СПИСОК ПАТЕНТОВ С УПОМИНАНИЕМ ГИАЛУРОНОВОЙ КИСЛОТЫ
-
- 2017751 Способ получения гиалурона
- 2192150 БАД для профилактики йодной недостаточности
- 2112542 Препарат для лечения патологий соединительных тканей
- 2225206 Препарат для лечения рака молочной железы
- 2299733 Лечение опорно-двигательного аппарата
- 2299732 Способ лечения глаукомы
- 2299726 Противоинфекционная губная помада
- 2299725 Косметическое средство для ухода за кожей
- 2198878 Ароматическое соединение
- 2198702 Способ подготовки трофических язв к аутодермапластике
- 2198653 Вагинальные суппозитории
- 2197946 Композиция для ухода за волосами
- 2197923 Фармацевтическая композиция для лечения отеков роговицы
- 2298410 Биотрансплантант и способ лечения ревматических и аутоиммунных заболеваний
- 2197501 Фотоотверженный гель на основе сшитой гиалуроновой кислоты
- 2197228 Твердые лекарственные формы
- 2197222 Водная компазиция для ухода за волосами, лица и тела
- 2297425 Полипептиды
- 2297240 Композиция с гиалуроновой кислотой
- 2297230 Фармацевтическая компазиция с ксантоновой смолой
- 2196588 Глазные капли
- 2195955 Применение биологически активных веществ
- 2195926 Дерматологические композиции
- 2295954 Микрочастицы для доставки нуклеиновых кислот
- 2295951 Косметика для ухода за кожей лица и век
- 2195262 Фармакологическое средство на основе гиалуроновой кислоты
- 2194512 Способ профилактики и коррекции процесса старения кожи
- 2194478 Лечение экземы
- 2294716 Расширяемый стент
- 2194055 Сшитые сополимеры
- 2099350 Ассоциаты депротонированной гиалуроновой кислоты
- 2293557 Средство для лечения кожи и слизистых
- 2292878 Приготовление микроцастиц, содержащих метопропол
- 2292746 БАД
- 2192256 Защита кишечника
- 2191782 Получение модифицированной гиалуроновой кислоты
- 2292219 Паратиреоидный гормон человека
- 2291686 Микроцастицы
- 2191000 Косметическая маска
- 2290921 Фармацевтические и косметические средства против старения кожи
- 2290900 Модифицированный биоматериал для использования в офтальмологии
- 2290899 Получение биоматерьяла
- 2290397 Новые инданилиденовые соединения
- 2290186 Лечение сирингомиелии
- 2288702 Иррингационный раствор для офтальмологии
- 2288699 Гель для лечения стоматологических заболеваний
- 2188011 Активирующая остеогенез фармацевтическая композиция
- 2187327 Средство с антисептиком
- 2187325 Средство с радиопротекторным действием
- 2287330 Композиции миноксидила
- 2186786 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2186593 Лечение раненого процесса кожи
- 2286801 Очищение воды
- 2286781 Лечение ожогов пищевода у детей
- 2286764 Средство лечения воспалений полости рта
- 2185840 Лечение инфекционных заболеваний
- 2286151 Альфа-2-Дельта-Лиганда
- 2185149 Ранозаживляющий гель
- 2285527 Лечение ИЛ-6 заболеваний
- 2184448 Раствор хранения роговицы, включающий гиалуроновую кислоту
- 2090179 Крем для кожи
- 2183961 Способ лечения кожи
- 2284331 Соли алифотических аминов
- 2284187 Производные амида
- 2089191 Снизить внутрение давление
- 2283320 Получение гликозаминогликанов
- 2283129 Лечение опухолей
- 2283098 Косметические средства с Q
- 2182574 Ароматические соединения
- 2088257 Средство с гипохолестеролемическим действием
- 2088218 Состав для гигиенических салфеток
- 2088206 Способ получения препарата, создающего исскуственный загар
- 2282462 Противомикробные средства
- 2182008 Интровагинальная компазиция
- 2181999 Препарат с отсроченным высвобождением
- 2181998 Новые композиции липидов
- 2181995 Лечение болевого синдрома
- 2181295 Вирионная вакцина
- 2087144 Витамин Е
- 2379336 Способ стирки
- 2379052 Вакцинация
- 2180855Композиция в виде ионного комплекса
- 2379025 Противоинфекционный гель
- 2180825 Лечение травм роговицы
- 2281082 Способ коррекции эстетических и возрастных проблем кожи
- 2180576 Биоактивная добавка для косметических средств
- 2280459 Средство для изменения скорости роста или репродукции клеток
- 2179981 Соли переходного металла
- 2378010 Жидкие вакцины
- 2378008 Комбинированные вакцины
- 2378007 Анаболическое средство
- 2377973 Растительные экстракты
- 2280041 Способ получения водорастворимых комплексов гиалурил
- 2280038 Биополимеры
- 2323733 Йодный обмен
- 2377260 Гель
- 2178693 Противовирусное средство на основе гиалуроновой кислоты
- 2178692 Облегчающие зуд косметическое средство
- 2377022 Гемостатические спреи
- 2376982 Увлажняющая сыворотка для лица
- 2376974 Трансдермальный гель для лица
- 2362784 Гипо-и гиперацетилированные менингокковые капсульные сахариды
- 2177789 Устройство для доставки лекарства к шейке матки
- 2277954 Крем для лица омолаживающий
- 2376378 Способ получения метионина
- 2177332 Биоматериал для предотвращения послеоперационных спаек, с производной гиалуроновой кислотой
- 2177310 Способ получения таблеток
- 2376011 Средство для позвоночника
- 2277410 Косметическое средство
- 2323748 Медицинская повязка
- 2276998 Гидрогелевые композиции
- 2082416 Способ получения препарата с коллагенном из животного сырья
- 2375081 Адсорбирующее изделие
- 2375049 Охлаждающий пластырь
- 2346049 Способ получения гиалурона
- 2275913 Фармацевтические средства
- 2174985 Полисахарид с антиоксидантом
- 2373957 Носитель для лекарственных средств и биологически активных веществ
- 2373941 Способ коррекции возрастных и патологических изменений кожных покров
- 2174845 Композиции и способы доставки генетического материала
- 2174830 Средство для укрепления волос
- 2373769 Синбиотическая композиция
- 2274472 Лечение апорно-двигательного аппарата и болевых синдромов
- 2372929 Профилактическая композиция на основе веществ фенольной природы в липосомной форме
- 2173563 Способ нанесения на поверхность предметов покрытия на основе гиалуроновой кислоты, её производных и полусинтетических полимеров
- 2079304 фармацевтическая композиция, обладающая иммуносупрессорной и антимикробной активностью
- 2273645 Полипептид ожирения
- 2173154 Фракция кератансульфатолигосахаридов и содержащий ее фармацевтический препарат
- 2173136 Грязная мазь
- 2173128 Способ хирургического лечения центральных разрывов сечатки
- 2078561 Косметическое средство предотвращающее старение кожи
- 2172490 Способ прогнозирования воспалительных заболеваний молочной железы при эндопластике
- 2272645 Способ лечения ЦМВ-Инфекции у детей раннего возроста
- 2272636 Фармацевтическая композиция для местного лечения воспаления
- 2272635 Фармацевтически активная субстанция для офтальмологии
- 2272599 Биоматерьял для стабилизации прогрессирующей миопии "Коллаплант"
- 2172168 Средство для заживления ран на основе гиалуроновой кислоты
- 2371172 Фармацевтическая композиция для лечения нервной системы на основе стефаглабрина
- 2171470 Способ прогнозирования послеоперационной трансформации доброкачественных опухолей нервной системы
- 2077317 Состав для ванн
- 2271213 Комбинированные композиции, содержащие экстракты из растений и морских животных
- 2076872 Способ получения окрашенной гиалуроновой кислоты
- 2076671 Раствор для защиты роговицы
- 2370281 Конъюгаты гидроксиалкилкрахмал
- 2370275 Способ лечения (коррекции) косметических и возрастных дефектов кожи
- 2370258 Фармацевтическая композиция для парентальной доставки в форме лиофилизата
- 2270023 Способ экстракции и очистки протеогликана хрящего типа (варианты)
- 2369408 Гемостатическая композиция, включающая гиалуроновую кислоту
- 2369387 Фармацевтическая композиция для лечения нервной системы
- 2369379 Нетаблитированные жевательные формы для индивидуального введения
- 2169136 Производное коричной кислоты
- 70792 Медицинский аппликатор
- 20741717 Способ стабилизации аскорбиновой кислоты
- 2074712 Способ получения препарата, препятствующего преждевременной эякуляции
- 2367954 Способ прогнозирования развития кожной патологии у женщин с синдромом склерополикистозных яичников (СПКЯ)
- 2268075 Устройство для электрокинетической доставки
- 2268052 Средство для лечения воспалительных и дегенеративных заболеваний суставов
- 2167649 Способ получения твердой дисперсии умеренного водорастворимого лекарственного вещества
- 2167647 Гель для бритья
- 2073520 Лечение урологических инфекций
- 2367476 Биопластический материал
- 2367475 Мембрана для использования при направленной регенерации тканей
- 2367469 Фармацевтическая композиция на основе лизоамидазы
- 2367456 Фармацевтическая композиция обладающая антибактериальным и некролитическим действием
- 2367455 Фармацевтическая композиция обладающая некролитическим и антибактериальным действием
- 2267324 Применение антиадгезивных углеводов, препарат для уменьшения и /или блокирования адгезии патогенных веществ
- 2166934 Композиции включающие биологический агент
- 2166510 Псевдодипептиды
- 2366460 Композиции, имеющие высокую противовирусную и антибактериальную активность
- 2360901 Производные феноксиуксусной кислоты
- 2165749 Способ восстановления эндотелия роговицы
- 2265441 Способ укрепления склеры
- 2365382 Композиции и способы для регуляции развития сосудов
- 2070879 Соли гликозаминогликанов
- 2164914 Циклические и гетероциклические N - замещенные - иминогидроксамовые карбоновые кислоты
- 2264627 Хламидийный конъюктивит
- 2364399 Фармацевтический препарат на основе стефаглабрина
- 2264230 Препарат с замедленным высвобождением активного вещества
- 2363497 Фармацевтические композиции
- 2363496 Способ увеличения объема мягких тканей
- 2363473 Способ антифлогистической активации в эксперементе
- 2363461 Фармацевтический препарат на основе сигетина
- 2363459 Средства для введения в роговицу глаз для предотвращения офтальмологических нарушений
- 2363448 Фармацевтические композиции
- 2163123 Глазные капли
- 2162687 Усовершенствованнная лекарственная форма индуктора интерферана
- 2162343 Биосовместимый полимерный материал и способ его получения
- 2162327 Лечение рака
- 2067841 Способ получения ароматизатора
- 2161478 Способ консервированого лечения гонартроза
- 2361617 Вольфрамовые частицы в качестве рентгеноконтрастных веществ
- 2361552 Способы и устройства для дренирования жидкостей и понижения внутриглазного давления
- 2066996 Способ изготовления пленочного материала для офтальмохирургии
- 2361417 Корм с глюкозамином и экстрактом ивы для профилактики артроза у животных
- 2161002 Пищевой общеукрепляющий лечебно-профилактический продукт из хрящевой ткани акул
- 2360928 Комплексная матрица для медико-биологического применения
- 2160574 Способ лечения глаукомы
- 2360688 Способ лечения повреждений переферических нервов
- 2360670 Фармацевтическая композиция при климактерических расстройствах
- 2360646 Эндолюминальный протез
- 2260445 Способ усовершенствования транспортировки через легко прспосабливаемый полупроницаемый барьер
- 2260007 Производные амида
- 2359975 Способ получения модифицированных арабиногалактанов
- 2359974 Антигенные Пептиды
- 2159775 Псевдопептидный продукт
- 2259833 Фармацевтическая композиция для лечения роговицы глаза
- 2259816 Ранозаживляющее средство
- 2259815 Способ коррекции возрастных изменений, связанных с процессами старения кожи
- 2359706 Способ сохранения офтальмологических растворов
- 2359704 Антисептическое средство
- 2359662 Микрокапсулы
- 2159253 Катионные полимеры
- 2159111 Средство для ухода за кожей лица
- 2159105 Композиция для защиты кожи от опасных химических веществ Получение
- 2158593 Биосовместимый водный раствор
- 2358728 Способ лечения и предупреждения потери костной ткани
- 2258517 Способ хирургического лечения травмотических повреждений селезенки пленкой на основе гиалуроновой кислоты
- 2357968 Кристалические формы производной имидазола
- 2357957 Ингибиторы P38 и их применение
- 2157647 Пищевая добавка и ее получение
- 2357758 Препараты для чрескожной и чересслизистой добавки
- 2063244 Способ стабилизации растворов
- 2063140 Способ получения препарата для консервирования мяса
- 2157381 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2257198 Композиции микроцастиц
- 2356909 Белковый комплекс
- 2356570 Косметическая композиция
- 2256434 Способ закрытия перфорации барабанной перепонки
- 2356520 Способ лечения постконтузионного повреждения сечатки глаза
- 2156133 Гель
- 2255945 Полимерная композиция
- 2355761 Средства повторной дифференцировки
- 2061043 Способ повышения устойчивости урокиназы к нагреванию
- 2061005 Способ получения красителей для гистологических исследований
- 2355420 Зубная паста
- 2355385 Композиции пролонгированного действия с контролируемым высвобождением
- 2355240 Способ получения пищевого препарата хондропротекторного действия
- 2155057 Пихтово репейный бальзам
- 2354409 Способ производства высвобождающих лекарственные средчтва медицинских устройств
- 2254145 Раневое покрытие на основе коллаген-хитозанового комплекса
- 2254133 Лечение и профилактика ВИЧ-инфекции у человека
- 2253439 Фармацевтическая композиция для защиты и улучшения оптических свойств роговици при проведении эндовитреальных вмешательств
