различных заболеваний костей у млекопитающих, например, переломов костей, остеопороза, остеомаляции, синдрома Бехчета кости, анкилозного спондилоартрита, ревматоидного артрита, гонартрита (gonarthritis deformans) и деструкции тканей суставов, в качестве средства восстановления костной ткани после хирургии по поводу множественной миеломы, рака легких, рака молочной железы и т.д. и в качестве активатора регенерации периодонтальной ткани в случае периодонтопатии и т.д. Промышленная применимость
Фармацевтическая композиция, содержащая непептидное остегенное оптически активное вещество и сополимер молочной кислоты/гликолевой кислоты представляет собой ценное средство для лечения и/или предотвращения заболеваний костей.
Формула изобретения
1. Фармацевтическая композиция, содержащая непептидное остеогенез активирующее оптически активное вещество формулы
где R3 представляет низшую алкильную группу;
R4 и R5 независимо представляют низшую алкильную группу или связаны вместе с образованием низшей алкиленовой группы,
и сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты. 2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой R3, R4 и R5 независимо представляют С1-6-алкильную группу. 3. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой соединение представляет собой (2R,4S)-(-)-N-[4-(диэтоксифосфорилметил)фенил]-1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоксамид. 4. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой весовое отношение указанного сополимера к непептидному остеогенез активирующему оптически активному веществу является приблизительно 1-100-кратным. 5. Фармацевтическая композиция по п.2, которая дополнительно содержит фосфорную кислоту или ее соль. 6. Фармацевтическая композиция по п.5, где фосфорная кислота или ее соль представляет собой фосфат натрия. 7. Фармацевтическая композиция по п.2, в которой относительное содержание (2R,4S)-(-)-N-[4-(диэтоксифосфорилметил)фенил]-1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоксамида в расчете на указанный сополимер равно приблизительно 5-30 мас.% и относительное содержание фосфата натрия в расчете на (2R,4S)-(-)-N-[4-(диэтоксифосфорилметил)фенил] -1,2,4,5-тетрагидро-4-метил-7,8-метилендиокси-5-оксо-3-бензотиепин-2-карбоксамид и указанный сополимер равно приблизительно 0,1-20 мас.%. 8. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой отношение молочная кислота/гликолевая кислота равно приблизительно 90/10-50/50 мас.% и средневесовая молекулярная масса равна приблизительно 8000-50000. 9. Фармацевтическая композиция по п.1, представляющая собой суспензию. 10. Фармацевтическая композиция по п.1, используемая для инъекций. 11. Фармацевтическая композиция по п.1 для приготовления средства для лечения или предотвращения заболеваний костей. Приоритет по пунктам:
05.06.1995 по пп. 1-4, 8-11;
04.06.1996 по пп. 5-7.
РИСУНКИ
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6
|