- 2253437 Способ омоложения кожи
- 2153352 Фармацевтическая композиция обладающая ранозаживляющим и противовоспалительным действием
- 2353354 Фармацевтический препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2252787 Способ получения искусственной матрицы кожи
- 2252767 Способ нормализации иммунобиохимического гомеостаза коров в предродовом и послеродовом периодах
- 2352583 Фармацевтическая композиция содержащая Fc-область иммуноглобулина в качестве носителя
- 2152403 Модифицированные полисахариды
- 2352356 Иммуногенная композиция
- 2352342 Исскусственный физиологический солевый раствор Способ его получения
- 2352330 Фармацевтический препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2352323 Фармацевтический препарат с модифицированным высвобождением
- 2152027 Способ подготовки ткани мозга для определения гликозаминогликанов
- 2251842 Интектицидный состав для борьбы с личинками оводов
- 2151580 Способ активации пролиферации эндотелия роговицы
- 2351648 Дифференцировка стромальных клеток, полученных из жировой ткани, в эндокринные клетки поджелудочной железы и их использование
- 2351595 N - гидроксиформамидные соединения в качестве ингибиторов металлопротеина
- 2251411 Косметическое средство в лиофилизированной фармацевтической форме
- 2251405 Косметика...ее композиции для косметических препаратов
- 2251367 Средство со сшитой гиалуроновой кислотой для наращивания тканей
- 2351359 Косметика для профилактики и лечения избыточной массы тела
- 2351322 Препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2351153 Диета при остеортрите собак
- 2350958 Способ определения групповой принадлежности синовальной жидкости
- 2350625 Производные гиалуроновой кислоты с пониженной биодеградируемостью
- 2150266 Крем после бритья
- 2350354 Фармацевтическое средство содержащие антагонист и фактор некроза
- 2350340 Способ коррекции процессов регенерации
- 2350309 Способ лечения избыточной массы тела с помощью рефлексотерапии
- 2250047 Профилактический продукт из хрящевой ткани гидробионтов
- 2249467 Медицинский матерьял и изделия на его основе
- 2055079 Способ получения препарата гиалуроновой кислоты
- 2349599 Биоадгезив мидии
- 2054903 Способ лечения коллагеноза у бычков на откорме
- 2249210 Способ прогнозирования предрасположенности к развитию и тяжести течения деформирующего остеоартроза коленного сустава у взрослых
- 2349339 Средство для соединительной ткани
- 2148988 Человеческий интерферона
- 2148399 Лечение атеросклероза
- 2148396 Способ определения активного вещества в дифильных мазевых основах
- 2148375 Способ диагностики близорукости
- 2348415 Способ противоспаечной терапии после хирургического вмешательства
- 2348400 Препарат на основе низкомолекулярного индуктора интерферона
- 2348386 Способ непроникающего хирургического лечения первичной открытоугольной глаукомы
- 2248213 Лечение Галактозидальной А недостаточности
- 2347586 Микрофлюидизированные эмульсии типа "масло в воде" и вакцинные средства
- 2147243 Контрастное средство
- 2146526 Лечебный препарат дисбактериоза и урогенитальных инфекций
- 2146148 Терапевтическое применение фактора роста кератиноцитов (ФРК)
- 2146139 Способ повышения активности макрофагов и комбинации для его осуществления
- 2346277 Способ диагностики специфического синовита
- 2345793 Ультразвуковые контрастные вещества и их получение
- 2345782 Терапевтические комбинации на основе PORIFERA для лечения и предотвращения кожных заболеваний
- 2245131 Способ коррекции косметических недостатков кожи
- 2245130 Способ активации восстановительных процессов в коже
- 2144833 Хондроитиназа
- 2344809 Получение твердых дозированных форм с использованием сшитого нетермопластичного носителя
- 2244540 Косметический гель для ухода за кожей лица
- 2244536 Способ лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний тазобедренного сустава
- 2344167 Хмелевый экстракт
- 2143884 Агент регулирования дифференциации клеток кожи, культурная среда для клеток или тканей и способ регулирования дифференциации клеток кожи
- 2343932 Способ получения обладающих пониженной растворимостью в воде пленночных материалов
- 2343903 Устройство доставки лекарств для контролируемого введения препаратов
- 2048817 Способ получения материала для лечения ожогов и гнойно - некронических ран
- 2048803 Гидратантный крем
- 2242974 Средства и способы лечения воспалительных заболнваний
- 2142816 Способ получения антигерпетической вакцины
- 2342923 Средство для обработки рук с увлажняющим эффектом
- 2142781 Косметика для макияжа ресниц и бровей и агент ингирирующий рост микроорганизмов в косметических средствах
- 2242251 Трансплантируемые стенты с биоактивными покрытиями
- 2142257 Способ обработки глазных имплантантов и контакных линз
- 2342389 Мононатриевая соль
- 2342107 Способ устранения западения верхнего века при анофтальме
- 2141828 Средство, пролонгирующее эффективность чесночного порошка
- 2241489 Косметическое средство матриксных протеинов для залечивания ран
- 2241443 Средство для лечения герпеса
- 2241414 Способ получения протезов кровеносных сосудов
- 2341539 Гидрогель
- 2141324 Регулятор скорости воздействия препарата для инъекций
- 2141312 Косметическое средство для ухода за кожей лица
- 2341296 Средства и способы покрытия медицинских имплантантов
- 2341272 Средство для неспецифической иммунотерапии
- 2341266 Стенты с нанесенным покрытием содержащим N - (5-(4-(4-
- 2341257 Иммуномодулирующее средство
- 2341255 Средство для лечения климактерических расстройств
- 2240821 Способ лечения урологических инфекций
- 2140786 Способ лечения лишая
- 2140243 Способ хирургического лечения диабетической ретинопатии и отслоек сечатной оболочки
- 2240140 Медицинская многослойная повязка и изделия на ее основе
- 2240135 Культура клеток, содержащая клетки - предшественники остеонегеза, имплантант на ее основе и его использование для восстановления целостности кости
- 2240123 Экзогенные биологически активные коньюгирующие вещества
- 2139886 Фотоотвержаемое производное гликозаминогликата, сшитое производное гликозаминогликата и способы их получения, способ предотвращения клеточной и тканевой адгезии
- 2139729 Вакцина. Способ стимулирования иммунной системы
- 2339386 Средство обладающее радио - и химиозащитным действием
- 2339369 Лечение офтальмологических нарушений с использованием мочевины и ее производных
- 2139041 Гидратантный регенерирующий крем и способ его получения
- 2139039 Косметический суперкрем для ухода за кожей
- 2139017 Способ получения боисовместимого материала
- 2138503 Производные камптотецина, способы их получения, уникальное средство
- 2338556 Средство содержащие антагонист Р2Х - рецептора и нестероидное противоспалительное лекарственное средство
- 2338514 Косметическое средство для профилактики старения кожи
- 2138297 Медицинские устройства, подверженные вызываемому разложению
- 2138295 Покрытие для ран
- 2337906 Ингибиторы цитозольной фосфолипазы А2 Применение физиологически допустимого корпускулярного ферримагнитного или ферромагнитного материала. Способ формирования магнитометрического изображения
- 2137501 Устройство формирования изображения
- 2137477 Способ лечения заболеваний характеризующихся аутоиммунной агрессией
- 2137467 Крем для кожи лица и тела
- 2137449 Способ коррекции дефектов преломления в глазу млекопитающего
- 2137402 Пищевая Добавка БАД
- 2336899 Способ стимуляции миелопоэза
- 2336862 Способ получения раствора для лечения роговицы
- 2336830 Способ восстановления костных структур челюсти
- 2136696 Новый полипептид и средство против ВИЧ - Инфекции
- 2336092 Биоадгезивное средство, по существу свободное от воды
- 2336089 Средство и способ лечения заболеваний периодонтальных и пульпы
- 2336074 Средства и способы лечения заднего сегмента глаза
- 2235548 Ранозаживляющее средство
- 2135186 Способ лечения рефлекторных синдромов при остеохондрозе
- 2234945 Стабилизатор водного раствора и водосодержащего сырья
- 2334762 Растворимая ассоциативная карбоксиметилцеллюлоза
- 2234514 Макропористые хитозановые гранулы и способ их получения. Способ культивирования клеток
- 2133615 Средство для лечения неврологических заболеваний
- 2233164 Способ профилактики развития послеоперационных спаек брюшной полости
- 2133127 Неткатный материал, способ его получения и способ лечения
- 2333223 Альдегидные производные сиаловой кислоты и средства на их основе
- 2333007 Полипептидные вакцины для широкой защиты против рядов поколений менингококов с повышенной вирулентностью
- 2332985 Дозированные формы анестезирующих средств с длительным высвобождением для обезболивания
- 2132677 Косметическая маска
- 38603 Пленочный аппликатор
- 2232594 Средство содержащие ингибирующие остеокластогенез фактор и полисахарид
- 2332238 Средство для прокладок, раневых повязок и других изделий, контактирующих с кожей
- 2331668 Стромальные клетки, получение из жировой ткани, для заживления дефектов роговицы и внутриглазных дефектов и их использование
- 2331438 Альфа - 2 - Дельта Лигант для лечения симптомов нижних мочевыводящих путей
- 2331411Электропряденые аморфные фармоцевтические средства
- 2331367 Способ профилактики образования спаек и их рецидива
- 2130767 Масло в воде для получения косметических и дерматологических средств, способ косметической обработки
- 2230752 Поперечносшитые гиалуроновые кислоты и их применение в медицине
- 2230558 Способ восстановления и сохранения здоровья скмьи
- 2230550 Средства длительного высвобождения, способ их получения и применения
- 2230458 Поддержания здоровья суставов
- 2330290 Способ определения состояния метаболических процессов в ткани суставного хряща
- 2230073 Способ поперечного сшивания карбоксилированных полисахаридов
- 2329059 Способ лечения полипозного риносинусита
- 2329037 Комбинированная терапия для лечения иммуновоспалительных заболеваний
- 2128666 Гиалуроновая кислота и ее соли, способ очистки гиалуроновой кислоты, способ получения гиалуроновой кислоты. Фармацевтический препарат с гиалуроновой кислотой и средства с гиалуроновой кислотой используемые в офтальмологии
- 2328740 Способ экспресс - оценки действия зубных паст
- 2128502 Косметический гель
- 2328272 Суппозитории индуктора интерферона
- 2328268 Косметика содержащая амфолитный сополимер
- 2128057 Композиционная мембрана, способ ее получения и способ направленной регенерации тканей с ее применением
- 2128055 Средство замедленного освобождения и способ его получения
- 2128049 Свечи
- 2227743 Полипептидные варианты с повышенной гепаринсвязывающей способностью
- 2326893 Ковалентное и нековалентное сшивание гидрофильных полимеров
- 2326697 Новый перевязочный материал для быстрого заживления раневой поверхности кожи
- 2126264 Фармацевтическое средство с гиалуроновой кислотой
- 2326137 Способ получения содержащих альгинат пористых формованных изделий
- 2325902 Способ выделения гликозаминогликанов из минерализованной соединительной ткани
- 2225195 Репелленты против насекомых
- 2325193 Сосудистый стент
- 2325184 Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий
- 2325153 Многокомпонентная фармацевтическая дозированная форма
- 2325152 Удерживаемая в желудке система регулируемой доставки лекарственного средства
- 2029955 Способ предоперационного определения помутнения задней капсулы хрусталика при экстракции катаракты
- 2324688 Производные бисбензизоселеназолонила с противоопухолевым, противовоспалительным и антитромбоническим действием
- 2323017 Устройство и способ контролируемый доставки активных веществ в кожу
- 2323011 Содержащий Коллаген I и Коллаген II способный к рассасыванию внеклеточный матрикс, предназначенный для реконструирования хряща
- 2322955 Способ изготовления имплантанта для пластики дефектов хрящевой ткани
- 2322454 Антитело против CCR5
- 2322263 Система продолжительного высвобождения растворимого лекарственного средства
- 2221561 Витамин Е и его сложные эфиры
- 2321634 Гены участвующие в метаболизме углерода и продуцировании энергии
- 2321597 Биоматерьял, способ его приготовления и его применение, медицинское средство, имплантант и вкладыш
- 2121340 Средство для похудения
- 2220737 Средство для улучшения состояния опорно-двигательного аппарата
- 2220729 Гель используемый в стоматологии
- 2320720 Способ культивирования фибропластов для заместительной терапии
- 2320378 Накожный аппликатор
- 2320369 Средства, содержащие Альфа - 2 - Дельта Лиганды и ингибиторы обратного захвата серотонина/норадреналина
- 2320362 Местные фармацевтические средства, содержащие проантоцианидины, для лечения дерматитов
- 2320322 Биоадгезивная доставка лекарств
- 2320318 Чувствительное к температуре изменяющие состояние средство гидрогеля
- 2025120 Способ получения препарата, содержащего Фактор /G-CSF/, стимулирующий рост колоний гранулоцитов
- 2319490 Средство для введения железа при лечении синдрома беспокойных ног
- 25995 Содержащее адгезив приспособление для фиксации зубных протезов в полости рта
- 2218907 Средство для ухода за кожей лица и веками
- 2318830 Способ получения модифицированного дерматансульфата
- 2118153 Косметика - туш для ресниц
- 2217441 Способ получения полимера
- 2317296 Изетионатная соль селективного ингибитора CDK4
- 2217171 Мембрана для использования при направленной регенерации тканей
- 2317095 Экстракты ECHINACEA ANGUSTIFOLIA
- 2216332 Препарат для лечения астроза
- 2216314 Крем - маска для обезвоженной кожи
- 2316333 Средство оздоровительно-восстановительных косметических панто-магниевых ванн
- 2021304 Способ получения биологически активного средства
- 2115662 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2315627 Впрыскиваемые имплантанты на керамической основе для заполнения морщин, кожных впадин, шрамов
- 2315623 Средство получаемое путем лиофилизации препарата
- 2114862 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2314791 Лечебно-Косметическое средство
- 2314791 Косметический крем-бальзам для ухода за кожей лица и шеи
- 2214600 Способ оценки эффективности лечения неврологических проявлений
- 2114602 Способ косметической обработки
- 2114587 Раствор для защиты роговицы
- 2214283 Имплантант для подкожного или внутрикожного введения
- 2313370 Медицинские протезы, имеющие улучшенную биологическую совместимость
- 2313356 Препарат для лечения демодекоза
- 2313338 Средство на основе этиллинолеата и триэтилцитрата для лечения себореи и угрей
- 2313328 Косметика содержащая тонкодисперный и пористый порошок
- 2212880 Способ получения препарата содержащего антибиотик, с замедленным высвобождением активного вещества
- 2312640 Способ лечения Блефароконьюнктивальной формы синдрома сухого глаза
- 2017751 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2312145 Гены CORYNEBACTERIUM GLUTAMICUM, кодирующие белки, участвующие в синтезе мембран и мембранном транспорте
- 2311458 Белки вызывающие измененную иммуногенную реакцию. Способ их получения и использования
- 2311183 Улучшенное разделение с использованием гталуроновой кислоты
- 2311177 Ингибиторы интегрина для лечения заболевания глаз
- 2300069 Косметическая маска
- 2211024 Уход за сухой кожей
- 2310440 Раствор для защиты роговицы от повреждений
- 2309684 Лечение межфалангового остеоатроза узелковой формы
- 2309406 Способ мониторинга фиброза печени у больных хроническим гепатитом с (ХГС)
- 2209088 Опосредованная рецепторами доставка генов с использованием векторов на основе бактериофагов
- 2308967 Уменьшение объема ткани
- 2308962 Средство для опорно-дигательного аппарата
- 2308957 Способ получения препарата для мезотерапии
- 2308954 Средство для лечения ран, содержащее плазму или сыворотку крови
- 2308951 Комплексный способ профилактики вагинальных дисбактериозов
- 2308937 Косметическая биологически активная добавка и косметический литофитокомплекс на ее основе
- 2208638 ДНК (варианты), способ получения белка
- 2207885 Способ подачи небольшого объема лечебного раствора к целевому месту
- 2207858 Лишенные побочных эффектов производные простагландинов для лечения глаукомы
- 2207845 Твердая лекарственная форма пролонгированного действия
- 2207844 Препарат для местного неинвазивного применения
- 2207841 Средства с антиферментативным действием
- 2306335 Стволовые клетки и решетки полученные из жировой ткани
- 2306140 Новые рецепторы для Helicobacter pylori и их применение
- 2205612 Способ эндотелизации IN VITRO протезов кровеносных сосудов
- 2105540 Депигментирующее средство
- 2304960 Косметическое средство для кожи
- 2304616 Гены участвующие в гомеостазе и адаптации
- 2204550Способ получения длинноцепочечной N-Ацилированной кислотой Аминокислот
- 2204415 Способ получения изображения
- 2204394 Средство для лечения грибковых инфекций, желудочных язв
- 2204366 Способ хирургического лечения глаукомы
- 2104034 Вагинальное увлажняющие средство, способ его получения
- 2303991 Биологически активная добавка
- 2303990 БАД
- 2303973 Адсорбирующее изделие
- 2203676 Средство обладающее иммунокорригирующим действием
- 2203672 Способ предупреждения беременности
- 2303635 Гены кодирующие белки резистентности и толерантности к стрессам
- 2303529 Способ фиксации альгинатного геля на твердой фазе, способ получения клеточного чипа на его основе
- 2203078 Способ лечения гнойных ран
- 2302412 Гидразоно-малонитрилы
- 2102400 Способ получения гиалуроновой кислоты
- 2202356 Способ стимуляции репаративных процессов длительно незаживающих ран и трофических язв
- 2202336 Средство для ухода за кожей
- 2302231 Глазные капли
- 2102082 Способ магнитометрического исследования тела человека или животного
- 2301814 Полиакриламидный гидрогель
- 2201765 Гибридные матричные имплантанты и эксплантанты
- 2301677 Биотрансплантант для лечения дегенеративных и трвматических заболеваний хрящевой ткани и способ его получения
- 2301676 Способ лечения ревматизма
- 2301674 Способ лечения больных с переломами нижней челюсти
- 2301661 Средство с регулируемым освобождением и способ его получения
- 2005488 Средство для лечения болезней соединительной ткани
- 2200001 Крем для кожи
|
РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
|
Патент №2173563 |
(54) СПОСОБ НАНЕСЕНИЯ НА ПОВЕРХНОСТЬ ПРЕДМЕТОВ ПОКРЫТИЯ НА ОСНОВЕ ГИАЛУРОНОВОЙ КИСЛОТЫ, ЕЕ ПРОИЗВОДНЫХ И ПОЛУСИНТЕТИЧЕСКИХ ПОЛИМЕРОВ
(57) Реферат:
Изобретение относится к способам нанесения на поверхность предметов покрытия на основе гиалуроновой кислоты, ее производных или других природных или полусинтетических полимеров для применения в области хирургии, охраны здоровья и диагностики. Способы позволяют соединить такие полимеры стабильно с поверхностью предметов, изготовленных из разнообразных материалов. Обработанные в соответствии со способами поверхности характеризуются высокой степенью смачиваемости и способны ингибировать адгезию клеток или бактерий, находящихся в биологических жидкостях. Изобретение заключается в способе нанесения на поверхность предмета покрытия на основе гиалуроновой кислоты или ее производного. Способ включает взаимодействие гиалуроновой кислоты или ее производного с алкоксисилановым агентом сочетания в водной среде или в органическом растворителе в присутствии конденсирующего или бифункционального агента с получением раствора, содержащего продукт реакции гиалуроновой кислоты или ее производного и алкоксисиланового агента сочетания, обработку поверхности предмета плазмой, нанесение на обработанную поверхность указанного раствора, содержащего продукт реакции гиалуроновой кислоты или ее производного и алкоксисиланового агента сочетания, удаление раствора с поверхности указанного предмета, тогда как указанный продукт реакции гиалуроновой кислоты или ее производного и алкоксисиланового агента сочетания реагирует с указанной поверхностью предмета. 4 с. и 30 з.п. ф-лы, 2 табл., 7 ил. Изобретение относится к способам покрытия внешних поверхностей предметов гиалуроновой кислотой и ее производными или другими природными или полусинтетическими полимерами, может быть применено в области хирургии, медико-санитарной помощи и в диагностике. Согласно такому способу можно соединить полимер стабильно с поверхностями предметов, изготовленных из широкого круга материалов. Поверхности, обработанные способами, описанными в данном изобретении, характеризуются высокой смачиваемостью и скольжением в водной среде и улучшенными свойствами при взаимодействии с биологическими фазами. Например, они способны ингибировать адгезию клеток или бактерий, присутствующих в биологических жидкостях. Гиалуроновая кислота является природным мукополисахаридом, присутствующим в различных концентрациях практически во всех тканях. Как известно любому специалисту, водные растворы гиалуроновой кислоты или ее солей, или производных, или вообще полисахаридов характеризуются значительной вязкостью, скольжением и способностью снижать трение, свойством, которое определяет наличие и функцию полисахаридов, относящихся к тому же семейству, что и гиалуроновая кислота, в организмах людей и животных (Michels R.G. et a1. Sodium hualuronate in anterior and posterior segment surgery. Physicochemical of Hyaluronic Acid, 1-15, 1989). Благодаря этим качествам полисахариды, относящиеся к тому же семейству, что и гиалуроновая кислота (природные полисахариды и полисахариды, полученные химическим синтезом из природных соединений), были подробно изучены. В частности, значительные усилия были затрачены на идентификацию методов, при помощи которых тонкие слои гиалуроновой кислоты (eвропейский патент N 0138572) или ее производных (патент США N 4851521) могут быть закреплены на поверхности других материалов. Цель этого исследования состояла в получении предметов с улучшенными поверхностными свойствами при сохранении всех характеристик материала, из которого они изготовлены (этот материал далее будет называться субстратом). В частности, благодаря высокой степени гидрофильности гиалуроновая кислота и ее производные особенно пригодны для изготовления предметов, чье использование требует, чтобы их поверхности были стойкими к адгезии к клеткам, находящимся в тканях или биологических жидкостях. Такие поверхности представляют особый интерес в областях, где адгезия между материалом и клетками может причинить вред биологическим тканям (Kaufman Н.Е. et al.- Science, 189, 525, 1977). Модификация поверхностей материалов гиалуроновой кислоты или ее производными оказалась затруднительной для многих исследователей. Одним из первых свойств, которые бросаются в глаза, является то, что растворы гиалуроновой кислоты имеют довольно большое поверхностное натяжение, равное или немного меньшее соответствующей величины для воды (F.Н. Silver et al. Journal of Applied Biomaterials, 5, 89, 1994). Хорошо известно, что для получения равномерного покрытия нанесением раствора наносимый материал должен иметь поверхностное натяжение, которое меньше поверхностного натяжения субстрата, чтобы покрытие было целым и ровным. Более того, почти все полимерные материалы, которые можно использовать в качестве субстратов, обладают поверхностным натяжением, которое меньше, чем у воды, свойством, которое препятствует образованию тонкого слоя гиалуроновой кислоты, равномерно покрывающего субстрат (Garbassi F. et al, Polimer Surfaces, from Physics to Technology, Wiley, Chichester, 304, 1994). Следует отметить, что гиалуроновая кислота растворяется в воде, поэтому любые предметы, полученные путем покрытия их слоем раствора гиалуроновой кислоты, мгновенно теряют это покрытие при контакте с водными растворами, включая биологические жидкости. Производные гиалуроновой кислоты, даже те, которые не растворяются в воде, в любом случае являются чрезвычайно гидрофильными и сильно склонны разбухать в присутствии воды или водных растворов (Н. N. Joshi and Е.М. Topp, International J. of Pharm. 80 (1992) 213-225). В водных средах это свойство быстро вызывает ухудшение гидрофильного поверхностного слоя, нанесенного на субстрат просто путем использования раствора. По этим причинам исследовались методы, использующие химическую связь между поверхностью субстрата и гиалуроновой кислотой или ее производными. Наличие стабильной химической связи предотвращает растворение поверхностного слоя и придает прочность и долговременность поверхности предмета. Реализация химической связи между субстратом и поверхностным слоем требует наличия у обоих подходящих химических групп. В то время как химическая структура гиалуроновой кислоты обеспечивает наличие различных подходящих функций, поверхность большинства синтетических материалов не особенно подходит для этого типа реакции. По этой причине способы создания химической связи между поверхностным слоем гиалуроновой кислоты или ее производных и синтетическим субстратом обычно состоят из двух стадий. На первой стадии в поверхность вводятся подходящие химические группы, затем на второй стадии начинается реакция между химическими группами, введенными в поверхность субстрата, и гиалуроновой кислотой или ее производными. Например, в патентах США 4657820, 4663233, 4722867, 4801475, 4810586, 4959074, 5023114 и 5037677 описано использование промежуточного слоя между субстратом и покрытием на основе гиалуроновой кислоты. Этот промежуточный слой физически соединяется с субстратом и содержит химические группы, которые пригодны для образования связи с химическими группами гиалуроновой кислоты. Для облегчения распределения и обеспечения ровного покрытия гиалуроновой кислоты на субстрате, как описано в вышеуказанном патенте, используется альбумин, который при добавлении к гиалуроновой кислотe улучшает ее способность равномерно смачивать промежуточный слой. В других источниках описано использование плазменной технологии для введения в субстрат реакционноспособных групп. Этот метод (Garbassi F. et a1. Polymer Surfaces, from Physics to Technology, Wiley, Chichester, 6, 1994) дает возможность модифицировать поверхность полимерных материалов быстро и эффективно. Например, в международной заявке WO 94/06485 описано введение функциональных групп в поверхность полимерного материала путем обработки плазмой метанола. Затем обработанный материал приводят в контакт с раствором эпихлоргидрина, что гарантирует присутствие групп, пригодных для реакции с полисахаридами. Другая статья (Acta Phisiologica Scandinava Materials Research, 18, 953, 1984, Elan et al. ) описывает обработку кислородной плазмой с последующим нанесением 3- глицидоксипропилтриметоксисилана. Поверхности, обработанные таким образом, используют для образования ковалентных связей с полисахаридами. Хотя вышеуказанные методы в общем являются удовлетворительными, они, тем не менее, каждый сталкивается при осуществлении с трудностями. В частности, использование промежуточного слоя требует, чтобы его состав был адаптирован к природе субстрата, чтобы как можно в большей степени увеличивать адгезию. В случае изготовления предметов, состоящих из новых материалов или редко используемых материалов для определения наиболее подходящего состава для промежуточного слоя требуется много времени и усилий. Если предметы, на которые нужно нанести покрытия, состоят из разных материалов, трудно нанести подходящий промежуточный слой на каждый компонент, при этом нужно избежать перекрывания и попадания промежуточных слоев в неподходящие места. Более того, может быть нежелательным использовать для улучшения смачиваемости субстрата альбумин, особенно в случае изделий, предназначенных для биомедицинских целей. С учетом других вышеуказанных примеров предпочтительно избегать использования эпихлоргидрина и 3-глицидоксипропилтриметоксисилана, так как известно, что эти два соединения очень вредны для здоровья. В действительности, согласно классификации вредных веществ, выпущенных Европейским Союзом, эти соединения кодируются как "R45" и "R40" соответственно, что означает риск для здоровья, как сообщается в большинстве каталогов на химические продукты и реагенты. Это обозначение указывает, что в первом случае продукт может вызвать рак, и во втором случае, что есть опасность возникновения необратимых эффектов. В общем число реакций с участием функциональных групп, иммобилизованных на поверхности больших молекул, таких как полисахариды, очень ограничено явлением, общеизвестным как пространственное затруднение. Большой размер молекул полисахарида предотвращает контакт или препятствует контакту между реакционноспособными группами, поэтому вероятность эффективного протекания реакции очень мала. Другие способы, описанные в уровне техники, включают реакцию между полисахаридами и аминогруппами. Японский патент JP 04126074 раскрывает применение обработки аммониевой плазмой для введения аминогрупп на поверхность полимерных субстратов. Затем аминогруппы реагируют с гиалуроновой кислотой или другими полисахаридами при использовании агента конденсации. В патенте США N 4810784 поверхности предмета, изготовленного из полимерного материала, обрабатывают реакционноспособными растворами, так чтобы ввести отрицательные электростатические заряды в саму поверхность. Обработанную таким способом поверхность приводят в контакт с водным раствором полиэленимина (ПЭИ), полимера, характеризующегося наличием аминогрупп и положительного электростатического заряда. Взаимодействие между различными зарядами связывает ПЭИ с модифицированной поверхностью с получением поверхности, обогащенной аминогруппами. Гепарин и другие полисахариды связывают с аминированной поверхностью после обработки растворами нитритов. В органической химии известен тот факт, что действие нитратов вызывает образование альдегидных групп. Эти группы реагируют с аминированной поверхностью, необратимо связывая полисахарид с самой поверхностью. Ту же реакцию используют, когда вводят альдегидные группы путем слабого окисления периодатом (C. Brink et al.- Coloids and Surfaces, 149, 66, 1992). Более того, реакция между ПЭИ и любыми альдегидными группами, находящимися или введенными в полисахарид, иногда используется для связывания полисахарида в различных конформациях с поверхностью предмета (Е. Ostenberg et al., Journal of Biomedical Materials Research, 29, 741 (1995)). В патенте US N 5409696 описана модификация поверхности материалов плазмой, содержащей пары воды, и последующая реакция обработанной поверхности ПЭИ. Полученная таким образом поверхность обогащена аминогруппами и способна связывать гепарин и другие полисахариды необратимо при действии конденсирующих агентов. Обычно реакция между карбоксильными группами полисахарида и аминогруппами поверхности промотируется этилдиметиламинопропилкарбодиимидом (ЭДК). Использование этого способа для покрытия внутренней поверхности трубок, которые предназначены для контактирования с кровью, описано Р.V. Narayanan (Journal of Biomaterials Science, Polymer Edition, 6, 181, 1994). Исследования показали, что способы, описанные в указанных патентах и статьях, не вполне удовлетворяют требованиям, предъявляемым к изготовлению предметов с поверхностями, модифицированными гиалуроновой кислотой или ее производными. В действительности введение функциональных групп аминного типа при помощи аммонийной плазмы, как описано в японском патенте JP 04126074, является не очень используемым на практике. Специалисты в этой области знают, что плотность функциональных групп, введенных этим методом в поверхность субстрата, сравнительно невелика и зависит в значительной степени от точной геометрии реактора, используемого для обработки плазмы, от природы субстрата, от наличия добавок и/или загрязняющих веществ на его поверхности и внутри него и от условий хранения субстрата до и после его обработки. По этой причине метод трудно применять в промышленности. Этот отрицательный аспект признается всеми специалистами в данной области и в вышеуказанных патентах США N 4810874 и 5409696 он преодолевается путем использования ПЭИ, который позволяет получать высокую плотность аминогрупп. Хотя эти способы эффективно решают проблемы, связанные с первой стадией процесса, то есть с введением реакционноспособных групп в поверхностный слой материала, они не так эффективны на второй стадии, которая включает связывание гиалуроновой кислоты или ее производных с поверхностью. В действительности, как ранее указано, в патенте США N 4810874 рекомендуется активация гепатина или других полисахаридов химической обработкой. Следовательно, нельзя использовать полисахарид, а необходимо вначале модифицировать его химическим способом, что требует лишних расходов по времени, реагентам, трудозатратам на переработку отходов. Более того, в отличие от других полисахаридов гиалуроновая кислота только слегка чувствительна к реакциям частичного окисления, которое позволяет ввести в полисахарид реакционноспособные группы типа альдегидных (J.Е. Scott and М.J. Tigwell, Biochem. J., 173, 103, 1978; B.J. Kvam et al., Carbohydrate Research, 230, 1, 1992). Что касается патента США 5409696, то когда осуществляют процесс, описанный в нем, он не приводит к получению поверхностной структуры, способной в наибольшей степени использовать свойства, свойственные гиалуроновой кислоте. С другой стороны, когда используют способ, описанный в патенте США 5409696, как показано в сравнительном опыте, приведенном в данном описании, нельзя получить поверхностные структуры, способные ингибировать адгезию клеток. Похожие результаты наблюдаются, когда вместо самой гиалуроновой кислоты используют ее водорастворимые полусинтетические эфиры (EPA 0216453). Очевидно, когда используют этот процесс, способ, по которому образуется связь между аминированной поверхностью и полисахаридом, не позволяет наиболее полно использовать гидрофильные свойства гиалуроновой кислоты или ее производных. Не следует пренебрегать и тем, что способ, являющийся предметом патента США 5409696, можно применить только при поверхностной модификации полимерных материалов, как указано в его названии "Обработанные плазмой с радиочастотой полимерные поверхности, содержащие иммобилизованные антитромбогенные агенты" и как следует из указаний, содержащихся в патенте. В общей биомедицинской и хирургической практике часто используются керамические или металлические материалы, поэтому полагают, что процессы модификации можно применить также к таким субстратам. Данное описание показывает, что должен быть создан метод, согласно которому может быть образована просто и надежно химическая связь между субстратами любой природы и гиалуроновой кислотой или ее производными, таким образом, что присущие им характеристики могут быть реализованы наиболее полно. Сущность изобретения
Данное изобретение касается способов покрытия биомедицинских предметов тонким слоем гиалуроновой кислоты, ее производного или полусинтетического полимера, причем тонкий слой стабильно связан с подложкой. Таким образом, получают композиционную структуру, основа которой характеризуется свойствами материала, используемого для изготовления предмета, а свойства поверхности определяются тонким слоем гиалуроновой кислоты, ее производного или указанного полусинтетического полипептида. Указанные свойства могут придать высокую степень гидрофильности поверхностям материалов, обработанных согласно способам по изобретению. Например, поверхности предметов, обработанных способами по изобретению, способны предотвращать адгезию клеток, присутствующих в биологических жидкостях и снижать адгезию бактерий. Более того, покрытие предмета материалом природного происхождения согласно настоящему изобретению обеспечивает лучшие свойства при взаимодействии с биологическими фазами. Данное изобретение станет более понятным из подробного описания, приведенного ниже, и сопутствующих чертежей, которые даны только для иллюстрации и не ограничивают данное изобретение и на которых представлено следующее. Фиг. 1а - ЭСХА-спектр образца 1, пример 1. Фиг. 1b - ЭСХА-спектр образца 2, пример 1. Фиг. 2а - пик C1, полученный методом ЭСХА образца стали, помещенного в раствор ПЭИ. Фиг. 2b - пик C1, полученный методом ЭСХА образца стали, модифицированного гиалуроновой кислотой, как описано в примере 4. Фиг. 3а - изображение, полученное при помощи оптического микроскопа, показывающее отсутствие адгезии L-929 фибробластов к поверхности образца A, пример 6 (200х увеличение). Фиг. 3b - изображение, полученное при помощи оптического микроскопа, показывающее адгезию L-929 фибробластов к поверхности образца B, пример 6 (200х увеличение). Фиг. 4а - изображение, полученное при помощи оптического микроскопа, показывающее отсутствие адгезии L-929 фибробластов к поверхности образца D, пример 6 (200х увеличение). Фиг. 4b - изображение, полученное при помощи оптического микроскопа, показывающее адгезию L-929 фибробластов к поверхности образца F, пример 6 (200х увеличение). Фиг. 5а - изображение, полученное при помощи оптического микроскопа, показывающее адгезию L-929 фибробластов к поверхности титана (200х увеличение). Фиг. 5b - изображение, полученное при помощи оптического микроскопа, показывающее отсутствие адгезии L-929 фибробластов к поверхности титана, модифицированной эфиром гиалуроновой кислоты, как описано в примере 8 (200х увеличение). Фиг. 6а - изображение, полученное при помощи оптического микроскопа, показывающее отсутствие адгезии L-929 фибробластов к поверхности внутриглазной линзы, модифицированной кислотой, как описано в примере 10 (50х увеличение). Фиг. 6b - изображение, полученное при помощи оптического микроскопа, показывающее адгезию L-929 фибробластов к поверхности немодифицированной внутриглазной линзы (50х увеличение). Фиг. 7а - изображение, полученное при помощи оптического микроскопа, показывающее отсутствие адгезии L-929 фибробластов к поверхности внутриглазной линзы, модифицированной гиалуроновой кислоты, как описано в примере 10 (200х увеличение). Фиг. 7b - изображение, полученное при помощи оптического микроскопа, показывающее адгезию L-929 фибробластов к поверхности немодифицированной внутриглазной линзы (200х увеличение). Подробное описание изобретения
Другие цели и области применения настоящего изобретения станут очевидны из последующего подробного описания. Однако следует иметь в виду, что подробное описание и конкретные примеры, показывающие предпочтительные формы воплощения изобретения, приведены только для иллюстрации, поскольку из данного описания будет ясно, что в объеме данного изобретения возможны различные изменения и модификации. В общем использование данного изобретения обеспечивает покрытие предмета слоем гиалуроновой кислоте или ее производного (например, такого, как полисахарид, содержащий карбоксильные группы) или полусинтетического полимера, такого, как описанный ниже, путем образования химической связи с поверхностью субстрата. Авторы предложили два различающихся способа, которые являются преимущественными и составляют часть данного изобретения. Ниже их обозначают как "Способ A" и "Способ B", соответственно. Как в Способе A, так и в Способе B согласно данному изобретению как альтернативу гиалуроновой кислоте или ее производным (таким как ее неполные производные (EPA 0216453) или полисахариды, содержащие карбоксильные группы) можно использовать полусинтетические полимеры, такие как эфиры многоатомных спиртов и гиалуроновой кислоты (EP 0265116), внутренние эфиры кислых полисахаридов (EPA 0341745), эфиры карбоксиметилцеллюлозы, карбоксиметилхитин и карбоксиметиламид (EP 0342557), активные эфиры карбоксиполисахаридов (заявка на патент Италии N PD 94A000043), сульфированные эфиры гиалуроновой кислоты (заявка на патент Италии N PD 94000054), эфиры альгиновой кислоты (EP0251905), эфиры геллана (EPA 0518710), внутренние эфиры геллана (WO 94/03499), эфиры хитина и хитозана (EPA 0603264), эфиры пектовой и пектиновой кислот (УЗФ 0621877). Способ A
Способ A согласно данному изобретению предусматривает покрытие предмета слоем гиалуроновой кислоты или ей производного или полусинтетического полимера путем образования химической связи с поверхностью субстрата. В противоположность известным и ранее описанным способам, которые включают реакцию функциональных групп макромолекулы полисахарида и функциональных групп, находящихся на поверхности, и, как было ранее указано, приводят к низким выходам, данное изобретение представляет собой способ, который может быть осуществлен в две стадии и позволяет избежать проблем, связанных с известными и описанными способами. На первой стадии Способа A гиалуроновая кислота, ее производные или полусинтетический полимер реагируют с подходящим соединением, которое представляет собой алкоксисилановый агент сочетания, обязательно в растворе. Исключив на этой первой стадии необходимость реакции с функциональными группами, закрепленными на поверхности субстрата (и, следовательно, практически неподвижными), можно уменьшить отрицательное влияние пространственного затруднения молекулы полисахарида на первой стадии процесса. На второй стадии Способа A продукт реакции между гиалуроновой кислотой, ее производным или полусинтетическим полимером и алкоксисилановым сочетающим агентом наносится в виде раствора на поверхность субстрата в соответствии в обычными физическими методами нанесения покрытия. Затем образуется связь между фрагментами алкоксисилана в указанном продукте реакции и субстратом во время удаления растворителя из раствора для нанесения покрытия, когда указанный раствор находится в контакте с субстратом, и вероятность протекания реакции очень высока. Опыты показывают, что эффективность Способа A неожиданно выше, когда его осуществляют в две вышеописанные стадии, по сравнению с тем, когда используют традиционные методы, описанные в уровне техники, а именно методы, включающие реакцию между функциональными группами, иммобилизованными на поверхности, и функциональными группами, имеющимися в макромолекуле полисахарида. Соответственно в Способе A по изобретению гиалуроновая кислота, ее производное или полусинтетический полимер реагирует в водном растворе или обычно в подходящем растворителе с молекулой алкоксисиланового агента сочетания, который может присоединяться к гиалуроновой кислоте, ее производному или указанному полусинтетическому полимеру одним концом и к субстрату - другим. Как уже отмечалось, в Способе A по изобретению гиалуроновая кислота, ее производные или полусинтетический полимер реагирует с соединением, относящимся к классу алкоксисиланов. Эти соединения известны специалистам в области химии как агенты сочетания, которые могут быть использованы для улучшения адгезии между органическими или неорганическими материалами (Silane Coupling Agents, E.P. Plueddemann, Plenum Press, New York, 1982). Примерами таких алкоксисилановых агентов сочетания являются соединения, содержащие атомы галогена, такие как хлорпропилтриметоксисилан, соединения, содержащие ненасыщенные органические группы, такие как винилтриэтоксисилан и метакрилоксипропилтриметоксисилан, соединения, содержащие аминогруппы, такие как аминопропилтриметоксисилан и аминоэтиламинопропилтриметоксисилан. Однако способ по изобретению не ограничивается такими типами алкоксисилановых агентов сочетания. В Способе A по изобретению реакция между гиалуроновой кислотой, ее производным или полусинтетическим полимером может требовать применения одной или нескольких молекул, которые позволяют протекание реакции между функциональными группами гиалуроновой кислоты, ее производного или полусинтетического полимера и функциональными группами алкоксисилана. Этот класс соединений включает, наряду с другими, соединения, содержащие диимидные группы, которые подпадают под общее определение агентов конденсации, такие как циклогексилкарбодиимид и этилдиаминопропилкарбодиимид, и такие соединения, как карбонилдиимидазол и дикарбонилдиимидазол, которые считаются бифункциональными агентами, известными специалистам в области синтеза протеиновых соединений. В способе по изобретению также могут быть использованы соединения, которые катализируют или способствуют реакции между функциональными группами гиалуроновой кислоты или ее производного и функциональными группами алкоксисилана. Такими примерами являются N-гидроксисукцинимид, гидроксисульфосукцинимид, 1-гидроксибензотриазола гидрат и подобные соединения, выполняющие ту же самую функцию. Использование таких соединений предусмотрено также в Способе B по изобретению, описанном ниже. В Способе A субстрат, на который нужно нанести покрытие, адаптируют путем плазменной обработки для того, чтобы облегчить взаимодействие с продуктом реакции, содержащим гиалуроновую кислоту, ее производное или полусинтетический полимер. Не ограничиваясь какой-либо теорией, можно предположить, что обработка субстрата плазмой приводит к увеличению поверхностного натяжения субстрата таким образом, что облегчается смачиваемость раствором, содержащим гиалуроновую кислоту и алкоксисилан и другие молекулы. Более того, она позволяет ввести на поверхность субстрата функциональные группы, способные облегчить реакцию с алкоксисиланом. В частности, это методы обработки, которые позволяют ввести гидроксильные, карбоксильные группы и в общем такие функциональные группы, которые называются кислыми в общепринятой химической терминологии. Поскольку существует много химических функциональных групп, способных облегчить взаимодействие между поверхностью субстрата и силановым агентом сочетания, условия обработки плазмой являются значительно менее строгими, чем в случае способов обработки, описанных в уровне техники. Некоторыми примерами подходящих способов обработки являются способы, использующие плазму кислорода, воздуха, азота, аргона и других редких газов, воды, спиртов и смесей указанных газов или паров. Природа субстрата не ограничена и определяется только возможностью генерирования после обработки плазмой ненужных функциональных групп, способных облегчить реакцию с силаном. Согласно одному особенно предпочтительному варианту Способа A по изобретению реакция между гиалуроновой кислотой или ее производным и алкоксисилановым агентом сочетания происходит в водном растворе, причем гиалуроновая кислота или ее производное присутствует в количестве между 0.01 и 2%, предпочтительно между 0.1 и 1.2%. Алкоксисиланом предпочтительно является аминосилан, присутствующий в стехиометрическом количестве или в небольшом избытке. В таких предпочтительных случаях реакционный раствор предпочтительно также содержит этилдиаминопропилкарбодиимид в стехиометрическом количестве, рассчитанном согласно реакции между карбоксильными группами, имеющимися в гиалуроновой кислоте или ее производном, и аминогруппой аминоксисилана, или в небольшом избытке. Реакции способствует наличие N-гидроксисукцинимида в количестве между 10 и 100% в расчете на мольную концентрацию карбодиимида. Через несколько часов протекания реакции при комнатной температуре раствор наносят на поверхность предмета, который только что был обработан плазмой в соответствии с методами, обычно используемыми для нанесения тонких поверхностных слоев из раствора. Обработку предпочтительно осуществлять плазмой кислорода или воздуха с энергией заряда 1-400 Вт и предпочтительно 10-150 Вт, при давлении 10 мторр - 10 торр и временем обработки 1 с - 1 ч, предпочтительно 10 с - 30 мин. Растворитель испаряют под вакуумом или без него и при нагревании или без него. Параметры процесса на этой стадии определяются необходимостью создания условий, нужных для реакции между реакционноспособными концевыми группами алкоксисиланового агента сочетания и функциональными группами, содержащимися на поверхности субстрата после обработки плазмой. В конце любые остатки и соединения, которые не связаны, можно удалить путем промывки или подобных методов. Способ B
Согласно другому варианту данного изобретения материал субстрата любого вида обрабатывают плазмой воздуха, кислорода, аргона, азота или других газов или паров, способных ввести оксигенирированные функциональные группы на поверхности и/или вызвать эффект очистки и удаления органических загрязнений. Однако использование плазмы, содержащей водяной пар, как заявлено в патенте США 5409696, в способах по изобретению не требуется. Поверхность материала, обработанная таким образом, подвергается обработке водным раствором ПЭИ (или другого поликатионного вещества, такого как полилизин и т.п.) для создания высокой поверхностной концентрации аминогрупп. Полученный материал реагирует с гиалуроновой кислотой, ее производным или полусинтетическим полимером (например, другими полисахаридами, содержащими карбоксильные группы, в присутствии агентов конденсации, таких как ЭДК, в водном растворе или дициклогексилкарбодиимида (ДЦК) в органических растворителях). Соединение, способное ускорить реакцию, промотируемую ЭДК, также содержится. Этот класс соединений включает, но не ограничен ими, N-гидроксисукцинимид (NГC), гидроксисульфосуцинимид, гидроксибензотриазола гидрат и подобные соединения. Способ B согласно данному изобретению основан на удивительном наблюдении, что соединения, такие как NГC, могут способствовать реакции конденсации, промотируемой ЭДК, также в случае, когда группы связаны с поверхностью в отсутствиe молекулярных структур, известных специалистам как "плечи спейсера". В случае гиалуроновой кислоты известно, что в растворе в отсутствие NГС образуются промежуточные продукты реакции, относящиеся в общем к N-ацилмочевинам, которые препятствуют завершению реакции (X. Xu et al., Trans IV World Biom. Cong. , 170, 1992). Когда аминогруппы связаны с поверхностью, должны использоваться "плечи спейсера", для того чтобы придать им достаточную реактивность. "Плечо спейсера" представляет собой ряд атомов углерода, который отделяет реакционноспособную группу от поверхности, придавая ей большую свободу и увеличивая ее реакционноспособность. Например, продукт COVALINK (Nunc) представляет собой полистирол, содержащий аминогруппы, отделенные от поверхности плечом спейсера с девятью атомами углерода (К. Gregorins et a1. , J. Immunol. Meth. , 181, 65, 1995) NГC оказывается эффективным при увеличении выхода реакции, промотируемой ЭДК (J.V. Staros et a1., Anal. Biochem., 156, 220, 1986). Очевидно, стоимость создания сложенных молекулярных структур на поверхности, таких как функциональные группы, подкрепленные "плечами спейсера", очень высока и ограничивает процесс производства. В Способе B по изобретению аминогруппы связаны с поверхностью и находятся внутри структуры ПЭИ, использования "плеч спейсера" не требуется, как и наличия других структур. Обнаружение того факта, что NГC способен облегчать реакцию конденсации поверхностных аминогрупп, привнесенных ЭДК, даже в отсутствие "плеча спейсера", и при этом не надо обращать особенное внимание на другие молекулярные аспекты поверхности, является удивительным и решающим фактором в Способе B по изобретению. Еще более удивительным и непредвиденным, исходя из известных знаний, является обнаружение того, что присутствие NГC в реакционной смеси оказывает решающее влияние на антиадгезионные по отношению к клеткам свойства поверхностей с нанесенным на них слоем гиалуроновой кислоты или ее производных. В действительности, когда работают в отсутствие NГC, как описано в патенте США N 5409696, невозможно придать поверхностям, покрытым гиалуроновой кислотой или ее производными, антиадгезионные свойства по отношению к клеткам, чтобы предотвратить их адгезию. С другой стороны, при использовании способов по изобретению получают поверхности, которые обладают превосходной стойкостью к заселению клетками. Хотя авторы не обязаны объяснять причины достижения результата и не намерены ограничиться какой-то одной теорией, считается, что различие можно приписать одной из следующих причин: или в отсутствие NГC выход реакции слишком низкий, и хотя гиалуроновая кислота связывается с поверхностью, это происходит в количестве, которого недостаточно для полного покрытия нижележащего материала; или связь возникает в отсутствие NГC, меняет свойства гиалуроновой кислоты, связанной с поверхностью. Полученная структура не сохраняет свойства, которые обычно ожидаются от этого вида полимера исходя из общих химических знаний. Согласно одной особенно предпочтительной форме осуществления изобретения полимерный, металлический или керамический материал обрабатывают плазмой воздуха или кислорода с энергией заряда между 1 и 400 Вт, предпочтительно между 10 и 150 Вт, при давлении между 10 мторр и 10 торр и времени обработки между 1 с и 1 ч, предпочтительно между 10 с и 30 мин. Однако условия обработки не являются критическими и зависят от формы продукта. Обработка длится дольше, если она включает модификацию внутренней поверхности труб или других недоступных частей, в то время как плоские или наружные поверхности требуют меньшего времени. Обработанный материал помещают в водный раствор ПЭИ с концентрацией между 0.01 и 10%, предпочтительно между 0.5 и 2%. Время реакции ограничено и составляет от 10 мин до 1 ч. В конце этой стадии материал промывают и помещают в раствор гиалуроновой кислоты или ее производного или другого полисахарида, содержащего карбоксильные группы. Концентрация полисахарида составляет 0.005-5%, предпочтительно 0.05-1%. В раствор добавляют NГC и ДНК с концентрацией 0.001-1%. Реакция протекает при комнатной температуре или при слегка повышенной температуре и может длиться от 10 мин до 48 ч. Если типы полисахарида и субстрата являются подходящими, реакция может протекать в органическом растворителе с использованием ДНК и NГС, введенных в ранее указанных концентрациях. Значение данного изобретения (Способы A и B) будет очевидным любому специалисту в данной области. В действительности, способом согласно данному изобретению можно получить предметы с благоприятными поверхностными свойствами благодаря наличию гиалуроновой кислоты или ее производного, причем эти свойства остаются стабильными во времени, что обусловлено химическими связями между покрытием и субстратом. Более того, поверхности таких предметов обладают антиадгезионными свойствами по отношению к клеткам и бактериям, присутствующим в биологических жидкостях. Ниже приводится несколько иллюстративных предметов, и любые изменения, очевидные для специалиста в данной области, входят в объем данного изобретения. Пример 1
Образец полистирола отбирают из бактериологической чашки Петри (Corning) и обрабатывают плазмой в реакторе с параллельными пластинами (Gambetti Kenologia). Обработку проводят при давлении кислорода 100 мторр, энергии заряда 50 Вт, скорости потока 20 см3/мин и времени обработки 30 с. Обработанные образцы погружают на 2 ч в 0.5%-ный раствор ПЭИ (Aldrick) в воде. Затем они вынимаются, промываются водой и погружаются в пробирки для проведения испытаний, содержащие 5 мл следующих растворов:
1) 1% (веса) гиалуроновой кислоты (Fidia Advanced Biopolymers, Brindisi);
2) 1% (веса) гиалуроновой кислоты, 0.02 г 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимида (Sigma), 0.02 г N-гидроксисукциимида (Sigma);
3) 1% (веса) гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 25% бензиловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers, Brindisi);
4) 1% (веса) гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 25% бензиловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers, Brindisi), 0.02 г 1-этил-3-(3- диметиламинопропил)-карбодиимида (Sigma), 0.3 г N-гидроксисукцинимида (Sigma);
5) 1% (веса) гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 50% бензиловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers, Brindisi);
6) 1% (веса) гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 50% бензиловым спиртом, 0.02 г 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимида (Sigma), 0.02 г N- гидроксисукцинимида (Sigma). Образцы оставляют в пробирках при комнатной температуре на 12 ч, после чего они в течение ночи промываются водой. Эффективность обработки определяют методом ЭСХА (электронной спектроскопии для химического анализа). Как уже известно (Garbassi F. et al. Polymer Surfaces, from Physics to Technology, Wiley, Chichester, 3, 1994), этим методом можно установить химический состав поверхности материалов. Анализ осуществляют на Perkin Elmer PHI 5500 ESCA System. Помимо вышеописанных образцов используют образец, обработанный плазмой и помещенный только в ПЭИ (табл. 1). Данные табл. 1 показывают значительное увеличение кислорода, находящегося на поверхности, после процесса модификации, как это ожидалось после введения гиалуроновой кислоты или ее эфиров. С другой стороны, в отсутствие ЭДК и NГC состав поверхности остается подобным. Более того, детальный анализ пика C1 показывает большое количество CO связей в соответствии с ожидаемой молекулярной структурой. Спектры ЭСХА образцов 1 и 2 показаны на фиг. 1а и 1b. Пример 2
Другие образцы, приготовленные в соответствии со способом, описанным в примере 1, погружают в воду, оставляя на 2 мес. Проводят ЭСХА. Никаких уменьшений или изменений в поверхностях концентрации кислорода не наблюдается, что подтверждает стабильность связи между полисахаридом и поверхностью. Пример 3
Пленка полиэтилена, используемая для упаковки, обрабатывается плазмой и погружается в ПЭИ, как описано в Примере 1. Приготавливают два образца и погружают в следующие растворы в диметилсульфоксиде (Fluka):
1) 1% гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 75% бензиновым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers, Brindisi);
2) 1% гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 75% бензиновым спиртом, 0.02 г 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)- карбодиимида, 0.02 г N-гидроксисукцинимида. После промывки в течение 24 ч в диметилсульфоксиде образцы анализируют методом ЭСХА. Получают следующие результаты (табл. 2). Пример 4
Образец стали 316, обычно используемый для биомедицинских целей, обрабатывают плазмой воздуха в течение 15 мин, затем помещают в соприкосновение с раствором 0.5% ПЭИ в течение 2 ч. Используя раствор 2, описанный в примере 1, связывают с поверхностью материала гиалуроновую кислоту. Затем материал анализируют методом ЭСХА. Полученный пик C1 показан на фиг. 2: фиг. 2а относится к образцу после выдержки в растворе ПЭИ, фиг. 2b относится к пику C1 образца, который подвергается полной модификации. В последнем случае можно видеть типичную широкую многокомпонентную форму, характерную для пика C1 полисахаридов (см. , например, ранее указанную статью Е. Ostenberg et a1., Journal of Biomedical Materials Research, 29, 741, 1995), что подтверждает наличие гиалуроновой кислоты на поверхности. Пример 5
Чашки Петри для клеточной культуры (Corning) модифицируют, как описано в примере 1 (3 чашки на обработку). В приготовленные таким образом чашки помещают 5 мл клеточной суспензии (клетки фибробласта соединительной ткани мыши, L-929 в среде Minimum Essential Eagle's, содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки, антибиотики, пенициллин, стрептомицин и амфотерицин B и L-глютамин-SРА, Milan), затем помещают их в инкубатор (Forma) при 37oC в атмосфере с 5% CO2 при 98%-ной влажности. Взаимодействие клетка-клетка и полистирольной основы анализируют через регулярные интервалы при помощи оптического контрастнофазового микроскопа (Leica). В частности, оценивается, способны ли клетки прилипать к подложкам, обработанным различными методами, и до какой степени, с использованием в качестве контрольного образца чашки Петри, обработанной только плазмой, обладающей максимальной адгезией. В этом примере (исходя из средней величины, полученной в течение 24 ч) величина 5 относится к максимальной адгезии, а величина 0 означает отсутствие адгезии. Образец - Балл
Контрольный - 5
1 - 4
2 - 0
3 - 4
4 - 0
5 - 4
6 - 0
Опыт подтверждает наличие гидрофильного слоя, прочно связанного и способного предотвратить адгезию клеток. Пример 6
Четыре полистирольных чашки Петри обрабатывают способом, описанным в примере 1, используя раствор 2 гиалуроновой кислоты (эти образцы обозначены буквой A). Такое же число чашек обрабатывают в соответствии со способом нанесения гиалуроновой кислоты, описанным в примере 11 патента США 5409696 (эти образцы обозначены буквой B). Модифицированные чашки приводят в контакт с суспензией клеток L-929, как описано в предыдущем примере. Адгезия клеток оценивается, как в предыдущем примере, получены следующие результаты:
Образец - Балл
Контрольный - 5
A - 0
B - 4
На фиг. 3а и 3b приведены изображения, полученные при помощи оптического микроскопа и показывают состояние поверхности в конце опыта. Фиг. 3а относится к образцу A, фиг. 3b - к образцу B. Четко видна разница в стойкости к адгезии клеток. Пример 7
Четыре полистирольных чашки Петри обрабатывают в соответствии со способом, описанным в примере 1, используя растворы 4 и 6 эфиров гиалуроновой кислоты (Эти образцы обозначены C и D соответственно). Такое же число чашек обрабатывают в соответствии со способом нанесения гиалуроновой кислоты, описанным в патенте США 5409696, используя те же эфиры гиалуроновой кислоты (эти образцы обозначены E и F). Модифицированные чашки приводят в контакт с суспензией клеток L-929, как описано в предыдущем примере. Адгезия клеток оценивается, как в предыдущем примере, получают следующие результаты:
Образец - Балл
Контроль - 5
C - 0
D - 0
E - 5
F - 5
На фиг. 4а и 4b показаны изображения, полученные при помощи оптического микроскопа, и показано состояние поверхностей в конце опыта. Фиг. 4а относится к образцу D, фиг. 4b - к образцу F. Четко видна разница в степени стойкости клеток при осуществлении двух способов. Пример 8
Небольшой лист титана (Aldrich) модифицируют плазмой и обрабатывают ПЭИ, как описано в примере 4. Обработанная таким образом поверхность реагирует с раствором 6, как в примере 1. Четыре образца немодифицированного титана и четыре образца титана, которые подверглись процессу модификации, приводят в контакт с суспензией клеток L-929, как в предыдущем примере. Адгезия клеток оценивается через 24 ч путем окрашивания клеток толуидиновым голубым и наблюдения за культивированными образцами в металлографический микроскоп. Результаты этих наблюдений представлены на фиг. 5а и фиг 5b. Фиг. 5а относится к образцу, не модифицированному эфиром гиалуроновой кислоты в соответствии с данным способом. Очевидно, что на этих двух поверхностях клетки ведут себя по-разному. В случае модифицированного материала клетки сохраняют круглую форму и не приобретают сплющенный вид, типичный для клеток, которые прочно соединялись с субстратом, как это имеет место в случае немодифицированного материала (фиг. 5а). Пример 9
Процесс модификации, описанный в примере 8, осуществляют на стеклянном слайде. Модифицированное стекло, образец немодифицированного стекла и полистирольная чашка, модифицированная плазмой (используемая как контрольный образец из-за максимальной адгезии), приводятся в контакт с клетками L-929. Адгезию клеток оценивают через 24 ч. Получены следующие результаты:
Образец - Балл
Контрольный - 5
Обычное стекло - 5
Модифицированное стекло - 0
Пример 10
Процесс модификации, описанный в примере 1, осуществляют на двух глазных линиях (Sanitaria Scaligera), используя раствор 0.5% офтальмологической гиалуроновой кислоты (Fidia Advanced Biopolymers), 0.4% ЭДК и 0.4% NГС. Модифицированные линзы и такое же количество немодифицированных линз помещают в чашки Петри, и затем приводят в контакт с суспензией клеток L-929, как в предыдущих примерах. Стойкость образцов к адгезии клеток показана на фиг. 6 и 7. Это фотографии поверхностей линз, модифицированных согласно данному способу (6а и 7а), и немодифицированных (6b и 7b). Здесь ясно показана различная способность двух поверхностей ингибировать адгезию клеток. Пример 11
Образец полистирола отбирают из бактериологической чашки Петри (Corning) и обрабатывают плазмой в реакторе с параллельными пластинами (Gambetti Kenologia). Обработку проводили при давлении кислорода 100 мторр, энергии заряда 100 Вт, скорости потока 20 см3 (Cm)/мин и времени обработки 1 мин. Обработанные образцы погружают и вынимают пять раз из следующих водных растворов, приготовленных за 6 ч до этого, и оставляют при комнатной температуре:
1) 1% гиалуроновой кислоты (Fidia Advanced Biopolymers);
2) 1% (вес.) гиалуроновой кислоты, 0.4 г 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбомида (Sigma), 1% (об.) 3-аминопропилтриметоксисилана (Sigma);
3) 1% (вес.) гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 25% бензоловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers), 0.35 г 1-этил-3-(3- диметиламинопропил) карбомида (Sigma), 0.3 г N-гидроксисуцинимида (Sigma), 1% (об.) 3- аминопропилтриметоксисилан (Sigma);
4) 1% (вес.) гиалуроновой кислоты, на 50% этерифицированной бензиловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers), 0.35 г 1-этил-3-(3- диметиламинопропил) карбодиимида (Signal), 0.3 г N- гидроксисуцинимида (Signal), 1% (об.) 3-аминопропилтриметоксисилана (Sigma). Образцы сушат в печке при 60oC в течение ночи и затем промывают в воде и сушат сжатым воздухом. Для проверки целостности покрытия образцы погружают в 1%-ный раствор толуидинового голубого в воде (Aldrich). Это немедленно вызывает окраску гиалуроновой кислоты и других полисахаридов в яркий фиолетово-голубоватый цвет. Эффективность процесса оценивают по пятибалльной шкале от 0 до 5, при этом 5 соответствует абсолютно ровной окраске (свидетельствуя о целостности покрытия гиалуроновой кислоты или ее производного) и 0 используют в отсутствие окраски. Образцы, приготовленные в соответствии с описанным примером (номера соответствует номеру раствора, в который погружали образец), характеризуются следующими показателями:
Образец - Балл
1 - 1
2 - 5
3 - 5
4 - 5
Примечаниe: окраска вначале кажется однородной, но окрашенное покрытие после выдержки в воде в течение нескольких секунд разрушается. Пример 12
Несколько образцов готовят согласно методу, описанному в Примере 11. Образцы погружают в воду при комнатной температуре на 20 дней, после чего проводят испытание окрашиванием. Получают следующие результаты:
Образец - Балл
1 - 0
2 - 5
3 - 5
4 - 4
Пример 13
Следующий пример позволяет оценить эффективность описанного способа, а именно взаимодействие между полисахаридом и функциональными группами в растворе в отличие от обычного способа, включающего реакцию между группами, зафиксированными на поверхности, и группами, имеющимися в полисахариде. Разрезают силиконовый катетер на образцы длиной 3 см. Ряд образцов обрабатывают согласно способу, описанному в примере 11, растворами 2, 3 и 4. Вторую серию образцов обрабатывают плазмой и наносят 3- аминопропилтриметоксисилан (Sigma) из 1% (об.) водного раствора. После сушки образцы приводят в контакт со следующими растворами:
2а) 1% (вес.) гиалуроновой кислоты, 0.4 г 1-этил-3-(3- диметаламинопропил) карбодиимида (Sigma), 0.3 г N- гидроксисукцинимида (Sigma);
3а) 1% (вес.) гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 25% бензиловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers), 0.351 г 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимида (Sigma);
4а) 1% (вес.) гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 25% бензиловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers), 0.35 г 1- этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимида (Sigma), 0.3 г N- гидроксисукцинимида (Sigma). Образцы сушат при 60oC в печке в течение ночи и затем промывают водой и сушат сжатым воздухом. При окрашивании получают следующее:
Образец - Балл
2 - 5
3 - 5
4 - 5
2a - 1
3a - 0
4a - 0
Пример 14
Бактериологические полистирольные чашки Петри (Corning) обрабатывают, как описано в примере 11 (3 чашки на обработку), используя растворы 1, 2 и 3. Полученные таким образом чашки заполняют 5 мл клеточной суспензии (клетки фибробласта соединительной ткани мыши, L-929 в Minimum Eagle's Medium, к которой добавлены 10% фетальной телячьей сыворотки, антибиотики, пенициллин, стрептомицин и амфотерицин B и L-глютамин-SРА), помещают в инкубатор (Forma) при 37oC в среду, содержащую 5% CO2, при 98%-ной влажности. Взаимодействия клетка-клетка и полистирольной подложки, обработанной как описано в примере 11, оценивают через регулярные интервалы при помощи оптического микроскопа с контрастными фазами (Leica), в частности, оценивая, прилипают ли клетки к подложкам, обработанным разными способами, и в какой степени, используя в качестве контрольного образца чашку Петри, обработанную только плазмой и характеризующуюся максимальной адгезией. В этом примере (на основе среднего значения величин, полученных в результате наблюдений, проводимых в течение 24 ч) балл 5 относится к максимальной адгезии, а балл 0 означает отсутствие адгезии:
Образец - Балл
Контрольный - 5
1 - 3
2 - 0
3 - 0
Экспрессия подтверждают наличие слоя, прочно связанного с подложкой и способного предотвратить адгезию клеток. Этот гидрофильный слой удаляется с поверхности образца, обработанного раствором 1, который не позволяет достичь образования химической связи. Пример 15
Силиконовый катетер (Silikomed) разрезают на части, каждая длиной 7 см. Четыре образца обрабатывают в условиях, описанных в примере 11, растворами 1, 2, 3 и 4. Скольжение катетеров в водной среде оцениваeтся следующим методом: пробирку для испытаний заполняют Agar (Sigma) с концентрацией 0.7%. Пробирку укрепляют в горизонтальном положении и внутрь помещают отрезок катетера длиной 7 см, причем один конец катетера слегка выступает из Agar. К этому концу прикладывают нагрузку при помощи нити, которую затем наматывают на колесо так, что под действием нагрузки катетер вынимается из Agar, в который он погружен. Благодаря характерным свойствам Agar можно оценить скольжение катетера в водной среде. Время, необходимое для извлечения катетера из Agar, обратно пропорционально величине скольжения катетера. В этом опыте получены следующие результаты:
Образец - Время экстракции (с)
1 - 90 13
2 - 356
3 - 388
4 - 369
Oбработанный только плазмой - 12515
Hеобработанный - 12010
Пример 16
Следующий пример верифицирует метод использования плазмы для поверхности разного состава, этот метод оказывается эффективным также для материалов с различным химическим составом. Более того, пример показывает, что метод является эффективным также в случаях, когда предмет, на которой должно быть нанесено покрытие, изготовлен из нескольких разных материалов. В качестве образцов готовят отрезки катетера длиной 3 см. Они изготовлены из: а) силикона; б) полиуретана; в) поливинилхлорида; г) каучукового латекса. Для наблюдения используется стеклянная крышка. Образцы обрабатывают плазмой, как описано в примере 1 и затем обрабатывают раствором 2, указанным в этом примере. Метод окрашивания дает следующие результаты:
Материал - Балл
Силикон - 5
Полиуретан - 5
Поливинилхлорид - 5
Латекс - 5
Стекло - 5
Пример 17
1%-ный раствор гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 75% бензиловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers) приготавливают в среде диметилсульфоксида (Aldrich). Аликвот раствора отбирают и добавляют к нему 1.1 об.% аминоэтиламинопропилтриметоксисилана и 0.5 г дициклокарбодиимида (Aldrich). Через 6 ч два ранее описанных образца катетера обрабатывают плазмой, как описано в примере 14. Один из образцов погружают в раствор эфира, другой - в раствор эфира и силана и медленно вынимают. Образцы помещают в вакуумную печь при 60oC и 100 торр и оставляют там на 48 ч. Опыт с окрашиванием дает следующие результаты:
Образец - Балл
Раствор эфира - 1
Раствор эфира и аминоксилана - 4
Только плазма - 0
Необработанный - 0
Пример 18
Готовят 1%-ный раствор гиалуроновой кислоты, этерифицированный на 50% этиловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers) в диметилсульфоксиде (Aldrich). Отбирают аликвоты этого раствора и к нему добавляют 1 об.% aминоэтиламинопропилметоксисилана и 0.5 г дициклогексилкарбодиимида (Aldrich). Через 6 ч два образца вышеописанного катетера обрабатывают плазмой согласно условиям, описанным в примере 14. Один из образцов погружают в раствор эфира, другой - в раствор эфира и аминоксилана и медленно их вынимают. Образец помещают в вакуумную печь при 60oC и 100 торр и оставляют там на 48 ч. Опыт с окрашиванием дает на следующий день следующие результаты:
Образец - Балл
Раствор эфира - 1
Раствор эфира и аминоксилана - 5
Только плазма - 0
Необработанный - 0
Пример 19
Готовят 1%-ный раствор гиалуроновой кислоты, этерифицированной на 100% бензиловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers), в диметилсульфоксиде (Aldrich). Отбирают аликвот этого раствора и к нему добавляют 1 об.% аминоэтиламинопропилтриметоксисилана и 0.5 г карбонилдиимидазола (Aldrich). Через 6 ч два образца ранее описанного катетера обрабатывают плазмой согласно условиям примера 14. Один из образцов погружают в раствор эфира, а другой - в раствор аминоксилана и медленно их вынимают. Образцы помещают в вакуумную печь при 60oC и 100 торр и оставляют там на 48 ч. Опыт с окрашиванием дает следующие результаты:
Образец - Балл
Раствор эфира - 1
Раствор эфира и аминоксилана - 4
Только плазма - 0
Необработанный - 0
Пример 20
Готовят 1%-ный раствор гиалуроновой кислоты, этерифицированной этиловым спиртом (Fidia Advanced Biopolymers), в диметилсульфоксиде (Aldrich). Отбирают аликвот этого раствора и добавляют к нему 1 об.% аминоэтиламинопропилтриметоксисилана и 0.5 г карбонилдиимидазола (Aldrich). Через 6 ч два образца ранее описанного катетера обрабатывают плазмой согласно условиям примера 14. Один из образцов погружают в раствор эфира, а другой - в раствор эфира и аминоксилана и медленно их вынимают. Образцы помещают в вакуумную печь при 60oC и 100 торр и оставляют там на 48 ч. Опыт с окрашиванием дает следующие результаты:
Образец - Балл
Раствор эфира - 1
Раствор эфира и аминоксилана - 4
Только плазма - 0
Необработанный - 0
Пример 21
Готовят 1%-ный раствор сшитой гиалуроновой кислоты (10% карбоксильных групп, введенных в процессе внутренней этерификации, - 90% карбоксильных групп, образовавших натриевые соли), в диметилсульфоксиде (Aldrich). Отбирают аликвот этого раствора и добавляют к нему 1 об.% аминоэтиламинопропилтриметоксисилана и 0.5 г дициклогексилкарбодиимида (Aldrich). Через 6 ч два образца ранее описанного катетера обрабатывают плазмой согласно условиям, описанным в примере 4. Один из образцов погружают в раствор эфира, другой - в раствор эфира и аминоксилана и медленно их вынимают. Образцы помещают в вакуумную печь при 60oC и 100 торр и оставляют там на 48 ч. Опыт с окрашиванием дает следующие результаты:
Образец - Балл
Раствор эфира - 1
Раствор эфира и аминоксилана - 5
Только плазма - 0
Необработанный - 0
Пример 22
Готовят 1%-ный раствор альгиновой кислоты (50% карбоксильных групп этерифицированных групп, бензиловым спиртом, и 50% карбоксильных групп, образовавших соли) в диметилсульфоксиде (Aldrich). Отбирают аликвот этого раствора и добавляют 1 об.% aминоэтиламинопропилтриметоксисилана и 0.5 г дициклогексилкарбодиимида (Aldich). Через 6 ч два образца ранее описанного катетера обрабатывают плазмой согласно условиям примера 14. Один из образцов погружают в раствор эфира, другой - в раствор эфира и аминоксилана и медленно их вынимают. Образцы помещают в вакуумную печь при 60oC и 100 торр и оставляют там на 48 ч. Опыт с окрашиванием дает следующие результаты:
Образец - Балл
Раствор эфира - 1
Раствор эфира и аминоксилана - 4
Только плазма - 0
Необработанный - 0
Следовательно, цель данного изобретения состоит в создании новых и усовершенствованных способов получения предметов, покрытых тонким слоем гиалуроновой кислоты или ее производных или других полусинтетических полимеров, химически связанных с субстратом. Эти способы могут быть применены для производства материалов и изделий с гидрофильными поверхностями. Более конкретно, способ может быть использован при приготовлении материалов для биомедицинских и хирургических целей, в урологии, ортопедии, оториноларингологии, ганстроэнтерологии, офтальмологии, при лечении сердечно-сосудистых заболеваний и в диагностических целях, приспособлений для внешнего и внутреннего использования, таких как катетеры, приемники для крови, направляющие капилляры, зонды, шприцы, хирургические инструменты, зонды, шприцы, хирургические инструменты, контейнеры, фильтрационные системы, при изготовлении протезов или для хирургических целей или имплантантов. Можно наносить покрытие на искусственные сухожилия, суставы, штифты, сердечные клапаны, заменители костей и сосудов, трансплантаты, венозные катетеры, глазные линзы, заменители мягких тканей, и т.д. Примерами приспособлений, на которые можно наносить покрытия, являются контактные линзы. Можно также наносить покрытия на сложные приспособления, симулирующие физиологические процессы, такие как искусственные почки, оксигенаторы крови, искусственные сердце, поджелудочная железа и печень. Наконец, в области диагностирования покрытия можно наносить на лабораторное оборудование, чашки для клеточных или тканевых культур и/или регенерации и на подложки для активных веществ, таких как пептиды, пружины или антитела.
Формула изобретения
1. Способ нанесения на поверхность предмета покрытия на основе гиалуроновой кислоты или ее производного, включающий взаимодействие гиалуроновой кислоты или ее производного с алкоксисилановым агентом сочетания в водной среде или в органическом растворителе в присутствии конденсирующего или бифункционального агента с получением раствора, содержащего продукт реакции гиалурновой кислоты или ее производного и алкоксисиланового агента сочетания, обработку поверхности предмета плазмой, нанесение на обработанную поверхность указанного раствора, содержащего продукт реакции гиалуроновой кислоты или ее производного и алкоксисиланового агента сочетания, удаление раствора с поверхности указанного предмета, тогда как указанный продукт реакции гиалуроновой кислоты или ее производного и алкоксисиланового агента сочетания реагирует с указанной поверхностью предмета. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что алкоксисилановый агент сочетания содержит сульфгидрильные группы или аминогруппы. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что алкоксисилановый агент сочетания представляет собой гамма-аминопропилтриэтоксисилан или N-бета(аминоэтил)-гамма-аминопропилтриметоксисилан. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что реакция между алкоксисилановым агентом сочетания и гиалуроновой кислотой или ее производным протекает в водной среде в присутствии 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида в качестве указанного конденсирующего агента или в органическом растворителе в присутствии дициклогексилкарбодиимида в качестве указанного конденсирующего агента. 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что реакция между алкоксисилановым агентом сочетания и гиалуроновой кислотой или ее производным протекает в присутствии дополнительно введенного N-гидроксисукцинимида, гидроксисульфосукцинимида, гидроксисульфосукцинимида, гидроксибензотриазолгидрата или подобного соединения, которое катализирует реакцию между карбоксильными группами гиалуроновой кислоты и алкоксисилановым агентом сочетания или способствует ей. 6. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная плазма представляет собой плазму кислорода, плазму крови, плазму воды, плазму спирта, плазму ацетона, плазму оксигенированного соединения, плазму азота, плазму аргона или смесь двух или нескольких плазм. 7. Способ по п.1, отличающийся тем, что производные гиалуроновой кислоты представляют собой полный или частичный бензиловый эфир гиалуроновой кислоты или полный или частичный этиловый эфир гиалуроновой кислоты. 8. Способ по п.1, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выполнен из материала, который является совместимым с физиологическими жидкостями. 9. Способ по п.1, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выбран из группы, включающей катетеры, приемники для крови, направляющие капилляры, зонды, шприцы, хирургические инструменты, контейнеры, фильтрационные системы, искусственные сухожилия, суставы, штифты, сердечные клапаны, заменители костей и сосудов, трансплантаты, венозные катетеры, внутриглазные линзы, контактные линзы, заменители мягких тканей, искусственные почки, оксигенераторы крови, искусственные сердце, поджелудочная железа и печень. 10. Способ по п.1, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выбран из группы, включающей предметы лабораторного оборудования, чашки для регенерации клеток и тканей и носители для активных веществ, являющихся пептидами, протеинами и антителами. 11. Способ нанесения на поверхность предмета покрытия на основе полусинтетического полимера, включающий взаимодействие полусинтетического полимера с алкоксисилановым агентом сочетания в водной среде или в среде органического растворителя в присутствии конденсирующего или бифункционального агента с получением раствора, содержащего продукт реакции полусинтетического полимера и алкоксисиланового агента сочетания, обработку поверхности предмета плазмой, нанесение на обработанную поверхность указанного предмета раствора, содержащего продукт реакции полусинтетического полимера и алкоксисиланового агента сочетания, удаление раствора с поверхности указанного предмета, тогда как указанный продукт реакции полусинтетического полимера и алкоксисиланового агента сочетания реагирует с указанной поверхностью предмета. 12. Способ по п.11, отличающийся тем, что указанная плазма представляет собой плазму кислорода, плазму крови, плазму воды, плазму спирта, плазму ацетона, плазму оксигенированного соединения, плазму азота, плазму аргона или смесь двух или нескольких плазм. 13. Способ по п. 11, отличающийся тем, что реакция между полусинтетическим полимером и алкоксисилановым агентом сочетания протекает в водной среде в присутствии 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида в качестве указанного конденсирующего агента или в среде органического растворителя в присутствии дициклогексилкарбодиимида в качестве указанного конденсирующего агента. 14. Способ по п. 11, отличающийся тем, что реакция между полусинтетическим полимером и алкоксисилановым агентом сочетания протекает в присутствии дополнительно введенного N-гидроксисукцинимида, гидроксисульфосукцинимида, гидроксибензотриазолгидрата или подобного соединения, которое катализирует реакцию между функциональными группами полусинтетического полимера и алкоксисиланового агента сочетания или способствует ей. 15. Способ по п.11, отличающийся тем, что полусинтетический полимер выбран из группы, состоящей из эфира многоатомного спирта и гиалуроновой кислоты, внутреннего эфира кислого полисахарида, эфира карбоксиметилцеллюлозы, эфира карбоксиметилхитина, эфира карбоксиметиламида, активного эфира карбоксилсодержащего полисахарида, сульфированного эфира гиалуроновой кислоты, эфира альгиновой кислоты, эфира хитина, эфира хитозана, эфира пектовой и эфира пектиновой кислот. 16. Способ по п.11, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выполнен из материала, который является совместимым с физиологическими жидкостями. 17. Способ по п.11, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выбран из группы, включающей катетеры, приемники для крови, направляющие капилляры, зонды, шприцы, хирургические инструменты, контейнеры, фильтрационные системы, искусственные сухожилия, суставы, штифты, сердечные клапаны, заменители костей и сосудов, трансплантаты, венозные катетеры, внутриглазные линзы, контактные линзы, заменители мягких тканей, искусственные почки, оксигенераторы крови, искусственные сердце, поджелудочная железа и печень. 18. Способ по п.11, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выбран из группы, включающей предметы лабораторного оборудования, чашки для регенерации клеток и тканей и носители для активных веществ, являющихся пептидами, протеинами и антителами. 19. Способ нанесения на поверхность предмета покрытия на основе гиалуроновой кислоты или ее производного, включающий обработку поверхности предмета плазмой, погружение обработанной поверхности предмета в раствор, содержащий полиэтиленимин с получением поверхности, содержащей аминогруппы, взаимодействие погруженной обработанной поверхности предмета с гиалуроновой кислотой или ее производными в присутствии карбодиимида или по меньшей мере одного вещества, выбранного из группы, содержащей N-гидроксисукцинимид, гидроксисульфосукцинимид, гидроксибензотриазолгидрат и им подобных, которые катализируют реакцию между карбоксильными группами гиалуроновой кислоты или ее производного и аминогруппами поверхности. 20. Способ по п.19, отличающийся тем, что производные гиалуроновой кислоты представляют собой полный или частичный бензиловый эфир гиалуроновой кислоты или полный или частичный этиловый эфир гиалуроновой кислоты. 21. Способ по п. 19, отличающийся тем, что реакция между обработанной поверхностью и гиалуроновой кислотой или ее производным осуществляется в водном растворе в присутствии N-гидроксисукцинимида и 1-этил-3-(3-диметиламинопропилкарбодиимида) или в органическом растворителе в присутствии N-гидроксисукцинимида и дициклогексилкарбодиимида. 22. Способ по п.19, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выполнен из материала, который является совместимым с физиологическими жидкостями. 23. Способ по п.19, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выполнен из полимерного материала, керамического материала или металла. 24. Способ по п.19, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выполнен из металла, выбранного из группы, включающей титан, сплав титана, сталь и сплав хрома с кобальтом. 25. Способ по п.19, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выбран из группы, включающей катетеры, приемники для крови, направляющие капилляры, зонды, шприцы, хирургические инструменты, контейнеры, фильтрационные системы, искусственные сухожилия, суставы, штифты, сердечные клапаны, заменители костей и сосудов, трансплантаты, венозные катетеры, внутриглазные линзы, контактные линзы, заменители мягких тканей, искусственные почки, оксигенераторы крови, искусственные сердце, поджелудочная железа и печень. 26. Способ по п.19, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выбран из группы, включающей предметы лабораторного оборудования, чашки для регенерации клеток и тканей и носители для активных веществ, являющихся пептидами, протеинами и антителами. 27. Способ нанесения на поверхность предметов покрытия на основе полусинтетического полимера, включающий обработку поверхности предмета плазмой, погружение обработанной поверхности предмета в раствор, содержащий полиэтиленимин, взаимодействие погруженной отработанной поверхности предмета с полусинтетическим полимером в присутствии карбодиимида и по меньшей мере одного вещества, выбранного из группы, состоящей из N-гидроксисукцинимида, гидроксисульфосукцинимида, гидроксибензотриазолгидрата и им подобных, способных усилить реакцию, которая промотируется этилендиметиламинопропилкарбодиимидом. 28. Способ по п.27, отличающийся тем, что полусинтетический полимер выбран из группы, состоящей из эфира многоатомного спирта и гиалуроновой кислоты, внутреннего эфира кислого полисахарида, эфира карбоксиметилцеллюлозы, эфира карбоксиметилхитина, эфира карбоксиметиламида, активного эфира карбоксилсодержащего полисахарида, сульфированного эфира гиалуроновой кислоты, эфира альгиновой кислоты, эфира хитина, эфира хитозана, эфира пектовой и эфира пектиновой кислот. 29. Способ по п. 27, отличающийся тем, что реакцию между отработанной поверхностью и полусинтетическим полимером проводят в водном растворе в присутствии N-гидроксисукцинимида и 1-этил-3-(-3-диметиламинопропилкарбодиимида) или в водном растворе в присутствии N-гидроксисукцинимида и дициклогексилкарбодиимида. 30. Способ по п.27, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выполнен из материала, который является совместимым с физиологическими жидкостями. 31. Способ по п.27, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выполнен из полимерного материала, керамического материала или металла. 32. Способ по п.27, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выполнен из металла, выбранного из группы, включающей титан, сплав титана, сталь и сплав хрома с кобальтом. 33. Способ по п.27, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выбран из группы, включающей катетеры, приемники для крови, направляющие капилляры, зонды, шприцы, хирургические инструменты, контейнеры, фильтрационные системы, искусственные сухожилия, суставы, штифты, сердечные клапаны, заменители костей и сосудов, трансплантаты, венозные катетеры, внутриглазные линзы, контактные линзы, заменители мягких тканей, искусственные почки, оксигенераторы крови, искусственные сердце, поджелудочная железа и печень. 34. Способ по п.27, отличающийся тем, что предмет, на который наносится покрытие, выбран из группы, включающей предметы лабораторного оборудования, чашки для регенерации клеток и тканей и носители для активных веществ, являющихся пептидами, протеинами и антителами. Приоритет по признакам:
07.02.1995 - по пп.1 - 18;
20.12.1995 - по пп.19 - 34. |
